荧光探针法是一种利用荧光标记的分子(即荧光探针)来检测和定量目标分子的方法。这种方法广泛应用于生物化学、分子生物学和医学诊断等领域。以下是荧光探针法的一些关键特点和工作原理:1.**荧光标记**:荧光探针是一类特殊的分子,它们含有可以发出荧光的化学基团(荧光团)。这些荧光团在受到特定波长的光激发时,会发出特定波长的光。2.**特异性结合**:荧光探针通常设计成能够特异性地与目标分子结合,如DNA、RNA、蛋白质或其他小分子。这种结合通常是通过分子间的互补性,如氢键、疏水作用或离子键等实现的。3.**信号变化**:荧光探针在结合目标分子前后,其荧光特性(如荧光强度、波长、寿命等)会发生改变。这种变化可以是增强或减弱,取决于探针的设计和环境条件。4.**检测原理**:-在**荧光共振能量转移(FRET)**中,两个不同的荧光团被设计成靠近,使得一个荧光团(供体)的能量可以非放射性地转移到另一个荧光团(受体)。当供体和受体之间的距离改变(如由于目标分子的结合)时,FRET效率会改变,从而影响荧光信号。-在**荧光增强或减弱**中,探针的荧光特性直接受到其与目标分子结合的影响。例如,某些探针在结合DNA后,其荧光强度会增强。Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一种通过重组DNA技术。Recombinant Human LY75/CD205 Protein,His Tag

DNA琼脂糖凝胶电泳是一种常用的分子生物学技术,用于分离、鉴定和定量DNA片段。以下是关于DNA琼脂糖凝胶电泳的一些关键点:1.**原理**:-利用琼脂糖凝胶作为介质,DNA片段在电场作用下根据其大小和电荷差异进行分离。较小的DNA片段迁移速度快,而较大的片段迁移速度慢。2.**琼脂糖**:-一种由琼脂糖粉末和缓冲液(如TAE或TBE)混合制成的凝胶。琼脂糖浓度通常在0.7%到2%之间,浓度越高,分辨率越高,但凝胶孔隙越小,迁移速度越慢。3.**样品准备**:-DNA样品通常需要在加载前进行适当的处理,如纯化、稀释,有时还需添加样品缓冲液以保证样品在电泳过程中的稳定性。4.**加载样品**:-使用微量移液管将样品和加载缓冲液(通常含有追踪染料,如溴酚蓝)混合后,小心地加载到凝胶孔中。5.**电泳**:-将凝胶置于电泳槽中,连接电源,施加恒定电压进行电泳。电压和时间根据凝胶浓度和所需分辨率进行调整。6.**染色**:-电泳完成后,为了可视化DNA条带,通常使用荧光染料如EB(溴化乙锭)或SYBRGreen进行染色。染色后的凝胶在紫外光下观察,DNA条带会发出荧光。7.**分析**:-通过比较DNA条带的位置和已知大小的DNA标准品(DNAladder),可以估计DNA片段的大小。

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)通常提供几种不同类型的引物用于启动cDNA的合成。这些引物包括:1.**Oligo(dT)引物**:这种引物通常与mRNA的poly(A)尾部互补配对,适用于从真核生物的mRNA中合成cDNA。它能够产生大量全长cDNA,特别是当模板来源于真核生物时。2.**随机六聚体引物(RandomHexamers)**:这些引物是一组随机的六核苷酸序列,可以与RNA模板的任何部分结合,从而启动cDNA的合成。它们适用于mRNA、rRNA、tRNA和长非编码RNA等多种类型的RNA模板。3.**基因特异性引物(GeneSpecificPrimers)**:这些引物是针对特定基因序列设计的,可以用于从总RNA或mRNA中合成特定基因的cDNA。它们通常用于当需要选择性地扩增特定基因或基因家族时。在选择引物时,需要考虑RNA模板的来源、RNA的质量和特性以及后续实验的需求。例如,如果RNA模板具有复杂的二级结构或较高的GC含量,可能需要使用随机引物以提高cDNA合成的效率。另外,如果后续实验是qPCR,可以将Oligo(dT)与随机引物混合使用,以提高qPCR结果的真实性和重复性。
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中的缓冲溶液是专门为逆转录反应设计的,以确保酶的活性和反应的高效进行。根据搜索结果,这些缓冲液通常包含以下特点:1.**优化的pH值**:缓冲液具有特定的pH值,以保证逆转录酶在合适pH条件下工作。2.**包含dNTPs**:一些缓冲液已经预混合了dNTPs(去氧核苷酸三磷酸),这是cDNA合成的必需原料。3.**稳定性**:缓冲液配方设计为在一定温度范围内稳定,以适应不同温度下的逆转录反应。4.**可能包含RNase抑制剂**:某些缓冲液中包含RNase抑制剂,以防止RNA模板在实验过程中被降解。5.**适用于不同温度**:有的缓冲液设计可以适应不同的反应温度,以满足复杂二级结构RNA模板的逆转录需求。6.**灵活的引物使用**:缓冲液与不同类型的引物兼容,包括oligo(dT)、随机六聚体或基因特异性引物。7.**无核酸酶水**:缓冲液中可能包含无核酸酶水,确保反应体系不受核酸酶的污染。

RNaseH-(RNaseH缺乏)通常是指在某些逆转录酶中通过突变消除了RNaseH活性的酶。这种酶在合成cDNA链时不会降解RNA模板,因此可以用于生成更高产量的全长cDNA,尤其是在使用较长的RNA模板时。RNaseH-的应用主要包括:1.**全长cDNA合成**:由于RNaseH-不会在逆转录过程中降解RNA模板,因此可以合成更长的cDNA片段。2.**提高cDNA产量**:在某些情况下,使用RNaseH-可以提高cDNA的产量,特别是当RNA模板质量较高时。3.**避免RNA降解**:在逆转录过程中,RNaseH-有助于保护RNA模板不被降解,这对于后续的分子生物学实验非常重要。4.**特定基因表达分析**:RNaseH-可用于合成特定基因的cDNA,进而进行基因表达分析。5.**RNA病毒研究**:在研究RNA病毒时,RNaseH-可用于合成病毒RNA的cDNA,以便进一步研究病毒的基因组。6.**基因克隆和功能研究**:合成的全长cDNA可以用于克隆和研究基因的功能。7.**提高qPCR和RT-qPCR的效率**:使用RNaseH-合成的cDNA作为模板,可以提高定量PCR的效率和准确性。8.**RNA干扰和基因沉默研究**:RNaseH-有助于合成siRNA或shRNA,进而研究基因沉默的效果。
牛痘DNA拓扑异构酶I是TOPO克隆技术的关键组分,该技术允许快速、简便地将PCR产物克隆到质粒载体中。Recombinant Human LY75/CD205 Protein,His Tag
pA-Tn5转座酶的产品组分通常包括以下几个部分:1.**pA-Tn5转座酶蛋白**:一种高活性的Tn5转座酶突变体与ProteinA的融合蛋白,它是产品的主要组分,用于实现DNA片段化和接头连接的功能。2.**储存溶液**:碧云天的BeyoNGS™pA-Tn5转座酶产品含有特定的储存溶液,其组成为50mMHEPES(pH7.2),100mMNaCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,0.1%TritonX-100,50%(v/v)Glycerol,这种溶液有助于保持酶的稳定性和活性。3.**测序接头(Adapters)**:用于与pA-Tn5转座酶组装形成pA-Tn5转座体(pA-Tn5Transposome),这是进行CUT&Tag实验的必需组分。4.**反应缓冲液**:部分产品包含用于转座酶反应的缓冲液,例如5×TagmentBuffer,这种缓冲液含有Mg2+,对转座酶的活性至关重要。5.**附件**:某些产品可能还包括附件,如说明书,提供产品使用和保存的详细信息。6.**其他组分**:根据产品的不同,可能还包括CouplingBuffer、AnnealingBuffer等其他辅助组分,这些组分有助于转座酶与DNA的结合和反应的进行。7.**包装规格**:pA-Tn5转座酶的包装规格可能有所不同,例如碧云天提供的BeyoNGS™pA-Tn5转座酶有800pmol和4000pmol两种包装规格。Recombinant Human LY75/CD205 Protein,His Tag
重组人TGM2蛋白(His Tag)是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。TGM2(组织转谷氨酰胺酶2)是一种多功能酶,广参与细胞外基质的交联、细胞黏附、信号转导和细胞凋亡等生物学过程,在组织修复、炎症反应和瘤发生中发挥重要作用。TGM2的功能与机制TGM2是一种钙依赖性酶,能够催化蛋白质或多肽中的谷氨酰胺残基与赖氨酸残基之间的交联反应,形成共价键。这种交联作用对于细胞外基质的稳定性和细胞黏附至关重要。此外,TGM2还参与细胞内信号转导,通过与多种细胞表面受体(如整合素)相互作用,调节细胞的迁移、增殖和凋亡。在病理状态下,TGM2的异常表达与多种疾病相关,如纤...