合肥正规鼠尾胶原推荐厂家

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿(实验组)和普通培养皿(对照组)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2诱导。24 h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。合肥正规鼠尾胶原推荐厂家

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项：通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等 步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿，培养一些在普通细胞 培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶，模拟真实的生长环境， 使细胞在三维环境中生长。 1，在使用鼠胶原蛋白 型包被的细胞培养皿中检查到PC-12 细胞的 贴壁和生长。 1mg/ml浓度以上，pH 左右时可形成具有一定强度的三维胶，检查到 NIH-3T3 细胞在三维胶内正常生长、PC-12 细胞在三维胶表面 正常生长。 使用方法： 1、细胞培养器皿的表面包被 推荐浓度： 1-5ug/cm 0.012mg/ml。按以下表格体积加到相应的培养器皿中。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。济南鼠尾胶原厂家供应鼠尾胶原醋酸溶解：不建议用过滤的方法无菌化。

胶原蛋白（Collagen）是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分，但在皮肤、肌腱、骨骼中分布*为普遍。胶原蛋白在结构和遗传学上被分为不同类型，I型胶原蛋白（Collagen, Type I）结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体，在37℃中性条件下可形成3股螺旋结构，被普遍用于多种细胞的培养基质，如肝细胞、纤维细胞、脊髓神经节、雪旺氏细胞等。另外，I型胶原蛋白在细胞生长、分化、迁移和组织态的发生等方面也具有重要应用。注意事项：1） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2） 整个操作请于冰上进行，因室温下鼠尾胶原I可迅速成胶。3） 整个操作请在无菌环境下无菌操作，避免污染以影响细胞生长。

简介：鼠尾I型胶原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备，纯度达到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准：1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞，贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL，pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶，NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。期间不断搅拌，防止冻结成块，得到胶原溶胀液。

鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06X 体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。需要的溶液 ( 均需要 无菌 、 预冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示 )或 10x 培养液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 双蒸水不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul生友鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul 10xPBS或10x培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了产率和生物相容性，降低了成本，适用于生物医用材料。成都正规鼠尾胶原生产厂家

将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。合肥正规鼠尾胶原推荐厂家

实验应用：鼠尾胶原为底物的人鼻腔纤毛上皮细胞培养模式的建立目的建立以鼠尾胶原为贴附底物的人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式，为人鼻腔黏液纤毛运输系统的研究提供科学有效的方法.方法制备鼠尾胶原并铺片，以鼠尾胶原为贴附底物组织块培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞，培养7天时进行HE染色及扫描电镜和透射电镜观察细胞形态和结构，应用高速摄像技术测量纤毛摆动频率.结果鼠尾胶原要平坦均匀，平均厚度约为1mm；HE染色可见上皮细胞呈单层向周围爬开；扫描电镜下见纤毛上皮细胞呈不规则多角形，纤毛周围可见微绒毛;透射电镜下可见纤毛上皮细胞间为紧密连接；同一细胞任意两点纤毛摆动频率是相同的；同一来源体外培养的钩突和下鼻甲的纤毛摆动频率是相同的.结论以鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立，为今后研究鼻内用药对纤毛清理功能的影响提供了良好的方法和途径。合肥正规鼠尾胶原推荐厂家