TAMRA(四甲基罗丹明)常作为荧光共振能量转移(FRET)中的淬灭基团与其他荧光基团搭配使用,如与 FAM 等供体染料配合。当供体染料被激发时,能量会转移到 TAMRA 上并以非荧光形式耗散,从而实现对荧光信号的调控。在荧光定量 PCR 中,常利用这种能量转移机制来检测 PCR 产物的生成。例如,在 TaqMan 探针中,FAM 标记在探针的 5' 端,TAMRA 标记在 3' 端,当探针完整时,FAM 的荧光被 TAMRA 淬灭;而在 PCR 延伸过程中,Taq 酶的 5' - 3' 外切酶活性会将探针水解,使 FAM 与 TAMRA 分离,FAM 荧光恢复,从而实现对 PCR 产物的定量检测。特点:激发波长约为 550nm,发射波长约为 580nm,荧光颜色为红色。TAMRA 具有较好的光稳定性和较高的量子产率,能够产生较强的荧光信号,并且与许多常用的荧光基团具有良好的光谱兼容性,适用于多种荧光检测平台。核酸浓度和纯度:核酸浓度过低会使检测难度增加;南通CY3荧光定量PCR仪询问报价

荧光定量 PCR 仪应用领域:基础科研基因表达分析:研究特定基因在不同组织、细胞以及不同生理状态或处理条件下的表达水平,有助于深入理解基因的功能和调控机制。基因功能研究:通过定量分析基因表达的变化,探讨基因在细胞增殖、分化、凋亡等过程中的作用,以及基因之间的相互调控关系。农业研究:作物遗传改良:检测植物基因组中的突变和表达量变化,评估作物的生长发育情况和适应性,为作物品种选育和遗传改良提供依据。植物病虫害检测:快速检测植物病原体,如病毒、细菌、等,有助于及时采取防治措施,保障农作物产量和质量。常州EVA-Green荧光定量PCR仪检测具有准确的温度控制系统,确保 PCR 反应在不同的温度阶段精确进行,以保证 TET 染料在合适的条件下发挥作用。

荧光标记探针法原理:使用一种特异性的荧光标记探针,它能与目标 DNA 序列杂交。探针的 5' 端标记有荧光报告基团,3' 端标记有荧光淬灭基团。在游离状态下,报告基团发出的荧光会被淬灭基团吸收,无法检测到荧光信号。当 PCR 反应进行时,DNA 聚合酶在延伸引物的过程中,会将探针水解,使报告基团与淬灭基团分离,报告基团发出的荧光信号就可以被仪器检测到。每扩增一条 DNA 链,就会有一个探针被水解,释放出一个荧光信号,荧光信号的强度与 PCR 产物的数量成正比。过程:在 PCR 反应的退火阶段,荧光标记探针会与目标 DNA 序列特异性结合。在延伸阶段,DNA 聚合酶的 5' - 3' 外切酶活性会将探针从 5' 端开始逐个水解,使报告基团游离出来,产生荧光信号。仪器会在每个循环的延伸阶段检测荧光信号的强度,随着 PCR 反应的进行,荧光信号逐渐增强,同样可以得到 Ct 值。定量依据:与荧光染料法类似,通过标准品建立标准曲线,根据待测样本的 Ct 值在标准曲线上计算出起始模板量。由于荧光标记探针具有特异性,能与特定的目标序列杂交,因此可以更准确地对目标基因进行定量分析,减少非特异性扩增的干扰。
光学系统:包括光源、激发和发射滤光片、检测器等。光源提供激发荧光染料所需的能量,滤光片用于选择特定波长的光,检测器负责检测荧光信号的强度。如 ABI StepOne Plus 实时荧光定量 PCR 仪的光学系统能精确检测不同荧光染料发出的信号。热循环系统:用于控制 PCR 反应的温度变化,包括变性、退火和延伸等步骤。它需要具备快速升降温的能力,以保证 PCR 反应的高效进行。例如,Roche LightCycler 480 实时荧光定量 PCR 仪的热循环系统升温速度快,能有效缩短实验时间。控制系统:负责仪器的操作和数据处理,可设置 PCR 反应的参数,如循环次数、温度、时间等,还能对检测到的荧光信号进行分析和处理,生成定量结果。在多重 PCR 反应中对不同的目标序列进行特异性标记和检测。

杭州柏恒(Bioer)Q9600Pro荧光定量PCR仪是一款备受科研人员青睐的高性能实验设备。其出色的荧光信号强度、低背景噪声和高灵敏度,使其在分子生物学领域中广泛应用于基因表达分析、基因型鉴定、病毒载量测定等研究领域,为科研工作者提供了一个强有力的实验工具。首先,Q9600Pro荧光定量PCR仪具有出色的荧光信号强度。通过精心设计的荧光探针和荧光检测系统,该仪器能够准确捕获PCR扩增过程中产生的荧光信号,并将其转化为可靠的定量数据。强大的荧光信号带来了更高的检测灵敏度和准确性,使用户能够对微量目标物质进行快速、稳定的定量分析。其次,Q9600Pro荧光定量PCR仪背景噪声极低。低背景噪声是保证实验结果准确性的重要因素,可以有效降低假阳性信号的产生,提高实验的可靠性。Q9600Pro荧光定量PCR仪在信号检测和数据处理方面表现优异,有效抑制了背景噪声的干扰,确保了实验结果的精细性和可重复性。另外,Q9600Pro荧光定量PCR仪具有高灵敏度。在微量样本的体系中,灵敏度是评估PCR仪性能的重要指标之一。Q9600Pro荧光定量PCR仪通过优化反应体系和荧光探针设计,能够检测到极低浓度的目标DNA或RNA,满足科研人员对于高灵敏度实验的需求。 并且,TET 染料具有较高的荧光量子产率,即在受到激发后能够高效地发出荧光。无锡荧光定量PCR仪直销价
TET 染料与核酸的结合具有较高的特异性和稳定性,能够在 PCR 反应过程中准确地指示目标核酸的扩增情况;南通CY3荧光定量PCR仪询问报价
荧光检测灵敏度:灵敏度高的仪器能够检测到低拷贝数的核酸模板,对于微量样本的检测至关重要。例如,一些仪器的荧光检测下限可达到几个拷贝数,适合于检测罕见病原体或低表达基因。准确性和重复性:仪器的热循环精度和荧光信号检测的准确性直接影响实验结果的可靠性。的仪器热循环误差应控制在较小范围内,荧光信号检测的变异系数(CV)较低,确保每次实验结果的一致性。动态范围:宽动态范围的仪器能够准确检测不同浓度梯度的样本,从低拷贝数到高拷贝数都能得到准确的定量结果,避免因样本浓度过高或过低而出现检测误差。南通CY3荧光定量PCR仪询问报价