昆明正规鼠尾胶原供应商

鼠尾胶原凝胶体在皮肤细胞原代培养中的应用：在国外的药理,毒理和皮肤病学的研究领域中已得到 的限翩,否则培养成功率极低.本文采用鼠尾胶原凝胶体作为滋养层,提高了培养细胞的 材料和方法r1]实验材料:培养液DEIdE(G皿}ao),表皮细胞生长因子(EGF Sigma),小牛血清(上海祟明生物制品厂),氢化可的松,胰岛素(Sigm,青,链霉素,胰 蛋白酶,]~DTA,细胞培养皿~35mill(00rningrSA).(2)皮肤基底细胞的分离和细胞 悬液的制备:2～3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮肤,剪下 皮肤后.以 消化12h.轻刷表皮面,收集细胞悬液,加入细胞培养液. 用梯度离心收集细胞,以3xi0/m]浓度接种平 皿.(3)鼠尾胶原 凝胶体的制备:具体方法参见文献c13o(4)培养皿的胶原铺制:i.0ml的酸溶解胶原滴 入~35mm培养皿中,铺满平皿底部;将平皿暴露于氨气中30min,然后置空气中 30rain,散尽剩余氨气。I型胶原蛋白（Collagen, Type I）结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体。昆明正规鼠尾胶原供应商

胶原蛋白的提取方法：酶法提取：酶法提取是利用蛋白酶使胶原溶解，水解条件温和，反应速率快，提取的胶原蛋白仍有完整的三股螺旋结构，蛋白纯度高，理化性质稳定，且无环境污染。酶法提取常用的蛋白酶有：胃蛋白酶、胰蛋白酶或者复合酶。工艺可选择一步法，即利用酶液直接提取；二步法，即先用酸或者碱进行初步提取，然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO预处理革屑，然后用碱性蛋白酶提取胶原的水解产物。Cabeza L.F.T等[7]先用胃蛋白酶，再用碱性蛋白酶提取了2种不同的胶原水解产物。赵苍碧等[2]采用胃蛋白酶和无花果蛋白酶消化法从牛腱中提取胶原蛋白，探讨了酶和酶的加入量对提取结果的影响，给出了酶对胶原提取较佳工艺配比，酶与牛腱的质量比为0.1时效果较佳，而使用无花果蛋白酶时，0.01的配比较佳。武汉鼠尾胶原进货价鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶。

实验应用：鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用。目的：建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果：自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞，细胞角蛋白18表达阳性，免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论：成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法，并且制作简便,成本低廉。

一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法：一般的生物体中提取的胶原蛋白多为混合型，之前多从牛皮、猪皮、牛腱中提取， 但这类胶原蛋白不光有油脂等其他杂质，也存在着II型及其他一些胶原蛋白亚型；同时， 这种畜牧业大量饲养的动物存在着例如疯牛病等一些生物性疾病及病毒传染，如果用此开发医用产品更加存在着品质的不稳定及潜在的风险及危害；再次，人的真皮中主要含有I 型和III型，但III型不易大量获得，故应用单一的I型胶原蛋白是解决体外应用的医用产品引起的抗原性问题的关键，这也是I型胶原蛋白抗原性低的原因之一。同时，I型胶原蛋白的三重螺旋的氨基酸结构决定了它的一些特有的性能，如机械性能、促进细胞生长、弱抗原性、可生物降解性和胶原的自缔合性。利用鼠尾胶原可以构建类似物，该模型是进行皮肤部位型培养和制作复合皮的关键与基础。

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项：三维胶原的制备 鼠尾胶原蛋白 型在浓度1mg/ml 以上， pH 左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度 1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中，在成胶过程中需要加入 0.06体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。 需要的溶液 （均需要无菌、 预冷） 10mg/L 酚红用于pH 指示） 0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一 般不用)，双蒸水 200ul鼠尾胶原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到胶原溶液中， 会由于 NaOH 不能迅速混匀而产生局部的 胶原凝结） 立即混匀。再加入 100ul 10PBS 10培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后 pH 左右，如果PBS 或培养液中没有加 酚红，初次使用时需要用 pH 试纸测试)。胶原蛋白是一种蛋白质，能帮助连接皮肤，骨头和肌腱等身体组织。鼠尾胶原哪家好

通常情况下骨质总量中的钙、镁、磷等无机物质光占总量的百分之几而胶原蛋白等有机物质却要占超过80%。昆明正规鼠尾胶原供应商

一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱，真空冷冻干燥备用；(2)冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至200?400目； (3)在冰水浴中将粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶胀，鼠尾腱与醋酸的固液比为I克:10mL?I克:120mL，期间不断搅拌，防止冻结成块，得到胶原溶胀液； (4)称取胃蛋白酶加入到胶原溶胀液中，鼠尾腱与蛋白酶质量比为50: I?100: 1，在4°C，48?74小时酶解，期间间歇性搅拌； (5)将黏稠的胶体溶液进行高速冷冻离心处理，收集上清液；在冰水浴中，用的3?6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中，不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出，4°C沉淀10小时，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀。昆明正规鼠尾胶原供应商