鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用:胶原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿(实验组)和普通培养皿(对照组)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2诱导。24 h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果与结论:两组培养皿中,随着过氧化氢浓度的增高,均可见细胞凋亡状态明显加重,细胞存活率及细胞内过氧化氢活力明显下降,细胞凋亡率及细胞内丙二醛水平明显增高,Bcl-2/Bax比值明显降低,呈剂量依赖性。酸法是提取胶原蛋白比较常用和有效的方法,用酸法提取的胶原较大程度地保持了其三股螺旋结构。开封正规鼠尾胶原产品介绍
一种基于鼠尾胶原蛋白:1.一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,为鼠尾胶原蛋白、聚乙烯醇、壳聚糖、水制成的冻干止血材料,各材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为 1-10% 0. 2-5% 0.2-2%,余量为水。2.根据权利要求1所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,其特征在于冻干止血材料中,各材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为5% 2% 1%,余量的水。3.根据权利要求1或2所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,其特征在于鼠尾胶原蛋白来源于各品系SFP级大鼠鼠尾。金华重庆鼠尾胶原一种基于鼠尾胶原蛋白:各材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为5% 2% 1%,余量的水。
鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上,pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,在成胶过程中需要加入0.06X 体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。需要的溶液 ( 均需要 无菌 、 预冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示 )或 10x 培养液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 双蒸水不含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):将200ul生友鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100ul 10xPBS或10x培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。
胶原蛋白(Collagen)是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分,但在皮肤、肌腱、骨骼中分布*为普遍。胶原蛋白在结构和遗传学上被分为不同类型,I型胶原蛋白(Collagen, Type I)结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体,在37℃中性条件下可形成3股螺旋结构,被普遍用于多种细胞的培养基质,如肝细胞、纤维细胞、脊髓神经节、雪旺氏细胞等。另外,I型胶原蛋白在细胞生长、分化、迁移和组织态的发生等方面也具有重要应用。注意事项:1) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。2) 整个操作请于冰上进行,因室温下鼠尾胶原I可迅速成胶。3) 整个操作请在无菌环境下无菌操作,避免污染以影响细胞生长。胶原蛋白就像骨骼中的一张充满小洞的网,它会牢牢地留住就要流失的钙质。
如何补充胶原蛋白我们都知道胶原蛋白本身是大分子,不能被我们的肠胃直接吸收,而是会被分解转化为氨基酸,相当于吃进去了普通的蛋白质。只有具备生物活性的小分子胶原蛋白,才能直接渗进小肠黏膜细胞,补充到全身肌肤中。所以,想要吃进去的胶原蛋白能够有美肤**的效果,首先要挑对胶原蛋白。1、口服含胶原蛋白的食物骨肉汤、口服胶原蛋白补品等都属于胶原蛋白食物。但由于会被人的消化系统过滤掉很大一部分,且真正能到达肌肤并起到作用的量非常有限2.直接皮下注射主要用于填充深的皱纹,皮肤损伤造成的缺损(如青春痘疤)和修补脸形的缺陷等。其效果立竿见影,但注射到皮肤内的胶原蛋白会被人体逐渐吸收,因此其功效只能维持半年至一年,而且少数人群可能会出现过敏、传染等副作用。制备鼠尾胶原:重复步骤2、3,直至尾腱量够用。合肥正规鼠尾胶原销售厂家
鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用。开封正规鼠尾胶原产品介绍
鼠尾胶原凝胶体在皮肤细胞原代培养中的应用:在国外的药理,毒理和皮肤病学的研究领域中已得到 的限翩,否则培养成功率极低.本文采用鼠尾胶原凝胶体作为滋养层,提高了培养细胞的 材料和方法r1]实验材料:培养液DEIdE(G皿}ao),表皮细胞生长因子(EGF Sigma),小牛血清(上海祟明生物制品厂),氢化可的松,胰岛素(Sigm,青,链霉素,胰 蛋白酶,]~DTA,细胞培养皿~35mill(00rningrSA).(2)皮肤基底细胞的分离和细胞 悬液的制备:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮肤,剪下 皮肤后.以 消化12h.轻刷表皮面,收集细胞悬液,加入细胞培养液. 用梯度离心收集细胞,以3xi0/m]浓度接种平 皿.(3)鼠尾胶原 凝胶体的制备:具体方法参见文献c13o(4)培养皿的胶原铺制:i.0ml的酸溶解胶原滴 入~35mm培养皿中,铺满平皿底部;将平皿暴露于氨气中30min,然后置空气中 30rain,散尽剩余氨气。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。开封正规鼠尾胶原产品介绍
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。B.含细胞的三维胶原的制备(以配制200ul鼠尾胶原蛋白(5mg/ml)加到(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul10PBS10培养液,混匀(混匀后pH左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放20分钟待胶凝固后,加入适...