裸鼠瘤模型是比较常见和常用的一种瘤动物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。
造模方法:
1、细胞是贴壁细胞,细胞培养在RPMI-1640培养基中细胞传代培养:当细胞长至80-90%时,去除培养基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培养基中和胰酶终止消化,将消化的细胞转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min。倒掉上清后,加入3ml培养基重悬细胞,1:3传代至培养皿中培养。
2、将长到培养皿80%-90%的细胞用胰酶消化下来,1000rpm离心,去除上清,加入完全培养基重悬细胞,将细胞分别种在6孔板中,每孔种1×105个细胞。
3、将细胞进行扩增培养,对细胞进行计数,将数量调整为2×107个细胞/ml。5、8周龄15只裸鼠适应性饲养7天后,随机分为3组,每组分别在右腋皮下接种2×106(100ul/只)细胞。接种约两周后出现结节,每周瘤大小两次。将裸鼠放入鼠笼中正常饲养4周后处死裸鼠,取裸鼠瘤拍照冻存。 关于实验动物模型的重要知识点!湖北推荐实验动物模型哪家好
实验动物模型的案例。反义寡核苷酸(ASOs)是一种短的、化学合成的单链寡核苷酸,通过对其骨架和糖基进行修饰,可增加其稳定性、药理特性以及与靶标的结合,并通常具有较小的毒性。常用于细胞和动物体内基因功能研究以及ASO核酸药物的开发等。经过化学修饰的ASOs可以通过多种作用机制发挥作用。常见的一种作用方式是与RNA结合,形成RNA&DNA杂合体,依赖于RNase H发挥作用,从而导致靶标mRNA的降解,主要适用于干扰细胞核内的lncRNA/circRNA/mRNA等。吉林小鼠实验动物模型实验实验动物模型设计,评估,报价,欢迎咨询英瀚斯生物。
肾纤维化模型
1)单侧输尿管结扎法肾小管间质纤维化模型2)庆大霉素诱导肾小管间质纤维化模型1单侧肾静脉结扎法肾小管间质纤维化模型
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2实验方法
2.1单侧肾静脉结扎法体重为250~300g的成年SD大鼠,经腹腔注射5%水合氯醛麻醉,麻醉后取仰卧位固定于手术板上。动物腹部手术区常规消毒及去毛,沿腹中线作手术切口,依次切开皮肤和肌肉,游离肾脏和输尿管,用组织钳托起左侧输尿管中段部位,止血钳夹住,在两端用4-0号丝线分两次结扎左侧输尿管近肾盂段,剪断输尿管,然后常规缝合肌肉和皮肤。术后动物常规单笼饲养观察,自由饮水及进食。28d后出现纤维化。
大鼠烫伤模型
(1)复制方法:按30mg/kg体重的剂量经腹腔注射3%戊巴比妥钠麻醉大鼠,根据体重腹部备皮,然后固定于实验台上。将大鼠移近加热自来水的烧杯,将纱布条浸入热水中,待水温恒定于99℃时,取出纱布,立即平铺于待烫部位,以纱布接触大鼠皮肤后计时。
(2)模型特点:大体观察:致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好,有少量红褐色素沉着,皮肤轻微挛缩,表皮光滑。致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好,皮肤瘢痕形成,表面粗糙不平。光镜观察:致伤3s大鼠表皮层次尚清楚,细胞明显肿胀、变性,层次结构尚清楚,细胞核结构不清。表皮内有水疱形成,真皮水肿、间质疏松,胶原纤维断裂,嗜酸性染色性能减退,呈嗜双色性。致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落,结构不清,明显变性、坏死,部分细胞已溶解。表皮内有水疱形成,真皮层间质疏松、充血,胶原纤维融合成片,嗜酸性染色性能减退,呈嗜双色性,大部分皮脂腺、汗腺、***被破坏,结构不清,真皮深部可见残余***。皮下组织血管扩张、充血、水肿明显,结构未破坏。上述结果表明,致伤3s大鼠为浅Ⅱ度烫伤,致伤10s大鼠为深Ⅱ度烫伤。 英瀚斯专业团队负责实验动物模型研究。
一型糖尿病实验动物模型构建:
胰腺中的胰岛β细胞变性和坏死,分泌的胰岛素不足。
诱导方法一:STZ诱导糖尿病模型。注射前用0.05mol/L柠檬酸(pH4.5)配成2%的STZ溶液,新鲜使用。大鼠糖尿病STZ的剂量为40~75mg/kg(静脉注射或腹腔注射)。小鼠对此药敏感性较差,常用量为100~200mg/kg(静脉注射或腹腔注射)。
诱导方法二:四氧嘧啶糖尿病动物模型四氧嘧啶糖一次腹腔注射150~200mg/kg或静脉注射40~100mg/kg。用药后2~3小时后出现初期高糖,持续6~12小时后进入低血糖期,动物出现痉挛,24小时后一般为持续性高糖期,β细胞呈现不可逆性坏死,发生糖尿病。
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实验动物模型有哪些注意事项?湖北推荐实验动物模型哪家好
阿尔茨海默病实验动物模型。目前常用研究AD的实验动物有非人灵长类动物与啮齿类动物,在选择时遵循“减少、替代、优化”的3R原则。非人灵长类动物与人类的脑部解剖结构、神经病变特点以及生物行为模式相似,尤其是恒河猴,在其脑中观察到含有Aβ沉积的老年斑和神经原纤维缠结现象,无论是自发还是诱发模型,都能够较好的复制AD相关的病理及生理特征,但是昂贵的费用与稀少的资源限制了非人灵长类动物的大量应用。啮齿类动物虽然在病变模拟方面不如非人灵长类全方面的,但是具有价格低廉、资源范围很广的、生存率高等特点,与人类的脑部解剖结构与生理特征也较为相近,更适于诱导模型的大量制备,成为AD应用更范围很广的的动物模型。许多AD小鼠模型的背景品系是C57BL/6J小鼠,然而这种品系的小鼠似乎对类似AD的神经病理学具有特别的抵抗力。湖北推荐实验动物模型哪家好