其实,离心管是离心机中较重要的配件之一,它主要是用来承装实验样品的,我们使用离心机时,首先需要用到的就是转子,转子里面需要放的就是离心管了。之所以说离心管是离心机较重要的配件之一是因为,如果没有离心管,样品就没办法承装。那么,了解过离心管的作用之后,你知道离心管应该如何选择吗?相信连用过离心机的朋友都不会很清楚。那么接下来小编带你了解一下离心管应该如何选择。想要了解离心管如何选择就要先说到材质,离心管的材质一般分为三种,一种是塑料离心管,第二种是玻璃离心管,第三种是钢制离心管。超滤离心管适用于从细胞培养基、血浆、尿液等样品中提取蛋白质、核酸、多糖等大分子化合物。青岛蛋白分离离心管哪家强
超滤离心管使用注意事项:当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。再生纤维素离心管能干什么超滤离心管的优点包括速度快、效率高、易于操作和清洗等。
超滤离心管只需5到15分钟,即可对50到500L样本进行简便、可靠的浓缩与脱盐处理:快速处理样本。通常,回收率高于90%;备有低蛋白质结合的Omega、Bio-Inert或GHP滤膜可供选择。对应各种截留分子量,备有各种编码以供轻松识别的颜色可供选择。结构材料为低结合聚丙烯。超声焊接密封,防止侧流或密封不严。适用于配合1.5mL试管的标准离心转子。超滤离心管通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。虽然PES材料使非特异吸附较小化,但是,某些蛋白,特别是稀的时候,会有问题。非特异结合的程度随着个别蛋白结构的不同而不同。
超滤离心管的常见问题与解答,一:超滤离心管的膜材质是什么?超滤离心管的膜材质为特有的Ultracel再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而,蛋白吸附损失较小。二:如果要用超滤离心管的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。不保证超滤离心管不包含RNA酶,建议用0.1%DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用Milli-Q超纯水洗涤除去。去污剂因其独特的性质,当浓度大于临界微团浓度(Critical Micelle Concentration、CMC)时,去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象,这有可能会影响去污剂的去除效果,具体的操作步骤请垂询我们。超滤离心管通常由聚碳酸酯或聚丙烯制成,具有强度高和化学惰性。
我用的是3500g,4度离心,时间可以自己控制,取决于你之后的浓缩体积,我一般是200ul左右。千万别一下离心时间太长,不同的蛋白浓缩的速度不同,有的需要长时间离心,有的则一下子就好。当然也和你的蛋白是否比较纯,所用的是什么buffer,还有蛋白的浓度有关系。所以离心时要先短些时间观察一下你的浓缩速度,不要一下子浓缩过了,甚至形成沉淀就得不偿失了。另外其实他们的管子都设计的是一次性使用,所以如果想重复使用,不要离得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重复使用时要看看管壁上有没有裂纹,现在的管子好像不如从前的结实了。超滤离心管可以用于分离各种细胞类型,并进行进一步的培养、检测和研究。再生纤维素离心管能干什么
超滤离心管也可用于水处理过程中去除污染物和杂质。青岛蛋白分离离心管哪家强
超滤离心管,备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用。 使用注意事项 (1)选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。 (2)新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。 (3)平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速 rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至较低档,减小对膜的压力。青岛蛋白分离离心管哪家强