实时动态成像实时动态成像对于研究动物体内的生理和病理过程具有重要意义。通过将PET动态成像技术应用于高吞吐量多鼠成像方法，可以同时获取动态脑图像4。这为研究动物大脑的功能连接和神经活动提供了新的途径。动物成像技术还可以结合基因编码的神经调节工具，实现对动物大脑活动的实时监测和调控13。这将有助于深入了解动物的行为和认知过程，以及神经系统疾病的发生机制。四、标准化和质量控制小动物成像的标准化对于提高数据的有效性和可靠性至关重要。使用小动物成像设备的标准化，以及一般的动物处理，是确保数据可重复性和可靠性的关键14。例如，提供有效的小动物成像质量控制的指导，使用幻像建立质量控制计划，可以标准化多中心研究或多扫描仪的图像质量参数。在动物实验中，需要解决由于动物处理引起的额外复杂性，以确保标准化的成像程序。实施标准化的动物神经成像协议将促进动物群体成像努力以及元分析和复制研究，提高研究结果的可比性和可靠性。合成了一系列中位引入电子给体对氨基苯或对羟基苯的五甲川菁染料。脂质荧光染料Cy7.5
荧光染料的稳定性在动物成像中起着至关重要的作用，不同类型的荧光染料稳定性差异会对动物成像结果产生多方面的影响。一、对成像信号强度的影响分散荧光染料：以苯并吡喃类分散荧光染料为例，随研磨时间延长，其色浆的粒径和荧光强度均有所降低。这表明分散荧光染料的稳定性会随着时间和处理方式的变化而改变，进而影响成像信号强度。在动物成像中，如果使用这类染料，可能会因为其稳定性不足而导致成像信号逐渐减弱，影响对动物体内特定部位的清晰显示。近红外荧光染料：近红外荧光染料具有独特的优势，如对生物组织样品的穿透性较强、受背景荧光干扰小等。然而，开发高光稳定性、高荧光量子产率、低毒性的近红外荧光材料仍是难点和热点问题。例如，苯并噻唑半花菁染料（Hc-BTZ）和苯并咪唑半花菁染料（Hc-BIZ）对环境的pH值有不同程度的响应，且光稳定性有较大差异。Hc-BIZ的光稳定性远高于Hc-BTZ，但经过硼配位后，两种染料的荧光量子产率有所降低，不过仍然高于商业化的靛菁绿ICG染料IR-125。在动物成像中，光稳定性的差异会直接影响成像信号的强度和持久性。光稳定性高的染料能够在较长时间内保持较强的荧光信号，从而更有利于对动物体内进行持续观察和成像。中国台湾国产荧光染料DiOLISTIC 染色标记机制。
荧光染料在细胞内离子浓度测量中起着至关重要的作用，不同种类的荧光染料在测量细胞内离子浓度时存在多方面的具体差异。以下将从多个角度进行详细阐述。一、测量的离子种类不同钙敏感荧光染料：文献0提到“Calciumsensitivefluorescentindicatorssincecalciumisthemostcommonlystudiedion”，即钙敏感荧光指示剂是**常被研究的离子之一。这类染料主要用于测量细胞内的钙离子浓度。例如在实验中，将细胞注入钙敏感荧光染料后，在高倍显微镜下观察，通过过滤特定带宽的照明光激发染料分子，使其发出荧光，从而测量钙离子浓度1。氢离子敏感荧光染料：在一些研究中，也有用于测量细胞内氢离子浓度的荧光染料。文献10提到“该系统使用1µm的pH敏感荧光染料涂层磁性纳米颗粒进行了细胞内pH定位”，这里的pH敏感荧光染料就是用于测量氢离子浓度的，通过这种染料可以确定细胞内的pH值，进而反映氢离子浓度的变化11。
在聚合物纳米颗粒中的稳定性：量子点被提议作为稳定的荧光标记，并与其他有机染料（尼罗红和DiI）在聚合物纳米颗粒中的包封、在不同水性或亲脂性介质中的扩散以及光稳定性方面进行了比较1015。体外转移到亲水PBS溶液中显示，8小时后，量子点、尼罗红和DiI纳米颗粒分别释放出4.2±2.2%、15.5±2.0%和0.9±0.02%。然而，在亲脂性介质中链甘油三酯和人工皮脂中，所有使用的染料都观察到更高的扩散速率。三种不同标记物的荧光强度在24小时内保持稳定。连续激光束照射使用共聚焦激光扫描显微镜表明，量子点比其他有机染料具有更高的稳定性。这表明在不同的环境中，不同化学结构的荧光染料稳定性存在差异。在分散荧光染料色浆中的稳定性：以苯并吡喃类分散荧光染料和萘磺酸类阴离子分散剂为原料，通过湿磨法制备分散荧光染料色浆。实时动态成像对于研究动物体内的生理和病理过程具有重要意义。
特异性结合：生物标志物靶向荧光探针是克服早期**检测困难的关键。例如，设计合成的双光子荧光探针（NP-C6-CXB）用于检测环氧合酶-2（COX-2）生物标志物。该荧光探针以萘酰亚胺为荧光基团，塞来昔布为靶向基团，在COX-2存在时，在溶液和*细胞中发出明亮的荧光，并且表现出很好的选择性。其荧光强度与*细胞中COX-2酶的含量成正比，为COX-2酶表达的**识别和切除提供了可视化工具29。基于塞来昔布和苯并吩噁嗪的近红外发射（700nm）荧光探针（NB-C6-CCB），用于检测细胞内高尔基体中COX-2酶。在COX-2高表达的肿瘤细胞或组织中，该探针发射出近红外荧光29。纳米载体的作用：聚合物纳米载体（胶囊、胶束和二氧化硅纳米颗粒）可作为荧光探针的载体，将荧光染料的“智能”特征整合到合成材料中。结合在pH值或光照射发生变化时会裂解的生物反应性成分，是成功设计此类载体的基础，这种载体具有在目标部位特异性加载和释放***剂的能力8。例如，从柿子果实中制备的高荧光氮掺杂碳点（PCDs），通过1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺耦合反应，将***药物阿霉素和吉西他滨固定在PCDs表面，形成PCDs@Dox和PCDs@Gem纳米杂化物，用于生物成像和caspase诱导的细胞凋亡应用30。荧光染料在动物成像中发挥着至关重要的作用。青海荧光染料标记
荧光染料的发展方向主要包括提高亮度和稳定性、拓展应用领域以及优化分子结构等方面。脂质荧光染料Cy7.5
肿瘤细胞成像：近红外荧光染料IR-780具备使多种肾透明细胞*细胞显像的能力，对正常肾胚上皮细胞则无此能力，可用于血液中肾透明细胞*细胞的特异性诊断。这为肿瘤细胞的检测和诊断提供了新的方法21。疾病标志物检测：设计合成的近红外荧光探针RB-Phenylacrylate(NOF1)，用于高选择性和高灵敏度检测半胱氨酸(Cys)，并成功应用于活细胞、斑马鱼和小鼠中半胱氨酸的近红外荧光成像检测。近红外荧光探针RB-Phenyldiphenylphosphinate(NOF2)用于过氧亚硝酸根的荧光成像，实现了活细胞和小鼠炎症模型中ONOO⁻的荧光成像检测。这些探针为疾病标志物的检测和成像提供了新的手段23。四、支持超分辨率成像新型近红外氧杂蒽荧光染料如KRhs，可用于超分辨率成像。KRhs显示出强烈的近红外发射峰，在700nm处具有高荧光量子产率，且在没有增强缓冲液的帮助下，表现出随机荧光开关特性，支持单荧光团的时间分辨定位。KRhs被功能化为KRh-MitoFix、KRh-Mem和KRh-Halo，分别具有线粒体、质膜和融合蛋白靶向能力，可用于活细胞中这些目标的超分辨率成像20。脂质荧光染料Cy7.5
