酵母总RNA快速提取试剂盒(离心柱型):一、原理简介。改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA酶,然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,较后低盐的RNasefreewater将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。二、试剂盒特点:1、离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2、结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好,纯度高和离心柱方便快捷的优点,不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程,RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。3、独有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因组污染。4、多次漂洗去蛋白过程,提取RNA纯度更高。5、有效的去除了无用的5S在总RNA中含量,提高了纯度~植物RNA提取试剂产品特点:RNA纯度更高,无杂质残留,特别适合于对纯度要求很高的下游实验。成都RNA提取试剂厂家直销
与DNA不同,RNA一般为单链长分子,不形成双螺旋结构,但是很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。RNA的碱基配对规则基本和DNA相同,不过除了A-U、G-C配对外,G-U也可以配对。在细胞中,根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA(转运RNA),rRNA(核糖体RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白质的模板,内容按照细胞核中的DNA所转录;tRNA是mRNA上碱基序列(即遗传密码子)的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所。成都RNA提取试剂产品介绍普通的提取实验用国产的试剂盒就足以,价格不高,基本上各地均有现货。
植物RNA提取:植物组织中,富含酚类化合物,或富含多糖,或含有某些尚无法确定的次级代谢产物,或RNase的活性较高。这些物质在细胞裂解后与RNA紧密结合形成难溶复合物或者胶状沉淀,很难将其去除。所以我们在提取植物组织时,要选取针对植物的试剂盒,试剂盒里的裂解液能有效解决多酚易氧化、多糖化合物与核酸分离等难题。1、植物的果皮、果肉、种子、叶片等要在研钵中充分研磨,研磨过程中液氮要及时补充,避免样品融化,研磨后的样品应迅速加入裂解液中震荡混匀,避免RNA降解。2、像水稻及小麦叶片等富含纤维的样本,则应适当减少提取用量,否则组织研磨及裂解不彻底,会使提取的RNA产量较低。3、含水分较多的植物组织例如石榴果实、西瓜果实、桃子果实等则应当适当提高样本量(可选100~200mg)。4、植物组织,如植物叶片、根茎、坚硬的果实等材料一般建议使用液氮在研钵中彻底研钵成份,再继续进行提取步骤。常规的组织匀浆机对植物组织的匀浆效果可能不佳,一般不建议使用。
动物组织总RNA提取:1、尽量选取新鲜的组织,如果不是新鲜的(较好在三个月之内-80℃冰箱或者在液氮中冻存的。在剪取组织时,不要拿到室温直接剪取,一定要放到冰盒上,尽量避免反复冻融。2、用干净的剪刀镊子剪取一小块组织,剪取样本时尽量剪组织中心的部位,或者先将大块的组织先从中间切开,然后再在新鲜切口的位置剪取样本。取下的组织要充分的剪碎,将剪碎的组织放到无RNA酶的EP管中,加入裂解液,剪碎的组织要充分接触裂解液,准备匀浆。3、正常组织选取绿豆粒大小(30~60mg)的组织进行匀浆,如果组织中含有大量的蛋白、脂肪或者是紧密的纤维组织比如肝脏等,适当增减剪取组织的量(可选10~20mg)。4、如果提取的是鱼肌肉,虾肉,海蜇等含水分较多的组织时则应当适当提高样本量用量(推荐100~200mg)。5、条件允许的情况下,动物组织使用高通道组织匀浆机匀浆后即可直接进行提取步骤,如没有该设备。6、较后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上,以减少RNA的降解。血浆/血清RNA提取试剂盒:利用吸附柱法从血清、血浆样品中简单快捷提取高纯度高质量的miRNA。
酵母RNA的提取方法:浓盐法。酵母菌外层是厚达1.2µm的细胞壁,其化学成分是葡聚糖(30-40%)和甘露聚糖(30%),此外,脂类8.5-13.5%,蛋白质6-8%,还含有几丁质,酵母菌的葡聚糖,分子是为240000道尔顿,是一种分枝聚合物,葡聚糖与甘露糖之间由蛋白质维系起来。近10%的甘露聚糖的侧链通过磷酸二酯键与磷酸边接,所有这些连接方式都使得酵母提取物首要的也是关键的是如何破坏细胞壁。破壁方法有自溶破壁、酶法破壁等多种方法,而用高浓度盐溶液处理,同时加热,以改变细胞的通透性,就可以使核酸从细胞内释放出来。由于RNA钠盐易溶于水,在含盐的菌体溶液中,RNA有较高的溶解度,这样,通过控制温度使蛋白质变性沉淀,通过离心将RNA及蛋白质和脱核酵母菌体分离,从而达到提取之目的。其中食盐起到自溶促进剂,以及防腐与脱臭的作用。以及参与RNAi作用的miRNA与siRNA等,可调节基因表达。徐州RNA提取试剂进货价
目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。成都RNA提取试剂厂家直销
RNA提取试剂TRIpure是基于世界上使用较普遍的异硫氰酸胍/酚法研制而成的总RNA抽提试剂。在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染,故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆等。和进口品牌实验对照显示,公司的产品质量已经达到甚至超过了进口产品的质量。成都RNA提取试剂厂家直销
RNA提取:主要试剂Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,压制细胞释放出的核酸酶。1.Trizol试剂含有苯酚,具有毒性和刺激性,注重操作。2.RNase污染的主要来源是操作过程中手和空气中的浮沉,注重配带手套,样品尽可能盖严。3.细胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低较后得率,因为一部分RNA会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质(结缔组织和骨除外)。在清洗和裂解细胞时较好在低温下操作,防止在操作过程中释放的内源RNase降解了RNA。4.酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构,可以加入Trizol试剂同时加入无RNase的玻璃珠并剧...