HE染色常见问题:Q5:细胞核呈棕红色改变答:苏木素染液过度氧化;或苏木素染色后反蓝不足导致。应该立即更换苏木素染色液。或在流动自来水(一般自来水PH7.5-7.8),或在稀释的氨水溶液,或在0.2%碳酸氢钠中适当浸泡,这些步骤均可一定程度地加强苏木素染色后的反蓝效果。Q6:伊红染色较淡答:伊红的PH改变了(PH可能已大于5);或反蓝液体未漂洗干净,残留后影响胞浆嗜酸性染色;或者切片太薄并且在随后的脱水步骤停留过久。对策:检查伊红染色液PH,可采用乙酸调至4.6-5.0。根据以上提示,调整实验步骤。HE染色中固定液如何配置。贵州结果客观的HE染色多少钱
HE染色细胞浆染色原理:细胞浆内主要成分是蛋白质,为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系,当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时,胞浆对外不显电性,此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时,大于蛋白质的等电点pH值,表现酸性电离,而带负电荷的阴离子,可被带正电荷的染料染色,现时胞核也被染色,核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下,在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷(阳离子),就可被带负电荷(阴离子)的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阳离子)结合而使细胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织,嗜伊红颗料等被***成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。湖南靠谱的HE染色服务石蜡组织切片的HE染色。
HE染色常见问题:切片染色不均匀,有片状的弱着**存在答:(1)取材时组织太厚,固定过久,导致深部组织固定不佳,而表浅组织过度固定,而透明、脱水、浸蜡均是如此,这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。(2)制片过程有问题,切片厚薄不一,或者有刀痕,或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一,一般都是在制片时,刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳(一般比较好角度为5°)(3)脱蜡前未烘烤,脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久,导致脱蜡不彻底。(4)染色液过少,着色不均匀;或染色时部分组织干涸而另一部分湿润,这样会导致组织吸附染料的能力不一。(5)分化不当。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。
HE 染色是病理的主要常規染色,其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,藉由電荷與吸附性的差異,組織結構對不同染料的結合程度不同,我們可以發現Hematoxylin呈色在細胞核,Eosin Y則表現在細胞質與間質,染色優良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細胞型態與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,而且每個實驗室需要的顏色深淺不一,使用者可以依自己的需求另行調整,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟脾脏组织HE染色如何观察。
HE染色注意事项:1.组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则无论进行那种染色都会发生困难。脱蜡时间要充分,若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低,若室温过低,可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡。 2.苏木素染液使用一段时间后表面易出现亮晶状飘浮物,这可能是液体表面的过氧化物,必须过滤除去,以防沉渣污染组织切片。苏木素液一般染过三、四百张切片后,着色力会减弱,着色不鲜艳,呈灰蓝色时应及时更换新液。 3.染色的时间长短需依据:染剂对组织的染色作用,室温条件,切片厚薄,固定液的类别,染液的新旧而进行调节。所以在染色时必须使用显微镜观察染色程度以利掌握时间。 4.分化十分重要。分化步骤的准确也是染色成败的关键,若分化失当则必然引起染色不匀或过淡,过深等现象,因此分化后一定要镜检,观察胞核是否清晰,胞浆呈淡白色。否则需再次分化,不然一旦复染后,组织会呈紫蓝色即“蓝盖红”现象。 5.还原液不宜过浓,若碱性太强易使组织脱落故以淡为宜。 6.伊红宜淡染,复染过深胞核会不清晰,影响镜检。 骨组织HE染色的操作流程。广东HE染色哪家好
HE染色观察细胞形态变化。贵州结果客观的HE染色多少钱
HE染色结果判读:细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。着色状况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。H-E染色评定标准:(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均匀,无皱褶无刀痕;(2)染色核浆分明,红蓝适度,透明洁净,封裱美观。贵州结果客观的HE染色多少钱