使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞,加入去污剂,如sds等,除去膜脂。去除细胞内的蛋白质,包括与DNA结合的组蛋白,通过加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA,如实验不严密,可省略此步。沉淀DNA,需在冷乙醇或异丙醇中沉淀,放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上,原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。总结:DNA提取方法有下面⑦种一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。四.异丙醇沉淀法:基本同1法,*用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)五.表面活性剂快速制备法:用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和。通用型植绒采样拭子是由尼龙短纤维绒毛头和医用级 ABS 塑料杆构成。本地植绒拭子共同合作
猪瘟***采样拭子非洲猪瘟(ASF)的疫病特点及定量PCR检测方案非洲猪瘟(ASF)病由非洲猪瘟***(...DNA提取试剂盒基因组快速提取试剂盒.产品简介:本试剂盒采用独特的包装体系,包含...DNA基因采样套装基因采样套装用途:基因检测,分子诊断,DNA采集,细胞学,基因检测采样,**基因...唾液DNA样本采集器●辐射消毒,确保产品无菌。●采用国际通用的方便***的纸塑包装。●**密封包...CY-93050采样拭子采样拭子产品特点:①采用国际通用的方便***的纸塑包装。②γ射线***,确保无菌...一次性DNA采集包一次性DNA采集包一次性口腔采样棒,可用于口腔粘膜取样,作为DNA检测;也适用...CY-98000PS基因采样套装CY-98000PS基因采样套装一次性口腔采样棒,可用于口腔粘膜取样,作为DNA检测;也...CY-98000基因检测采样盒CY-98000基因检测采样盒一次性口腔采样棒,可用于口腔粘膜取样,作为DNA检测;也...CY-98000FS基因采样套装CY-98000FS基因采样套装基因采样套装用途:基因检测,分子诊断,DNA采集,细胞...CY-98000采样拭子产品用途:尼龙植绒拭子用途***。本地植绒拭子共同合作植绒拭子独有的套管设计,保证套管内空气流通,防止检材因潮湿密封环境而导致霉变。
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