EndoC-βH5细胞是一种新型人类胰腺β细胞解决方案,可用于开发人类糖尿病模型以及药物筛选和验证平台,产生流程为:DNA构建,慢病毒载体产生,人胎儿胰腺外植体与pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒载体共转导,移植到SCID小鼠的肾囊下,导致八个月后形成胰岛素瘤,从而获得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5细胞分别在Opti-β1和Ulti-b1培养基中的βCoat涂层塑料板上培养。使用胰蛋白酶(0.05%)每7天繁殖一次细胞。流式细胞术分析表明所有EndoC-βH5细胞均呈胰岛素阳性,并且在绝大多数细胞中检测到PDX1和NK6.1表达(分别为92.3%和90%)。EndoC-βH5细胞在涂层塑料上形成小的贴壁簇。糖尿病细胞模型EndoC-BH5 细胞作为模型来研究 1 型糖尿病相关的促炎细胞因子敏感性和 b 细胞衰老机制.湖南糖尿病细胞模型强大且永生化
HCD利用人胎儿胰腺组织中的靶向Zhong Liu发生开发了永生化人β细胞系,其中使用慢病毒载体整合了两个转基因,SV40大T抗原(SV40-LT)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)两种转基因均在β细胞特异性大鼠胰岛素启动子(RIP)的控制下表达。***代细胞,名为EndoC-βH1,以组成型方式表达SV40LT和hTERT,而在第二代EndoC-βH2和EndoC-βH3中,这些转基因可在loxP介导的CRE重组后被切除,位点位于慢病毒骨架的3'LTR。EndoC-βH5细胞是通过使用表达可切除的SV40LT和hTERT的慢病毒载体对人胎儿胰腺进行靶向Zhong Liu发生而获得的。EndoC-BH5糖尿病细胞模型接近天然胰岛素分泌Huamn cell design(HCD)提供的糖尿病细胞模型具有高度稳健且无批次效应的特点。
Human Cell Design 开发了创新且安全的人类β细胞系生产方法。首先,将每个转导的人类胎儿胰腺芽移植到 2 或 3 只 SCID 小鼠的肾被膜下,因为该部位是人类胰腺发育的允许部位。在 6 到 8 个月内,所有移植的小鼠都发生了原发性胰岛素瘤,这导致它们的血糖水平下降。与其他胰腺移植相比,原发性胰岛素瘤是高度血管化的。然后将原发性胰岛素瘤中这些高度血管化的区域分离,用在大鼠胰岛素启动子控制下表达 hTERT 的慢病毒进行转导,并移植到其他 SCID 小鼠中。这些小鼠在 2 至 3 个月内出现低血糖,胰岛素阳性细胞大量扩增。这种体内扩增有助于维持大量增殖的胰岛素细胞,并允许定义允许的培养条件,在这种条件下,可以在体外建立永生化细胞系。Human Cell Design(HCD)开发了一种用于在人类胎儿组织中使用靶向Zhong Liu产生功能的人类β细胞系。在胰岛素启动子的控制下,用表达 SV40LT 的慢病毒载体转导人类胎儿胰腺芽。
根据从啮齿动物β细胞获得的数据来看,葡萄糖转运蛋白SLC2A2头次被认为是葡萄糖感知的主要决定因素,而后来的研究表明,葡萄糖激酶(GLK)是主要决定因素。在人类β细胞中,GLK被认为是葡萄糖感知的主要决定因素。为了克服这些限制,在HumanCellDesign中生成了新的β细胞系。EndoC-βH1是通过将表达SV40LT的慢病毒载体转导到人类胎儿胰腺芽中来开发的。随后将转导的芽移植到SCID小鼠体内,生成的表达SV40LT的细胞增殖并形成胰岛素瘤。糖尿病细胞模型人B细胞系,用慢病毒载体整合了SV40大T抗原 (SV40-LT) 和人端粒酶逆转录酶(hTERT) 两种转基因。
Human Cell Design 的细胞模型不仅在基础研究中发挥重要作用,还在新药开发和临床前研究中具有重要应用价值。通过这些高质量的细胞模型,科学家们能够更好地理解糖尿病的病理机制,筛选出具有潜力的新药物,并验证其在细胞水平上的疗效。这些细胞模型为糖尿病zhi liao的创新提供了新的希望。Human Cell Design 的科学家们通过不断的实验和优化,成功开发出了一系列高效的人源胰岛β细胞模型。这些模型不仅在胰岛素分泌方面表现出色,还能够在不同的实验条件下稳定生长,为研究人员提供了可靠的实验工具。HCD 的细胞模型已经在全球多个实验室中被广泛应用,为糖尿病研究和治疗带来了新的可能。糖尿病细胞模型人源胰岛B细胞已经进行了功能性验证。云南GLTx糖尿病细胞模型
怎么开展糖尿病研究?湖南糖尿病细胞模型强大且永生化
然后将转导的芽移植到SCID小鼠体内,使其发育成成熟的胰腺组织。分化后,新形成的表达sv40lt的β细胞增殖并形成胰岛素瘤。然后用人端粒酶逆转录酶(hTERT)转导β细胞,移植到其他SCID小鼠体内,在体外扩增生成细胞系。其中一种细胞系,EndoC-βH1,表达了许多β细胞特异性标记,而没有任何其他胰腺细胞类型标记的实质性表达。在葡萄糖或其他胰岛素分泌剂的刺激下,细胞分泌胰岛素,细胞移植逆转了化学诱导的小鼠糖尿病。Human cell design 构建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰岛B细胞模型。湖南糖尿病细胞模型强大且永生化
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