细胞冻存,我们应该注意哪些事项:冻存细胞的效果好坏要看细胞复苏时的存活率。细胞冻存时,细胞内部会产生晶体,水凝固形成的高浓度溶质会对细胞产生损伤,所以在冻存过程中要尽可能降低晶体的产生。为了提高复苏存活率,可通过以下方法完成:a)降温的速度不能太快,让细胞内的水分缓慢离开细胞;b)在低温环境下冻存细胞可以降低高浓度盐对细胞中蛋白质的影响;c)冻存试剂要采用亲水的低温保护剂;d)复苏时的速度要快,这样可以减少细胞内部冰晶溶解时产生的某些可溶性成分。无血清冻存液注意事项:若需长期冻存细胞,请转移至液氮罐中贮存。厦门唐山无血清细胞冻存液
细胞冻存:取出冻存管,注明细胞名称,代数,日期。离心后,以无菌吸管吸弃上清,不要吸到底部的细胞沉淀。将细胞沉淀与冻存液充分混匀,根据计数结果,将细胞总数调节成细胞数量为5-10*105/ml为宜。将细胞冻存悬液分装进细胞冻存管中,一般2ml的冻存管中装入1-1.5ml冻存液为宜。严密封口后,使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1℃。或者,将装有细胞的冻存管放入异丙的醇冻存盒中,然后将冻存盒置于–80℃条件下过夜。若无冻存盒及其他冻存装置,可以先将冻存管置于4℃30min,再-20℃冻存1h直至完全冷冻,再转移至-80℃冰箱过夜。第二天将已经冷冻的细胞转移到液氮容器中,置于液氮上方的气相空间中储存。武汉无血清细胞冻存液厂家无血清细胞冻存液用于T淋巴细胞、NK细胞等免疫细胞的存储。
无血清细胞冻存液,通用于各种动物细胞株(tumour细胞和常规细胞),冻存细胞可在-80℃长期保存(>5年)。CellFreezingMedium配方成分明确,不含动物来源性蛋白,Chemicalbook不含血清,可减少各类细菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全。该冻存液含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分,提高细胞存活率和活力,亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。细胞冻存是细胞实验中的一个常规技术,通常细胞冻存液的配方是由胎牛血清加上DMSO组成,由于血清含有异源成分且生长过程中可能带来的风险Chemicalbook,故传统的细胞冻存配方并不适于体内研究。本产品完全由化学成分组成,无动物来源,目前测试可以很好的冻存T细胞,NK细胞以及MSC等细胞。
使用方法:1)细胞超净台无菌环境,1.5mlEP管内加入细胞混悬剂均匀混悬细胞,细胞终浓度为5×106个/ml,混悬液体积为200μl。细胞冻存剂冰水混合物中预冷,逐滴加入细胞冻存剂800μl,细胞混悬剂与细胞冻存剂的体积比控制在1:4。2)开启程序性降温,降温速率为1℃/min,较后降温至-80℃以下进行冻存。将比较例1冻存后细胞的复苏率与实施例5冻存后细胞的复苏率进行对比,具体结果如附图1所示,可见采用本发明的冻存方法能够明显提高细胞的复苏率。其他实施例通过与比较例1进行比较,也得到相同的试验结果。本发明的冻存方法不仅可以明显提高冻存后细胞复苏率,同时还可减少不同批次细胞冻存复苏率不稳定、以及避免由血清中的支原体,细菌,朊细菌及其他细菌颗粒引发的污染。需液氮冻存,且不能原位(如孔板)冻存。
产品特性:a.可直接放置于-80℃冰箱,无需降温,节省时间和精力;b.即用型,无需现配,操作方便,可减少实验中因操作引起的污染;c.在多种哺乳细胞系中经过性能验证,其复苏率和活率达90%以上;d.可长期存储于-80℃冰箱(5年以上),取用方便;e.采用成分明确的无血清配方,价格比常规自配细胞冻存液更为低廉;保存温度:2~8℃具体操作步骤:1、培养皿或培养瓶中细胞按常规方法消化,或分离获得原代细胞后,收集于离心管中。2、使用离心机离心,去除上清,收集细胞沉淀。3、根据细胞生长密度加入适量的细胞冻存液进行重悬,充分混匀(推荐冻存密度为 1-2×106/ml)。4、将细胞悬液分装至冻存管中,直接放置于-80℃冰箱保存。24小时后可移入液氮长期保存(可选)。无血清快速细胞冻存液:能够满足大部分体外培养细胞的冻存需求。深圳无血清细胞冻存液报价
无血清冻存液特性:不含动物成分。厦门唐山无血清细胞冻存液
无血清冻存液注意事项:1、请选择对数生长期细胞进行冻存。2、冻存液加入细胞后,请尽快放入-80C冰箱冻存。3、本产品冻存细胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需长期冻存细胞,请转移至液氮罐中贮存。5、冻存液中含DMSO成分,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套。无血清冻存液特性:1.不含动物成分。2.不需回温,完全即用型。3.适合各种动物细胞。4.适合无血清培养细胞与含血清培养细胞。5.复苏细胞存活率高。无血清冻存液用途:1、无血清细胞冻存液用于免疫细胞及干细胞的存储。2、细胞保藏中心,无血清细胞冻存液用于细胞株的长期保存。3、科研高校,无血清细胞冻存液用于细胞株冻存。4、无血清细胞冻存液用于医院样本库细胞样本保存。无血清冻存液稳定性及保存条件:1、置于2~8℃避光保存,有效期为1年;置于-20℃保存,有效期为3年;2、本产品请于保质期内使用,超过保质期,必须放弃使用;3、为确保产品质量,请避免反复冻融相关产品。厦门唐山无血清细胞冻存液
无血清细胞冻存液细胞冻存步骤:1.常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。2.确认所需冻存的细胞数量。3.将所需冻存细胞收集于离心管中,1000rpm,5min离心,收集细胞沉淀,并弃掉上清液。4.加入适量的冻存液于离心管中,加入量按照细胞保存浓度为5X105至1X107/ml密度,轻柔的混匀细胞,获取细胞混合液。5.将获取的细胞混合液按照1~1.5ml/管,分装于冻存管中。6.将冻存管直接放入-80℃保存,可长期保存。无血清细胞冻存液,通用于各种动物细胞系及tumour细胞系。特别的配方能有效提高细胞存活率和复苏能力。不含血清,无病毒、霉菌和支原体等微生物污染,确保冻存细胞安全。非常...