病毒采样管由拭子+采样管+病毒保存液三部分构成。病毒保存液包括Hank's液基础、庆大霉素、、BSA (V)、冷冻保护剂、生物缓冲剂和氨基酸。在Hank's基础之上,添加4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五组分)等病毒稳定成分,可在较宽的温度范围内维持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分离的阳性率。
病毒保存液的质量,是提高PCR检测阳性率与病毒分离阳性率的关键因素,从根本上决定了病毒采样管的质量。添加常温稳定的类,可解决采样后的霉菌污染问题,实现采样液的常温保存。 美迪科的非灭活病毒保存液与市场上其他厂家相比较而言不仅添加了病毒所必须的Hanks缓冲液来构建中性环境。上海病毒保存液
病毒核酸检测过程中,病毒保存液的作用尤其重要,我们的检验工作不可能在采集到样本后就立马进行检测,从采集完样品到开始检测,中间可能遇到各种问题,比如异地运输或邮寄标本,或样品太多无法按时进行检测等等,这时病毒保存液就起到了相当大的作用。病毒保存液分为灭活型和非灭活型,那么我们一般选用哪种比较好呢?
灭活型:病毒和细菌受理化因素作用后失去性,称为灭活(inactivation)。 多数病毒比细菌更容易被灭活。这也使得病毒的长期保存通常比细菌的保存更困难。其实大多数病毒耐冷不耐热,对热不稳定。55—60℃,通常在数分钟内,病毒的衣壳蛋白就会发生变性,使病毒失去能力。这可能是因为此时的病毒已失去了对正常细胞的吸附能力和/或脱衣能力。病毒存在不易保存和易的弊端,但灭活型病毒保存液完美解决了这一弊端。
深圳衣原体保存液在Hank's基础之上,添加4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五组分)等病毒稳定成分。
病毒采样管由采样拭子、病毒保存液和外包装等组成。由于没有统一的国家标准或行业标准,各生产厂家的产品差异很大。
一次性使用病毒采样管主要用于测试样品的采集,运输和储存。病毒采样管套装主要是由拭子和病毒保存液的采样管组成。可以用于流感病毒、手足口病毒和其他病毒的微生物采样和运输。
一次性使用病毒采样管从外观上看,它简洁干净,适合不同人群。而且这种包装易于打开并且使用很方便。拭子杆的设计使其易于折断并便于样本的运输。重要的是使用一次性无菌包装,辐射灭菌和包装。
灭活型保存液:
主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液。能有效阻止操作员二次,但是又含有Rnase抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,从而使后续能通过NT-PCR进行检测。而且能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样本保存以及运输的成本。
非灭活型保存液:
主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持型保存液。它能够保持病毒在外的活性以及抗原和核酸的完整性,含有Hanks液等,保护病毒蛋白外壳不易分解,较大程度地保持了病毒样本的原始性。这种保存液除了用于核酸提取检测外,还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测等,但是采样后长时间保存需要保持严格低温。
可见根据不同的情况,不同类型的保存液有着各自的优缺点,但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其他影响造成错误检测。 能保护病毒核酸不被降解,从而使后续能通过NT-PCR进行检测。
对于不同的检测目的,需要选择不同的病毒采样管,目前使用的这两种病毒采样管各有特点。为了满足不同的检测要求,以及不同的病毒检测实验室条件,采样不同的病毒采样管是非常有必要的。但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其它影响造成错误检测。拭子取样后,如果使用质量欠缺的采集工具或保存液,会影响后续的检测结果甚至造成误诊的假阳性,因此一定要选择具有专业资质厂家生产的病毒采样管。 可以用来采集咽拭子鼻拭子或者特定部位的组织样本储存的样本可以用于后续的核酸检测或者病毒培养临床实验。常用保存液厂家直销
通常在数分钟内,病毒的衣壳蛋白就会发生变性,使病毒失去能力。上海病毒保存液
由于病毒属于寄生生物,采样后体外就无法存活了,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中进行保存,为了保护病毒检测环境的安全和检测人员的安全,灭活病毒保存液其实是比较好的选择。
前面已经说灭活病毒保存液可以使病毒失去活性,失去活性后是怎么来进行检测的呢?我们使用灭活型保存液的目的是裂解核酸,释放核酸然后通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,通过这种方法来判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否了病毒。而病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出了病毒。通常我们在病毒采样后,样本并不是都能在样本采集处进行运输和保存的,因此我们就需要对采集到的病毒拭子进行运输和保留,不然病毒核酸会很快降解就无法检测到核酸了,所以就需要往采样管里加保存液来让病毒的核酸不要那么快被降解。
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