对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到宜转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX转染试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1.5~4μL体积线性PEIMAX转染试剂进行优化。用PEI转染试剂时,一般和DNA的比例是多少?40KPEI转染试剂常见问题
随后,开拓了在病理(组织研究)应用产品,使组织除了石蜡包埋外,还能够包埋在塑料块中;开发染料和染色剂,以实现更好的样品观测方式。与government合作,开发了用于诊断试剂盒应的聚合物微球。与美国国家cancer中心合作,开发天然产物分离和纯化产品,并用于紫杉醇的初步临床试验。继而开发出超顺磁珠,用于DNA、蛋白质和肽的研究。Polysciences的高纯度单体和聚合物产品在医疗器械中有许多应用,并不断开发和增强其性能。近期业务扩展到电子产品,Polysciences的精密微粒子产品拓展了纳米技术应用中测量精度。公司秉承为应用而研发,目前已拥有超过3000种产品。上海曼博生物为Polysciences官方授权du jia代理商,更多产品信息,欢迎咨询!浙江科研级PEI转染试剂哪个品牌的PEI转染试剂性价比会比较高呢?
Polysciences是一家化学品制造公司,产品广泛应用于各个科研领域。公司成立于1961年,起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案,帮助科学家揭示未知领域。随后,开拓了在病理(组织研究)应用产品,使组织除了石蜡包埋外,还能够包埋在塑料块中;开发染料和染色剂,以实现更好的样品观测方式。与government合作,开发了用于诊断试剂盒应的聚合物微球。与美国国家cancer中心合作,开发天然产物分离和纯化产品,并用于紫杉醇的初步临床试验。继而开发出超顺磁珠,用于DNA、蛋白质和肽的研究。Polysciences的高纯度单体和聚合物产品在医疗器械中有许多应用,并不断开发和增强其性能。近期业务扩展到电子产品,Polysciences的精密微粒子产品拓展了纳米技术应用中测量精度。公司秉承为应用而研发,目前已拥有超过3000种产品。PolysciencesInc.致力于提供先进的技术、制造能力和技术支持,帮助客户实现他们的目标。上海曼博生物是Polysciences官方授权du jia代理商,更多关于转染试剂相关问题,欢迎咨询上海曼博生物!
1、细胞分盘:通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上(根据实验需要选择培养皿,使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90%)。根据细胞贴壁情况于含5%CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。
2、制备PEI-DNA混合物:以60mm组织培养皿用420μL反应总体积为例。准备两支1.5mL离心管,一管将质粒DNA(总量2-8μg为佳)加入240μLHBS中,混匀。另一管中则用HBS将100μM的PEI储存液稀释成10μM,充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中,充分混匀后室温静置20-30min。将这420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中,轻轻摇动平皿混匀,置于含5%~7%CO2的37℃温箱孵育。注:每次用100μM的PEI储存液前都需要先将其充分混匀,保证所取的浓度一致。
3、培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基,继续培养,16h左右可以观测到报告基因的表达。 哪个品牌的PEI转染试剂性价比更高?
抗体药物研发客户提供小众创新产品,包括从Researchgrade到cGMP等级的无动物源培养基质,转染试剂、病毒转导试剂、基因编辑工具等产品和定制服务,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)药物研发从R&D到Clinicaltrial以及后期商业化的无缝转化;以及提供药物开发和探索的抗体文库定制和商业授权灵活的CHO工程细胞株以支持抗体药物的商业化生产,以此希望帮助国内科研工作者快速地接触世界范围内的技术,分享研发工具进步带来的技术红利,终为细胞、基因产业以及再生医学行业等乃至整个生命科学行业赋能!更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题,欢迎咨询上海曼博生物。PEI转染试剂会有毒性吗?血清兼容PEI转染试剂中国代理权
Polysciences PEI和Polyplus的PEI哪个更好?40KPEI转染试剂常见问题
接种细胞:转染前,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后,添加½体积的包含30%血清的生长培养基。更多PEI相关产品信息,欢迎咨询上海曼博生物!40KPEI转染试剂常见问题
注意事项质粒质量:请务必使用高质量转染级无内质粒(推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒...
【详情】化学转染方法是生物医学研究中常用的转染方法,主要包括两类:阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利...
【详情】上海曼博生物医药科技有限公司始终致力于为客户提供一站式生物医药科技服务,以创新和为价值理念,通过自身...
【详情】对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显...
【详情】上海曼博生物医药科技有限公司始终致力于为客户提供一站式生物医药科技服务,以创新和为价值理念,通过自身...
【详情】1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板...
【详情】上海曼博生物医药科技有限公司始终致力于为客户提供一站式生物医药科技服务,以创新和为价值理念,通过自身...
【详情】对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显...
【详情】稳定转染方法:1.接种细胞:转染前一晚,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化...
【详情】对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显...
【详情】对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显...
【详情】对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显...
【详情】