超滤作为一种膜分离技术,普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换,其原理是溶液在力的作用下,通过超滤膜孔径的筛滤,大分子量的颗粒被截留下来,而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜,从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的,这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效,可同时浓缩和纯化分子,一般来说超滤的回收率能够达到90%以上,因此得到许多人的青睐。超滤浓缩器是一种可以为蛋白质样本的浓缩和缓冲交换提供可靠准确结果的一次性超滤离心式过滤装置,与层析、透析等方法相比,超滤对被处理的分子更加温和,不需要有机萃取,不会导致蛋白变性,且简单高效。洁特6mL规格超滤浓缩器可处理体积4mL以内的样本,离心管内包含一个内置竖直的聚醚砜(PES)膜过滤装置,聚醚砜膜具备低蛋白附着、高通量的特点,可应用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD六种不同的截留分子量中。截留分子量标识和体积刻度蚀刻在浓缩器的侧面便于识别。超滤离心管还可以用于提取DNA、RNA等核酸分子,并在基因工程和生物技术中发挥重要作用。湖州离心管制造厂
选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,较常见的是10kD。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。广东100K超滤离心管选择超滤离心管在基础科学研究中也具有重要意义,如蛋白质结构解析、酵母遗传学等领域。
玻璃离心管,大家都知道,玻璃是很容易碎的,所以如果我们选择玻璃离心管时,离心机的离心力一定不能调得很高,还需要将玻璃离心管垫上橡胶垫,避免破碎,玻璃离心管的优点是管体透明,利于观察分离情况。钢制离心管,钢制离心管硬度大、抗热、抗冻、不变形等优点被普遍应用,一般钢制离心管都会循环使用。离心管尽量选择pp材质的塑料离心管,也可以选钢制的,玻璃材质因为其容易破碎,分离转速要求高,需将转速控制在2000rpm/min内,所以通常情况下不做选择。离心管的选择还可以根据自己所分离样品的大小来决定是选择微量离心管、普通离心管、大容量离心管还是离心瓶。
超滤离心管通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。虽然PES材料使非特异吸附较小化,但是,某些蛋白,特别是稀的时候,会有问题。非特异结合的程度随着个别蛋白结构的不同而不同。含有带电的或者疏水结构域的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。对超滤离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失,大多数情况下,在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率,因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用较高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上,蒸馏水彻底冲洗柱子,再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意钝化处理后别让膜干了。如果要留待以后使用,需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。超滤离心管通常具有不同材质的选择,以适应不同化学环境下的使用需求。
超滤离心管只需5到15分钟,即可对50到500L样本进行简便、可靠的浓缩与脱盐处理:快速处理样本。通常,回收率高于90%;备有低蛋白质结合的Omega、Bio-Inert或GHP滤膜可供选择。对应各种截留分子量,备有各种编码以供轻松识别的颜色可供选择。结构材料为低结合聚丙烯。超声焊接密封,防止侧流或密封不严。适用于配合1.5mL试管的标准离心转子。超滤离心管通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。虽然PES材料使非特异吸附较小化,但是,某些蛋白,特别是稀的时候,会有问题。非特异结合的程度随着个别蛋白结构的不同而不同。使用超滤离心管时应注意遵循正确的操作流程和实验室规范,并定期进行质量控制和评估。再生纤维素离心管在哪买
超滤离心管通常具有标准化设计,使其易于与其他实验室设备集成使用。湖州离心管制造厂
离心机的加速度调至较低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。湖州离心管制造厂
杭州迈恩科技有限公司专注技术创新和产品研发,发展规模团队不断壮大。一批专业的技术团队,是实现企业战略目标的基础,是企业持续发展的动力。公司业务范围主要包括:血清移液管,格栅膜,过滤膜,滤芯等。公司奉行顾客至上、质量为本的经营宗旨,深受客户好评。公司凭着雄厚的技术力量、饱满的工作态度、扎实的工作作风、良好的职业道德,树立了良好的血清移液管,格栅膜,过滤膜,滤芯形象,赢得了社会各界的信任和认可。