超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白,在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子,但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是 15ml规格的管子,不知道有没有谁以前做过的,有关于转速,时间给一些建议,另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理?离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失?如果要把管子重复利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是将其浸到乙醇中防于4度,还是在管子中灌入乙醇?我用过5ml的管子,当时使用的转速是4000rpm 8min,可以把5ml的样品液浓缩到约200ul,这只供参考,具体情况还要由您的样品决定。我保存5ml管子的方法是把内管取出,浸泡于装有20%乙醇的烧杯中。四度保存。超滤离心管是一种用于分离和浓缩生物样品的实验室设备。北京30K超滤离心管购买
选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。金华小型超滤离心管价钱多少超滤离心管可以通过手动或自动方式进行操作,以适应不同的实验室流程要求。
多肽超滤离心管,垂直设计和有效的膜表面积提供了快速的样品处理,较高的样品回收率(> 90% 的样品回收率),以及 80~100 倍浓缩的能力。浓缩物使用吸液器从过滤装置中收集,而超滤液则在提供的离心管中收集。超滤离心管是一种可以为蛋白质样本的浓缩和缓冲交换提供可靠准确结果的一次性超滤离心式过滤装置,与层析、透析等方法相比,超滤对被处理的分子更加温和,不需要有机萃取,不会导致蛋白变性,且简单高效。规格超滤浓缩器可处理体积4mL 以内的样本,离心管内包含一个内置竖直的聚醚砜(PES)膜过滤装置,聚醚砜膜具备低蛋白附着、高通量的特点,可应用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD 六种不同的截留分子量中。截留分子量标识和体积刻度蚀刻在浓缩器的侧面便于识别。
根据其大小,又分为1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,国产的离心管一般就是这几个规格,用的较多的也就是10ml和50ml的。如果您的离心机是配30ml或者其他规格的离心管时,就要考虑进口的了。另外,离心管还有圆底和尖底,以及螺旋盖和插盖之分。螺旋盖的离心管带有较精细的刻度,插盖的只有一个总体的容量标示。实验室常用的离心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的较多,因为玻璃的离心管不能用在高速或者超速离心机上。塑料的离心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明,可以直观的看到样品离心情况,但是比较容易变形,抗有机溶剂的腐蚀性较差,所以使用寿命较短。因此,实验室一般会经常购买离心管。下面就对各种材质分别介绍一下。根据其材质的不同总体可以分为塑料和玻璃的,塑料的离心管用的较多,又可以分为PP、PC、PS等,根据不同需要,生产厂家会选择不同的塑料材料来进行制作。超滤离心管的选择需要根据被过滤溶液或混合物的性质和所需的纯度和体积来确定。
超滤管,即超滤离心管,是生物、化学实验室非常重要的分离装置。超滤管可以去除蛋白质及大分子杂质,经常用于蛋白浓缩和更换缓冲液的操作,超滤是实验室常用的分离技术,是一种加压膜分离技术,膜孔径介于微滤和反渗透之间,通过膜表面的微孔结构对物质进行选择性分离。在一定压力下,小分子物质可穿过一定孔径的特制薄膜,而大分子物质不能透过,从而将小分子与生物大分子分开,实现滤除微小固型颗粒物、大分子、病毒以及细菌等微生物的目的。超滤管一般由盖子、过滤器和离心管三个部分组成。超滤管具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液或复杂的样本组合中进行浓缩液回收,其竖式设计以及可用的滤膜表面面积能够提供快速的样本处理速度和较高的样本回收率,并能进行80倍浓缩。使用超滤离心管时应注意避免污染和交叉传播,并对设备进行彻底清洁消毒。深圳外泌体超滤离心管采购
超滤离心管可以去除混合物中的杂质和低分子量化合物,得到高纯度的目标化合物。北京30K超滤离心管购买
超滤离心管使用注意事项:当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。北京30K超滤离心管购买