江西CHO宿主细胞残留DNA检测方案

SHENTEK^®质粒 DNA 残留检测试剂盒用于定量检测基因治疗产品中质粒 DNA 残留的检测试剂盒，如 CAR-T 细胞中慢病毒载体制备相关的质粒 DNA。本试剂盒利用 Taqman 探针原理，通过各质粒共有 DNA 序列， 如ColE1/pMB1/pBR322/pUC 来源的复制子，定量检测样品中质粒 DNA 的残留。客户可以事先将质粒 DNA 序列给湖州申科生物技术人员进行确认。本试剂盒检测快速，专一性强，性能可靠，检测限可以达到 10² copies/μL。试剂盒配套有质粒DNA 定量参考品。本试剂盒与 SHENTEK^®宿主细胞残留 DNA 样本前处理试剂盒配套使用，可准确定量样品中残留的微量质粒 DNA。

湖州申科生物宿主细胞残留DNA复杂基质样本前处理试剂盒（磁珠法）用于生物制品复杂基质和普通基质下样品的前处理，其中复杂基质包括过阴离子交换柱的蛋白类样品、蛋白浓度高且 pH 值非中性的样品等，可稳定高效地获得样品中的微量宿主细胞DNA。试剂盒具有优异的基质兼容性和操作稳定性，可与各个SHENTEK宿主细胞（CHO、大肠杆菌E.coli、Vero、酵母、NS0、Human、MDCK、Sf9&AcNPV、Hi5&AcNPV、质粒、SV40LTA&EIA 等）DNA qPCR 检测试剂盒配合使用。

湖州申科生物的产品研发和制造过程按照 ISO13485 体系要求进行，参照CDE《生物制品质量控制分析方法验证技术审评一般原则》、《中国药典》9101分析方法验证指导原则和ICH Q2 (R2)：Guideline On Validation Of Analytical Procedures等对SHENTEK系列宿主细胞残留检测试剂盒进行了全面性能验证，包括线性、范围、准确性、定量限、精密度、耐用性、专属性等，符合法规要求。可提供试剂盒详细的验证报告，如果用户使用该验证报告，则只需进行针对样品的适用性验证即可（包括精密度实验和回收率实验）。

SHENTEK^® Sf9&AcNPV 残留 DNA 检测试剂盒（多重 PCR-荧光探针法）用于定量检测昆虫细胞（Sf9）杆状病毒表达系统来源的基因工程疫苗中残留的 Sf9 细胞 DNA 和杆状病毒（AcNPV）DNA 的试剂盒。试剂盒利用 Taqman 探针原理，采用多重 qPCR 的方法定量检测样品中 Sf9 和AcNPV 残留 DNA。检测快速，专一性强，性能稳定可靠，检测限可以达到 50 copies/反应。试剂盒配套有 Sf9&AcNPV 定量参考品。本试剂盒与 SHENTEK^®宿主细胞残留 DNA样本前处理试剂盒配套使用，可准确定量样品中残留的 Sf9&AcNPV 微量 DNA。

湖州申科生物疫苗制剂宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒的核酸提取纯化为磁珠法，针对疫苗制剂的产品特点，优化了试剂配方，用于疫苗成品，如Vero细胞生产的狂犬病疫苗中的Vero残留DNA的样品前处理，可稳定高效地获得样品中的痕量DNA，可与各个SHENTEK^®宿主细胞DNAqPCR检测试剂盒配合使用。本试剂盒可以通过 rHCDpurify^®前处理系统实现样品的自动处理。如样品中含有铝佐剂或右旋糖苷，具体处理方法可咨询湖州申科生物技术股份有限公司。

宿主细胞残留 DNA 的潜在风险之一是免疫原性。在一定浓度下，所有类型的 DNA 都可能会引起免疫反应，而原核生物来源的基因组 DNA，因富含 CpG 基序和非甲基化序列，具备更强免疫原性。其中，CpG 可作为免疫刺激信号，直接与免疫细胞（如 B 细胞、巨噬细胞和树突状细胞，即 DCs 细胞 ）表面模式识别受体结合，触发细胞内信号通路，促使这些细胞大量分泌炎症性细胞因子（如肿瘤坏死因子 - α、白细胞介素 - 6 等 ）。当重组蛋白药物中存在此类残留 DNA 时，会持续触发机体免疫系统，明显增加药物在体内引发免疫原性风险，可能导致药物疗效降低、产生过敏反应等不良事件，影响药物安全性与有效性，因此在生物制药生产中，严格控制宿主细胞残留 DNA 水平至关重要 。