脑梗MCAO模型成功的评判方法 生物化学指标的检测:在实验过程中,检测血清中C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等生物化学指标的变化。这些指标可以反映炎症反应和缺血损伤的程度,有助于评估模型的成功。 病理学检查:实验结束后,对实验动物的大脑进行病理学检查。观察大脑皮质和海马区的细胞形态、排列情况,评估神经细胞的损伤程度。同时,通过免疫组化染色法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,以评估神经元损伤的程度。 行为学评估:在实验过程中,对实验动物进行行为学评估,如Morris水迷宫实验、步态分析等。通过比较不同处理组的行为学表现,评估模型的成功。 综上所述,评判脑梗MCAO模型成功的标准包括脑梗死面积、神经功能缺损评分、梗死血管、生物化学指标、病理学检查和行为学评估等方面。只有当这些指标均符合预期结果时,才能认为模型制备成功。注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。南京小鼠脑梗MCAO模型咨询报价
TTC染色如何测定脑梗MCAO面积-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。将模型动物大鼠安乐死,解剖取材完整的脑组织,在-20℃速冻20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。将切片至于2%TTC磷酸缓冲液(PH 7.4)溶液中,用锡箔纸盖住培养皿,放入37℃温箱30min,15min后翻动脑切片,使其均匀接触到染液。上海脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型MCAO是目前*广为接受一种药效模型。
缺血性卒中的病理生理及药物治*缺血性卒中主要诱发神经血管单元(NVU)一系列的缺血级联反应(包括兴奋性氨基酸毒性,氧(氮)化应激和缺血后炎症等),从而造成神经细胞受损甚至部分死亡细胞凋亡,*终诱发大脑功能的异常。NVU是由神经元,神经胶质细胞,血管细胞(内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞)以及基底膜共同构成,这些细胞相互作用,共同调节营养物质在细胞间质间的流动和脑血流,维持和修复髓鞘,清*代谢产物,从而实现和维持大脑的正常功能。在缺血发生时,NVU的各部分细胞发生不同程度的损伤,诱发神经元细胞的生理生化异常。部分凋亡细胞会进展为梗死灶,而梗死灶周围受损的神经细胞虽然出现了生理生化异常和功能障碍,但尚未死亡,及时低灌注可能可以改善其损伤状况使之恢复正常。这部分及时抢救仍然可以改善其功能的神经细胞一般被称为“缺血半暗带”。
迄今为止,缺血性脑卒中模型覆盖各种小型动物(小鼠,大鼠等)和较大型动物(兔、犬、猪、猴等),并应用于卒中治*药物的临床前药理药效研究。然而,自1970年代以来,大量在动物模型上得到验证的受试药物均未能在人体临床试验中获得理想的治*效果,可能原因包括:1)以往相对简单的动物模型不能准确模拟人类卒中的病理生理过程;2)临床前动物实验的药效评价方法尚难以成功转化到复杂的人体临床试验标准。2009年国际公认的“脑卒中治*学术工业圆桌会议”(Stroke Therapy Academic industry Roundtable,STAIR)发布了临床前缺血性脑卒中药物研发准则,提出提高临床前药理药效研究质量的具体要求。近年来随着更深入的基础研究发现,更多符合人类发病机理和病理生理过程的缺血性脑卒中动物模型已被开发。手术有一定技术难度,血管结扎不紧或结扎线脱落,会出血导致病理生理状态改变或增加死亡。
通过神经功能缺损评分,研究人员可以定量地评估脑梗死后对动物神经功能的影响。这对于研究脑梗死的病理过程、治*方法以及药物效果具有重要的意义。同时,这种评分方法也可以为临床医生提供参考,帮助他们更好地评估患者的神经功能缺损程度。 需要注意的是,神经功能缺损评分只是一种评估方法,不能完全戴*动物的神经功能状态。因此,在实验中还需要结合其他指标和方法进行综合评估。此外,由于实验动物的个体差异和环境因素的影响,实验结果也可能存在一定的误差。因此,在进行实验研究时需要严格控制实验条件和操作过程,以保证实验结果的准确性和可靠性。在成功建立小鼠脑梗模型后,认知功能的检测可以通过以下方法进行: 1. 迷宫测试:这是一个常用的方法,通过让小鼠在迷宫中寻找食物,观察其寻找食物的速度和正确性,来评估其认知功能。 2. 物体识别测试:给小鼠展示两个相似的物体,观察其是否能够正确识别并记住这两个物体。 3. 社交互动测试:观察小鼠与其他小鼠的互动情况,包括是否能够正确识别其他小鼠,以及是否能够进行正常的社交行为。 这些测试可以帮助评估小鼠的认知功能,从而了解脑梗对其认知功能的影响。行为学检测是评估脑梗MCAO模型动物行为变化的一种方法。上海脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型
将动物放在一个旋转的木棒上,观察动物是否能保持平衡,以评估动物的平衡能力和协调性。南京小鼠脑梗MCAO模型咨询报价
局灶性缺血模型/线栓法引起的大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(小)鼠脑血管解剖结构与人类相似,大脑中动脉也是临床缺血性卒中的高发部位,同时,采用线栓法也便于观察缺血和再灌注、永jiu(持续)和短暂性损伤等多种状态,在评价药物量效关系和确认治*时间窗等方面有一定优势,因此,MCAO是目前*广为接受一种药效模型。将尼龙线由大(小)鼠的颈外动脉(ECA)插入,经颈内动脉(ECA)阻断一侧MCA起始端,导致一侧(局灶性)脑缺血。术后再使用激光散斑血流仪或多普勒血流仪对造模效果进行验证和确认。南京小鼠脑梗MCAO模型咨询报价