超滤离心管的分子量选择:按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管,为了得到较高的收率,所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右,不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径,膜上的孔并非均匀,离心高压下也可能渗漏,因此截留孔径越小,流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大,可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质,可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心,重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心,虽然优良品质的产品都有防死端设计,可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩,体积越小,越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液,必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有助于减少膜表面吸附,能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。使用超滤离心管时应注意避免与酸、碱等化学物质接触,以免损坏其结构和性能。青岛外泌体超滤离心管能干什么
超滤离心管通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。虽然PES材料使非特异吸附较小化,但是,某些蛋白,特别是稀的时候,会有问题。非特异结合的程度随着个别蛋白结构的不同而不同。含有带电的或者疏水结构域的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。对超滤离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失,大多数情况下,在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率,因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用较高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上,蒸馏水彻底冲洗柱子,再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意钝化处理后别让膜干了。如果要留待以后使用,需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。郑州再生纤维素离心管在哪买超滤离心管可以根据不同孔径大小选择超滤膜,以便过滤出所需大小范围内的目标分子。
超滤离心管,备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用;两种回收浓缩液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可将离心管放入离心机反甩,将浓缩液甩入回收帽中,加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;较新推出ZL产品Hydrosart膜2K型,具有极低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。
超滤离心管采用再生纤维素膜,具有较高的回收率(>90%)和 高浓缩倍数(80–100 倍),100%完整性检测确保性能可靠,主要应用与生物样品与蛋白浓缩、大分子组分的纯化、脱盐和缓冲液更换。再生纤维素膜具有一系列截留分子量,用户可根据目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积,选用不同体积大小和MWCO的超滤管。超滤离心管备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用。超滤离心管应用范围:*生物样品浓缩:包括抗原、抗体、酶、核酸或微生物。*对组织培养提取物或细胞裂解液中大分子组分的纯化。*对稀释或从柱洗脱液预先纯化的蛋白质进行浓缩。*脱盐和缓冲液更换。使用超滤离心管时要注意控制转速,以避免过度旋转导致超滤膜损坏或溢出样品。
注意:超滤离心管中的滤膜一旦润湿 后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用,则让液体保留在滤膜上,直到使用。6.使用方法:1).将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。2).向超滤管内管中加入不超过500 μL的样本,并盖上盖子。3).将盖好盖子的超滤管放入离心转子中,让盖子的连接带朝着转子的中间;用一个类似的超滤管平衡。4).以14,000 x g离心约10-30分钟,具体时间取决于所使用超滤管的NMWL。5).离心结束后将整个超滤管从离心机中取出,取出内管。6).为了回收浓缩后的溶质,将内管倒过来插在-个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开的盖子朝着转子的中间;用一个类似的超滤管进行平衡。以1 ,000 x g离心2分钟,使浓缩后的样本从超滤内管转移到收集管中。超滤液可以保存在收集管中。超滤离心管可以去除混合物中的低分子量化合物,提高目标化合物的纯度。郑州再生纤维素离心管在哪买
超滤离心管也可用于血清学检测和诊断,以确定人类或动物体内某些抗体的存在与否。青岛外泌体超滤离心管能干什么
实验室常用的离心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得较多,因为玻璃的离心管不能用在高速或者超速离心机上。塑料的离心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明,可以直观地看到样品的离心情况,但是比较容易变形,抗有机溶剂的腐蚀性较差,所以使用寿命较短。因此,实验室一般会经常购买离心管。PC (聚碳酸酯):透明度较好,硬度大,可以高温消毒,但不耐强酸强碱以及一些有机溶剂如酒精之类。主要用于5万转以上的超高速离心。PE(聚乙烯):不透明。和丙铜、醋酸、盐酸等不反应,较为稳定,高温下容易变软。PP(聚丙烯):半透明,化学及温度稳定性较好,但是在低温下会变脆,所以在离心时不要在4℃以下。青岛外泌体超滤离心管能干什么