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免疫沉淀基本参数
  • 品牌
  • 世途科生物
  • 产品名称
  • 免疫沉淀磁珠Protein A/G
  • 有效期
  • 12个月
免疫沉淀企业商机

免疫沉淀技术(Immunoprecipitation, IP)是一种利用抗体与特定蛋白质结合的特性,从复杂样本中分离和纯化目标蛋白质的实验方法。这项技术在生物医学研究中有着广泛的应用场景,以下是一些主要的应用领域:
1. 蛋白质相互作用分析:通过免疫沉淀技术,研究人员可以研究蛋白质之间的相互作用,揭示蛋白质复合物的组成以及它们在细胞内的功能和调控机制。
2. 抗体药物开发:免疫沉淀技术可以用于研究抗体药物与其靶标蛋白的结合特性,评估抗体药物的亲和力和特异性,指导抗体药物的设计和优化。
3. 蛋白质表达水平分析:通过比较不同条件下的免疫沉淀结果,可以评估目标蛋白的相对量,进而研究蛋白质的表达调控。
4. 染色质免疫沉淀(ChIP):这是一种特殊的免疫沉淀技术,用于研究蛋白质与DNA的相互作用,如转录因子或组蛋白修饰与基因组特定区域的结合情况。
5. RNA免疫沉淀(RIP):类似于ChIP,RIP用于研究RNA结合蛋白与RNA分子之间的相互作用。
免疫沉淀技术ChIP的实验方法。杭州anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠的选择

免疫沉淀技术RIP(RNA Immunoprecipitation,RNA免疫沉淀)的实验方法基于以下几个关键步骤:
1. 细胞裂解:首先,细胞或组织样本被裂解,以释放细胞内的蛋白质和RNA复合物。
2.抗体特异性结合:裂解后的样本中加入针对特定RNA结合蛋白的抗体。这些抗体能够特异性地识别并结合到目标蛋白。
3. 免疫复合物形成:抗体与目标蛋白结合后,形成抗体-蛋白质-RNA复合物。
4. 亲和介质捕获:使用蛋白A或蛋白G结合的珠子(如琼脂糖或磁性珠子)来捕获这些抗体-蛋白质-RNA复合物。蛋白A或蛋白G能够与抗体的Fc部分结合,从而拉下与之结合的复合物。
5. 洗涤:捕获的复合物被洗涤以去除未特异性结合的蛋白质和RNA。
6. RNA分离和分析:从珠子上洗脱或消化复合物,分离出RNA,并进行进一步的分析,如qPCR、Northern blot或高通量测序(RNA-Seq)。
温州IP免疫沉淀技术服务免疫沉淀技术是什么?

染色质免疫共沉淀(Chromatinimmunoprecipitation,ChIP)技术是目前公认的研究此相互作用的选择,是真核生物基因表达机制研究中不可或缺的技术之一。
它的基本原理是在活细胞状态下,固定蛋白质-DNA(染色质)复合物,并将其切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法(抗体亲和)沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的 DNA,通过对目的片段的纯化与后期检测,从而获得蛋白质与 DNA 相互作用的信息。
这项技术通过蛋白质与DNA互作来分析目标基因活性以及已知蛋白质的靶基因,被广泛应用于体内转录调控因子与靶基因启动子上特异核苷酸序列结合方面的研究。该技术常与DNA芯片和分子克隆技术相结合。

ChIP技术的应用:
1. 转录因子结合位点的鉴定:研究特定转录因子在基因组上的结合模式。
2. 组蛋白修饰的分布:分析不同组蛋白修饰在基因组上的分布情况,这些修饰与基因的活跃或沉默有关。
3. DNA甲基化研究:结合ChIP技术可以研究DNA甲基化对基因表达的影响。
4. 染色质结构和功能:研究染色质重塑对基因表达和细胞功能的影响。
5. 疾病相关基因的调控:研究疾病状态下基因调控网络的变化。
ChIP技术是表观遗传学研究中的一个重要工具,它可以帮助科学家们理解基因表达是如何在分子水平上被精确调控的。
免疫沉淀技术RIP的实验设计。

ChIP(染色质免疫沉淀)实验是一种用于研究蛋白质与DNA相互作用的技术。以下是ChIP实验的实验方法概述:
1. 交联:将细胞与交联剂(如1%甲醛)孵育,通常在室温下进行10-15分钟。
2. 终止交联:添加甘氨酸以终止交联反应,孵育5分钟。
3. 收集细胞:通过离心收集细胞,并用PBS洗涤以去除交联剂。
4. 细胞裂解:使用裂解缓冲液裂解细胞,释放染色质。
5. 染色质剪切:使用超声波或酶消化将染色质剪切成适当大小的片段。
6. 免疫沉淀:将剪切后的染色质与特异性抗体孵育,然后添加蛋白A/G磁珠。
7. 洗涤:用低盐、高盐和LiCl洗涤液洗涤磁珠,去除非特异性结合物。
8. 洗脱:用洗脱缓冲液洗脱DNA。
9. 逆转交联:用蛋白酶K处理,然后在65°C下加热过夜以逆转交联。
10. DNA纯化:使用商业试剂盒或标准酚/氯仿方法纯化DNA。
11. 分析:使用qPCR分析富集的DNA,或进行测序以确定蛋白质结合位点。
免疫沉淀技术IP实验步骤。温州蛋白免疫沉淀实验视频

免疫沉淀纯化所得抗原纯度低是什么原因?杭州anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠的选择

Co-IP的实验步骤:
1. 细胞裂解:首先,细胞或组织被裂解,释放其中的蛋白质。
2. 抗体结合:然后,将特异性抗体(针对已知蛋白质之一的抗体)加入到裂解物中。这些抗体会特异性地结合到目标蛋白(诱饵蛋白)上。
3. 免疫复合物形成:抗体与目标蛋白结合后,形成免疫复合物。
4. 沉淀:接着,使用蛋白A或蛋白G结合的珠子(如琼脂糖或磁性珠子)来捕获免疫复合物。蛋白A或蛋白G能够与抗体的Fc部分结合,从而拉下抗体以及与之结合的目标蛋白和任何相关的相互作用蛋白。
5. 洗涤:捕获的免疫复合物被洗涤以去除未特异性结合的蛋白质。
6. 洗脱和分析:免疫复合物被洗脱并进行进一步的分析,如Western blot(WB)或质谱分析,以鉴定相互作用的蛋白质。
杭州anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠的选择

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