外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为30-200nm,形态也呈现出多样性。microRNA(miRNA)是一种大小约21—23个碱基的单链小分子RNA,是由具有发夹结构的约70—90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(双链)但是和siRNA密切相关。microRNA通过和靶基因mRNA碱基配对引导沉默复合体(RISC)降解mRNA或抑制mRNA的翻译,从而在转录后水平调控蛋白表达。microRNA在物种进化中相当保守,在动物、植物等中发现的microRNA表达均有严格的组织特异性和时序性。microRNA在细胞生长和发育过程中起多种作用,包括调控发育、分化、凋亡和增殖等。临床前研究的证据表明干细胞释放的外泌体可作为心肌修复的潜在无细胞治理剂。研究所外泌体提取试剂盒生产厂家
在20世纪80年代,外泌体被描述为从网织红细胞分泌的内体来源的囊泡。人们对这些细胞外囊泡的兴趣逐渐增加,因为它们似乎参与了很多细胞过程。外泌体携带蛋白质、脂质和RNAs,介导体内不同细胞类型之间的细胞间通讯,从而影响正常和病理状态。只有近,科学家才认识到将外泌体与其他类型的细胞外囊泡分开的困难,这排除了特定功能对不同类型分泌的囊泡的明确归因。为了阐明这个复杂但正在发展的科学领域,该综述着重于外泌体和其他分泌的细胞外囊泡的定义。讨论了它们的生物发生,分泌及其后续的命运,因为它们的功能依赖于这些重要过程。血浆血清提取试剂盒方法外泌体的功能取决于其所来源的细胞类型。
目前为止已鉴别了2500余种miRNAs分子。例如,血液外泌体miR-21的升高已被证实与胰腺ai、结直肠ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai及食管ai等多种中流相关,可能与其参与中流xue管生成有关,研究表明肺ai细胞释放的外泌体miR-21会通过STAT3依赖机制诱导周围支气管细胞血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的产生,从而促进血管生成。在食管ai中,miR-21还可以反映中流的恶性程度,食管ai患者的miR-21水平与良性中流患者相比急剧上升,上升的miR-21水平也与中流的淋巴侵袭和转移相关。在膀胱ai患者中,尿液中的miR-21和miR-4454会明显上调。
小鼠骨髓树突状细胞产生的外泌体中含有的中流多肽能够启动特异性细胞毒性T淋巴细胞,根除或抑制小鼠中流的生长,这一发现为中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外,树突状细胞来源的外泌体也能够通过激huo其他免疫细胞诱导抗中流反应,从而抑制中流。B细胞分泌的外泌体包含MHCⅡ-多肽复合物,能够激huo人和小鼠抗原特异性T细胞,从而实现调节免疫响应的功能。细菌或病原体感ran的巨噬细胞外泌体能够刺激巨噬细胞和中性粒细胞分泌炎性介质,在增强机体免疫监督方面发挥重要作用。有关外泌体分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。
目前市面上开发的外泌体提取试剂盒,是根据外泌体表面由类似于细胞膜的脂质双分子层具有一定疏水性这一特性,用试剂捆绑水分子,从而可通过常规离心收集沉淀获取外泌体。这种快速提取外泌体的方法虽简便快捷、样本需求少、对设备要求低,但与差速离心方法类似,其分离得到的沉淀包含其他细胞分泌的囊泡,且血清中含有大量血清蛋白分子,成分复杂,很可能掺杂一些未知的疏水大分子物质。Sabapatha等曾根据来源于胎盘的外泌体表面特异表达这一特性,使用耦合到磁珠的抗抗体,采用磁珠分选方法分离血浆中胎盘来源外泌体。此法可以提取的胎盘外泌体量少,不适用于大规模提取制备,且免疫磁珠价格昂贵,不利于提取技术的普及。外泌体具有良好的生物兼容性、稳定性和内在靶向性,使其在药物递送方向大有潜力。腹膜透析液外泌体Dir
外泌体的检测和提取还遇到一个困难即:对各种外泌体的分类。研究所外泌体提取试剂盒生产厂家
研究者利用电穿孔法对外泌体进行DOX的负载,进行体内抗中流效果的研究。实验结果显示,负载DOX的iRGD肽靶向性外泌体对中流的抑制效果远优于单纯的DOX。直接静脉注射DOX,其不仅水溶性低,而且容易使DOX与血液中的蛋白结合,从而被网状内皮系统识别捕获,起不到理想的抗中流效果。而用iRGD肽靶向性的外泌体保护DOX,可以提高DOX水溶性,避免被网状内皮系统捕捉,提高靶向性,从而降低由于用药过量和非靶向性引起的毒性,起到更好的抗中流效果。研究所外泌体提取试剂盒生产厂家