生物病毒是一种个体及其微小的生物,甚至比、细菌还要小得多,必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖,是一种非细胞型生物。因此,不论是灭活型还是非灭活型,采样之后,病毒都是只能存活很短时间的。如果没有病毒保存液,病毒在体外几分钟就会大量降解。采样管主要是用于病毒核酸检测的,所以灭活型的保存液虽然使病毒裂解了,但是里面添加的RNA酶抑制剂可以保护其核酸,实验时只要能检测出核酸就可以作出诊断了。
影响病毒保存时间还有一个重要的因素,那就是温度。一般来说,灭活型的保存液由于只需要保护核酸不被降解,在4摄氏度保存一周,-20摄氏度保存一个月,-80摄氏度保存一年。非灭活的保存液在取样后如果不能及时检测,务必要4摄氏度低温保存,保存时间不超过48小时,如果无法及时送往检测点的需要-70摄氏度温度以下保存。 而病毒本身在体外很快就会裂解掉影响后续检测,所以在保存和运输时,就需要加入病毒保存液。广州支原体保存液****
病毒保存液使用注意事项。
①、 本产品为一次性产品,用于临床采集病毒标本的采集、运送和保存,超出预期用途不得使用。
②、 产品过有效期或者产品包装破损不得使用。
③、 采集病毒标本时应由专业人员严格按照采样程序进行,标本进行检测时,应在符合安全级别的实验室进行操作。
④、 禁止先用保存液浸润拭子后采样。
⑤、 禁止将已置入了病毒样本的保存液直接接触被采集人员。
⑥、标本采集后应当在3个工作日内运送至对应的实验室,保存温度为2~8 °C;如未能72h内送至实验室的,应当低温保存,标本应当避免反复冻融。 支原体保存液批发价格可以进行2~8天的短期储存和运输,在-70℃或液氮环境中长期储存。
病毒采样管由拭子+采样管+病毒保存液三部分构成。病毒保存液包括Hank's液基础、庆大霉素、、BSA (V)、冷冻保护剂、生物缓冲剂和氨基酸。在Hank's基础之上,添加4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五组分)等病毒稳定成分,可在较宽的温度范围内维持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分离的阳性率。
病毒保存液的质量,是提高PCR检测阳性率与病毒分离阳性率的关键因素,从根本上决定了病毒采样管的质量。添加常温稳定的类,可解决采样后的霉菌污染问题,实现采样液的常温保存。
灭活型保存液:
主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液。能有效阻止操作员二次,但是又含有Rnase抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,从而使后续能通过NT-PCR进行检测。而且能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样本保存以及运输的成本。
非灭活型保存液:
主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持型保存液。它能够保持病毒在外的活性以及抗原和核酸的完整性,含有Hanks液等,保护病毒蛋白外壳不易分解,较大程度地保持了病毒样本的原始性。这种保存液除了用于核酸提取检测外,还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测等,但是采样后长时间保存需要保持严格低温。
可见根据不同的情况,不同类型的保存液有着各自的优缺点,但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其他影响造成错误检测。 非灭活型的主要优点是检出率高,缺点是具有一定的危险性。
病毒保存液,对于很多小伙伴们而言,这个名词是新奇的,殊不知它对于各种病毒的检测具有重要的意义,把人类折磨的够呛,面对着大量的学生要投入正常的生活轨道,很多地方开始集中检测,在其中病毒保存液起到了很重要的作用,
目前对的检测方式主要还是对于病毒核酸的检测,而病毒保存液是一种采样管内浸没采样拭子病毒标本的一种保护病毒的被检测物质的液体,它主要适用于、手足口病毒、流感病毒等常见的病毒样本采集保存运输工作,可以用来采集咽拭子、鼻拭子或者特定部位的组织样本,储存的样本可以用于后续的核酸检测或者病毒培养等临床实验。 主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持型保存液。它能够保持病毒在外的活性以及抗原和核酸的完整性。江门支原体保存液批发价格
不然病毒核酸会很快降解就无法检测到核酸了所以就需要往采样管里加保存液来让病毒的核酸不要那么快被降解。广州支原体保存液****
市场上使用的病毒保存液主要有两种,一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液,另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基础培养液(MEM)或Hank's平衡盐,添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质,这种保存液使用酚红钠盐做为指示剂,溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色。保存液中添加了必须的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白质,蛋白质的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以稳定病毒的蛋白质外壳。由于保存液营养成分丰富,有利于病毒的成活但是也有利于细菌的生长,如果保存液中污染了细菌,则会大量繁殖,其代谢产物中的二氧化碳会使保存液pH值下降,从粉红色变为黄色。因而大多数厂家都在配方中添加了抑菌剂成分,推荐使用的抑菌剂为青霉素、链霉素、庆大霉素及多粘菌素B等,不推荐使用叠氮钠、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂,因为这些组分对PCR反应有影响。由于这种保存液提供的样本基本是活病毒,可以很大程度保持样本的原始性,后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测,还能用于病毒的培养和分离。但是用于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取纯化。
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