HE染色伊红着色淡分析及应对原因:(1)伊红染液的pH值可能大于5;(2)蓝化液残留过多;(3)切片太薄;(4)切片经伊红染色后在乙醇脱水时间过长。对策:检查伊红染液的pH值,如果必要的话,用乙酸将其调节在4~5之间,从而使伊红染色彩艳丽。确保每次蓝化步骤完成后,使用的弱碱性溶液被充分洗去,玻片上没有残留的弱碱性溶液。检查切片的厚度。脱水时不要让切片在低浓度乙醇停留时间过长,因为含水多的低浓度乙醇会将伊红的颜色分化掉。冰冻切片是否可以做HE染色?山东靠谱的HE染色公司
HE 染色是病理的主要常規染色,其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,藉由電荷與吸附性的差異,組織結構對不同染料的結合程度不同,我們可以發現Hematoxylin呈色在細胞核,Eosin Y則表現在細胞質與間質,染色優良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細胞型態與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,而且每個實驗室需要的顏色深淺不一,使用者可以依自己的需求另行調整,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟湖南专业的HE染色报告HE染色试验技术及注意事项。
HE染色常见问题:Q5:细胞核呈棕红色改变答:苏木素染液过度氧化;或苏木素染色后反蓝不足导致。应该立即更换苏木素染色液。或在流动自来水(一般自来水PH7.5-7.8),或在稀释的氨水溶液,或在0.2%碳酸氢钠中适当浸泡,这些步骤均可一定程度地加强苏木素染色后的反蓝效果。Q6:伊红染色较淡答:伊红的PH改变了(PH可能已大于5);或反蓝液体未漂洗干净,残留后影响胞浆嗜酸性染色;或者切片太薄并且在随后的脱水步骤停留过久。对策:检查伊红染色液PH,可采用乙酸调至4.6-5.0。根据以上提示,调整实验步骤。
HE染色石蜡和冰冻切片样本的处理,样品处理:a.对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10分钟;换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟;无水乙醇5分钟;90%乙醇2分;70%乙醇2分钟;蒸馏水2分钟.b.对于冰冻切片:蒸馏水2分钟。c对于培养细胞:用4%多聚甲醛固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品:苏木素染色液染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。浸自来水中冲洗去多余的染色液,约10分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。95%乙醇5秒。伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。此时,如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。HE染色注意事项以及常规的流程解析。
HE染色病理技术中**常用的一种方法,通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法,以达到准确,完整的病理诊断。一、染色目的 病理学的所有切片,都必须通过一种以上的染料,通过各种不同的方法,将切片中各种不同的物质,在不同染液的作用下,将其显示出来,使之在光学显微镜下,能够完全的观看各种结构。例如,HE染色,好质量的切片可以清晰地显示出多不同的结构,细胞核着蓝黑色,细胞浆着粉红色,软骨着蓝色等。清晰的结构为诊断提供的依据,因此,染色技术也是病理技术中的重要组成部分,必须不断地总结,方能提高。HE染色是病理实验中比较用的一种基础染色方法。宁夏结果客观的HE染色外包
关于HE染色,常用的结果分析原理。山东靠谱的HE染色公司
HE染色原理:一、细胞核染色原理:苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外。使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。二、细胞浆染色原理:细胞浆内主要成分是蛋白质,为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系,当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时,胞浆对外不显电性,此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时,大于蛋白质的等电点pH值,表现酸性电离,而带负电荷的阴离子,可被带正电荷的染料染色,现时胞核也被染色,核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下,在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷(阳离子),就可被带负电荷(阴离子)的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阳离子)结合而使细胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织,嗜伊红颗料等被***成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明的对比山东靠谱的HE染色公司
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