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IdeS蛋白酶基本参数
  • 品牌
  • Genovis
  • 型号
  • A0-FR8-020等
  • 货号
  • A0-FR8-020
  • 中文描述
  • FabRICATOR
  • 规格
  • 2000U/5000U等
  • 级别
  • 研发级
  • 应用领域
  • 抗体酶切、抗体去糖基化、抗体偶联、蛋白质组学、聚糖图谱、亲和
IdeS蛋白酶企业商机

与IdeS不同,在蛋白质zhiliao药物的质量控制过程中,详细分析和识别质量属性非常重要。对于具有柔性连接子的融合蛋白疗法,这包括确认连接蛋白的质量以及蛋白质接头的质量。使用 Genovis的GlySERIAS 的连接子酶切可以通过分离连接的蛋白质结构域来帮助这种质量控制。然而,连接子中的大量甘氨酸残基提供了酶的许多潜在消化位点,导致连接子内多个位点同时水解。消化的产物通常由连接蛋白的几种变体组成,并保留不同程度的连接子。虽然观察到的异质性通常不会对蛋白质亚基的详细表征产生负面影响,但有助于直接表征连接子,但有时需要更均匀的消化产物来详细分析单个蛋白质结构域。Genovis的FabDELLO作用于人 IgG1 铰链上方的单个暴露赖氨酸残基。四川FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶

四川FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶,IdeS蛋白酶

上海倍笃生物科技有限公司(简称“倍笃生物”),由中国科学院及生物医药产业界人士,于2018年1月共同创立。公司代理多个品牌的仪器、试剂及耗材(如Genovis的IdeS酶),遵守相关法规要求,如cGMP规范、ISO13485质量管理体系认证等,致力于为诊断领域如分子诊断及病原微生物检测研发等,药物研发领域如细胞基因药物、核酸药物、抗体药物、干细胞及外泌体研究等客户提供合规、高质量物料及专业服务,以期与客户共同协作,加快研发及生产进度,为客户提供更多价值。FabRICATOR ZIdeS蛋白酶抗体酶切用于生物药研究,如Fc聚糖分析、双特异性抗体、亲和力和亲和力效应和鉴定翻译后修饰等。

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为什么客户想在他们的工作试用Genovis的FabRICATOR(IdeS)。FabRICATOR的高特异性(在铰链下方有单个消化位点)以及它对IgG种和亚类表现出活性的事实使其成为高效表征一系列不同分子的理想工具。FabRICATOR的另一大优势是速度。在大多数IgG上,您可以在短短30分钟内生成F(ab’)2和Fc/2片段,这一速度简化了方法开发,并允许快速有效的中层表征,使客户能够在不比做完整质量实验长太多的时间内获得更多关于分子的信息。Genovis发现更多的缓冲液与溶液中的FabRICATOR消解相容(更多信息)。Genovis已经测试了PBS和150mM醋酸铵,pH7,结果良好。并且应该也适用于FabRICATORHPLC。然而,缓冲液的离子强度会影响抗体片段在FabRICATORHPLC(IdeS)色谱柱上的保留,并且IgG1亚基需要至少100-150mM盐才能洗脱为单个窄峰。其他IgG亚类或融合蛋白可能需要对缓冲液组成进行一些优化。

如果您想分析单克隆抗体或单克隆抗体分子,现在有了Genovis的一些新产品(IgA酶,IgM酶),其他的模式和分子形式(IdeS高通量的产品形式)来测定和监测许多不同的CQA,Genovis可以缓解使用不同分析方法时可能出现的瓶颈。 生产大量的样品当然很好,但如果分析团队不能足够快地处理它们,那就没有什么意义了。 高通量分析需要一致的、易于使用的方法,当然这些方法要快速,而且可能易于自动化。 这正是我们所能提供的,这使Genovis能够支持更多不同功能的客户。Genovis的GingisKHAN和FabALACTICA可酶切人 IgG1,获得完整Fab和Fc抗体片段。

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样品制备的条件可能会在样品中诱发伪影,因此需要避免高温和碱性pH值进行质谱分析。如果可能的话,避免多个步骤并在一锅反应中进行消化和还原也可能是有益的。与IdeS不同,为了探索Genovis的GingisREX对离液剂和去液剂的稳定性和耐受性,在一系列试剂中测试了酶活性,并使用底物测定进行了评估。数据显示,GingisREX在6M时耐受尿素,吐温高达1%,但活性在0.1%时受到SDC的负面影响。该酶在 pH 值范围为 5.0 至 9.0 时显示出活性,在 pH 值为 6.5-8.0 之间。综上所述,GingisREX可用于一锅反应,以同时消化和变性6M尿素。与Genovis的IdeS不同,双特异性 T 细胞接合器 (BiTE) 分子是一种融合蛋白疗法,其中两个 scFv 融合,形成一个双特异性分子,其中一个 scFv 靶向细胞毒性 T 细胞,另一个靶向Ai症抗原。该蛋白质由四个蛋白质结构域组成,两个 scFv 均由 VL 和 VH 区域组成,总共由三个柔性 GS 连接子连接。这种蛋白质的大尺寸(54 kDa)可能对通过完整质谱法进行产品质量监测构成挑战,因为标准MS仪器可能无法提供蛋白质的单同位素分辨率。获得完整Fab和Fc抗体片段,用于结晶和高阶结构 (HOS) 的 NMR 研究、结合研究等。山西GingisREXIdeS蛋白酶蛋白组学

使用 Genovis的GlySERIAS Immobilized 对包含多个柔性连接子蛋白进行质量控制的中级分析方法具有强大的功能。四川FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶

对于涉及完整Fab或Fc抗体片段的应用,需要在抗体铰链处进行消化。木瓜蛋白酶和 Lys-C 等传统酶可用于生成 Fab 片段,但非特异性酶活性需要仔细优化,以极大限度地降低多个消化位点的风险。Genovis的SmartEnzymes IgG 蛋白酶 GingisKHAN 和 FabALACTICA 具有一个消化位点,可从人 IgG1 生成均质的 Fab 和 Fc 抗体片段。生成的片段可用于结晶和高阶结构 (HOS) 的 NMR 研究、结合研究等。在这里,我们提出了获得完整Fab和Fc抗体片段的不同策略。所得片段显示 GingisKHAN 的有效消化,用于生成完整的 Fab 片段或从依那西普上的融合 TNFR 结构域中分离 Fc。由于 GingisKHAN 的特异性消化依赖于 IgG 的天然折叠,因此在变性条件下特异性受到负面影响。为了使用SDS-PAGE分析消解效率,在加入SDS上样缓冲液之前,停止在分析样品中加入碘乙酰胺的反应。Genovis同时提供IdeS酶的纯化试剂盒。四川FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶

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