杭州郑州鼠尾胶原

鼠尾胶原蛋白：胶原蛋白（Collagen）是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分，但在皮肤、肌腱、骨骼中分布较为普遍。胶原蛋白在结构和遗传学上被分为不同类型，I型胶原蛋白（Collagen, Type I）结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体，在37℃中性条件下可形成3股螺旋结构，被普遍用于多种细胞的培养基质，如肝细胞、纤维细胞、脊髓神经节、雪旺氏细胞等。另外，I型胶原蛋白在细胞生长、分化、迁移和组织形态的发生等方面也具有重要应用。胶原蛋白I（rat tail tendon collagen type I）根据Birkedal-Hansen方法，经过醋酸（HAc）抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备所得，可用于制备三维胶，模拟细胞真实的生长环境；也可以用于包被组织培养皿表面，提高细胞表面粘附性，比如培养角质形成细胞、肝细胞等原代细胞。鼠尾胶原醋酸溶解：在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。杭州郑州鼠尾胶原

I型鼠尾胶原是借鉴Navneeta Rajan, Jason Habermehl法，经过乙酸抽提、离心、灭菌、透析等步骤制备得到的高纯度、高活性胶原蛋白，属于医药级别产品，可用于包被细胞培养器皿（单分子层包被），适合多种类型细胞的贴壁如肝脏细胞、神经节细胞、胚胎细胞、肌细胞、肺细胞、神经鞘细胞等。I型胶原蛋白包被细胞培养板，规格为6/24孔板，表面经I型胶原蛋白包被，可以很好的降低蛋白质的吸附。使用这种细胞培养板培养细胞，可以获得良好的细胞贴壁率，细胞增殖速度快，形态均一，细胞培养成功率高。上海正规鼠尾胶原厂家推荐鼠尾胶原醋酸溶解：不要晃动或搅拌。

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：胶原蛋白具有抗氧化作用，但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建，对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的：探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法：将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿（实验组）和普通培养皿（对照组）中，并且均用0，10，100μmol/L H2O2诱导。24 h后，以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态，应用MTT 比色法检测心肌细胞存活率，TUNEL 法检测心肌细胞凋亡形态，流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率，黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平，Western-Blot 检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。

胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同，每一条亚基形成一股左手旋转的螺旋，其中每 3个氨基酸残基形成一圈螺旋。3 条左手螺旋再扭在一起形成一个右手大螺旋。这样的螺旋称为 3股螺旋。小的甘氨酸残基位于3股螺旋内部。3股螺旋式的棒状胶原分子的大小约是3000×15埃，这些棒状分子首尾相连，并侧向排列形成胶原微丝（其直径可从50埃至数千埃）。胶原分子在两端及沿轴向每隔 680埃的距离存在极性区，这些极性区能和重金属离子结合，使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。制备鼠尾胶原（两个同学一组操作）。

鼠尾胶原蛋白的获取也相当“讲究”，首先要以无毒方法捕到家鼠。取尾长20cm以上者，齐尾根部切下尾巴，洗净后浸于75%酒精中。在无菌操作下剥去鼠尾皮肤，即可见附于鼠尾骨上的4束韧带。每束韧带中，位于外面及近骨一面的为白色纤维，较光洁，微发亮。纤维之间为易碎裂的间质。而剥去下来的“纤维”，就放置在嘉兴眼库中，以供需要时及时提取。让小小的老鼠尾巴发挥其神奇的作用，以医学人严谨、踏实、不断进取的医学态度，让鼠尾胶原蛋白帮助更多的人，恢复角膜的光明，重现光明的世界。结果无鼠尾胶原时，前庭毛细胞悬浮于外液，不宜封接。南昌正规鼠尾胶原进货价

整个操作请在无菌环境下无菌操作，避免污染以影响细胞生长。杭州郑州鼠尾胶原

酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原及相对分子质量和浓度检测鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下，其腱性组织被水解成胶冻状溶液，从而分解成鼠尾Ⅰ型胶原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型胶原150 μL滴在薄膜上，可形成液滴状胶原蛋白凝胶( ，其生物力学强度极差，一碰即散。将鼠尾胶原蛋白进行SDS-PAGE，结果显示：Ⅰ型胶原蛋白原液在相对分子质量130 000附近有明显条带，另一条带的相对分子质量大于170 000(图 2) 。胶原蛋白浓度为1.8 mg/mL。吸取矿化液倒入小培养皿中，将鼠尾Ⅰ型胶原纤维浸泡在矿化液中。矿化2、6 d后，分别将矿化后的Ⅰ型胶原纤维进行TEM和电子衍射观察。杭州郑州鼠尾胶原

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