支原体检测中的PCR法和LAMP方法各有其优势和劣势，以下是两种方法的比较： PCR法 优势: 1.高灵敏度：PCR法可以扩增支原体DNA，具有很高的灵敏度。 2.操作简便：PCR操作相对简单，结果准确，速度快，通常3个小时左右即可得到结果。 3.可靠性：PCR法已成为日常细胞培养维护的可靠方法...

  免疫沉淀技术的实验设计通常包括以下几个关键步骤： 1. 目标蛋白质的选择： 2. 抗体的选择：选择特异性强、亲和力高的抗体来捕获目标蛋白质 3. 样本的准备：收集和准备细胞或组织样本。 4. 蛋白质的裂解和释放：选择合适的裂解条件，如pH值、离子强度、去污剂等。 5. 蛋白质浓度的测定：确定裂解液中蛋白质...

  免疫沉淀（immunoprecipitation）是指利用抗体可与抗原特异性结合的特性，将抗原（常为靶蛋白）从混合体系沉淀下来，初步分离靶蛋白的一种方法。免疫共沉淀（coimmunoprecipitation）是一种在体外探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理非常简单，如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相...

  免疫沉淀实验不同于WB实验的样品制备，对实验样品制备要求更高，除了要控制所有操作尽量在冰上完成外，关键的是裂解液的成分，裂解液成分直接决定了样品质量。 主要影响： 1. 蛋白的释放：许多目的蛋白定位在细胞器，质膜，细胞核，细胞骨架中，但通常这些亚细胞结构很难被裂解液有效溶解，所以很难将这些蛋白释放出来。 2. 蛋白相...

  免疫沉淀技术的实验方法通常包括以下步骤： 1. 样本准备 2. 细胞裂解：使用裂解缓冲液（含有蛋白酶抑制剂以防止蛋白质降解）裂解细胞，释放蛋白质。 3. 蛋白质浓度测定：使用BCA、Bradford或Lowry等方法测定裂解液中蛋白质的浓度。 4. 抗体预处理：如果使用预固定的抗体，需先将抗体固定在固相支持物上...

  染色质免疫共沉淀（Chromatinimmunoprecipitation，ChIP）技术是目前公认的研究此相互作用的选择，是真核生物基因表达机制研究中不可或缺的技术之一。 它的基本原理是在活细胞状态下，固定蛋白质-DNA（染色质）复合物，并将其切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法（抗体亲和）沉淀此复合体，特异...

  支原体检测中的PCR法和LAMP方法各有其优势和劣势，以下是两种方法的比较： PCR法 优势: 1.高灵敏度：PCR法可以扩增支原体DNA，具有很高的灵敏度。 2.操作简便：PCR操作相对简单，结果准确，速度快，通常3个小时左右即可得到结果。 3.可靠性：PCR法已成为日常细胞培养维护的可靠方法...

  ChIP技术的应用： 1. 转录因子结合位点的鉴定：研究特定转录因子在基因组上的结合模式。 2. 组蛋白修饰的分布：分析不同组蛋白修饰在基因组上的分布情况，这些修饰与基因的活跃或沉默有关。 3. DNA甲基化研究：结合ChIP技术可以研究DNA甲基化对基因表达的影响。 4. 染色质结构和功能：研究染色质重塑对基...

  支原体是一类细菌，由于缺乏细胞壁，具有灵活的膜结构。这使得支原体的形态多变，很难在高倍显微镜下识别。并且能够抵抗压力、温度、渗透压和脱水，对许多针对细胞壁合成的常见抗*素具有抗性。它们的体积非常小，直径通常在0.15~0.3μm，因此能够轻易地穿过过滤系统。支原体能在哺乳动物细胞培养中可以高浓度生长，而不引起明显的混浊或其他可见的污染...

  RIP实验步骤通常包括： 1. 细胞收集与交联：培养细胞至适当密度。使用交联剂（如甲醛）进行交联，以固定蛋白质-RNA复合物。 2. 细胞裂解：收集细胞并进行裂解，释放RNA-蛋白质复合物。在裂解过程中添加蛋白酶抑制剂以防止蛋白质降解。 3. 超声处理：使用超声波破坏细胞，获得更小的染色质片段，这有助于后续步骤中抗体...

  目前有 210 +种不同种类的支原体分布于人类、动物、昆虫和植物中，其中 20 +种在细胞培养中被发现为污染物。支原体在实验室中的传播来源多种多样，主要来源包括实验室人员、胎牛血清（FBS）或新生牛血清（NBS）、以及由猪来源的胰蛋白酶溶液。此外，来自其他实验室或商业供应商的细胞培养物、培养基、污染的试剂；非无菌供应品、培养基和溶液；实验...

  细胞培养中支原体检测出现假阴性结果可能由以下原因引起： 1. 样本质量问题：如果采集的样本中含有抑制剂或者样本在处理、存储过程中出现问题，可能会影响PCR反应，导致假阴性。 2. 技术或操作问题：实验操作中的误差，如样本处理不当、试剂配制错误、仪器设备问题等，都可能导致假阴性结果。 3. 检测方法的局限性：某些检测方...