技术实现要素：本发明的目的在于提供利用gm20541基因构建视网膜色素变性疾病模型的方法和应用，采用该构建方法可以得到视网膜色素变性疾病模型，该模型可表现出视网膜色素变性性疾病特征，该模型可用于视网膜色素变性性疾病的研究，可以帮助阐明rp的发病过程及机制，并为该疾病的或预防提供新的靶标。本发明是这样实现的：方面，本发明实施例提供了一种利用gm20541基因构建视网膜色素变性疾病模型的方法，其包括：敲除目标动物视网膜前体细胞中的基因组中的gm20541基因。IgA肾病小鼠模型IgA 肾病是常见的原发性肾小球疾病,约占原发性肾小球疾病的 1/3。西藏乳鼠动物模型建模
本实用新型属于动物实验设备技术领域，具体涉及一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统。背景技术：高原环境模拟系统可以在非高原地区“制造”出不同海拔高度和气候条件，模拟各种高原缺氧环境，使实验动物在一定时间内根据实验需求达到预期的高原反应症状，使实验动物表现出高原性疾病，为高原疾病研究人员提供高原疾病模型动物，便于研究或预防高原性疾病的药物。现有的环境模拟系统可以模拟实现高原光照和低氧环境，但模型成功率较低、动物死亡率较高、造模动物种类单一。技术实现要素：本实用新型的目的在于：提供一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统，解决现有高原环境模拟系统中存在的模型成功率较低、动物死亡率较高、造模动物种类单一的问题。本实用新型采用的技术方案如下：一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统，包括功能设备集成底座和设置在功能设备集成底座上的饲养仓，所述饲养仓具有无极调控微负压装置、高原低氧环境模拟装置、高原光照环境模拟装置、高原温度环境模拟装置、高原湿度环境模拟装置、动物行为学远程观察单元，所述饲养仓内设置有若干代谢笼，饲养仓前后箱体上设置有观察窗和若干操作窗。宁夏乳鼠动物模型服务四氯化碳诱导急性肝损伤大鼠模型。
e：不同光强下gm20541基因敲除小鼠的暗适应视网膜电图b波统计；scotopicamplitude：暗光测定峰值；flashintensity：闪光强度；a-wave：a波；b-wave：b波。图6：光适应视网膜电图(erg)检测结果；图中：a-b：不同光强下gm20541基因敲除小鼠的光适应视网膜电图轨迹图；c：20cd·s/m2光强下gm20541基因敲除小鼠的光适应闪烁(flicker)视网膜电图轨迹图；d：不同光强下gm20541基因敲除小鼠的光适应视网膜电图a波统计；e：不同光强下gm20541基因敲除小鼠的光适应视网膜电图b波统计；f：20cd·s/m2光强下gm20541基因敲除小鼠的光适应闪烁(flicker)视网膜电图统计。sixko或cko表示gm20541基因敲除纯合子小鼠；ctr是指野生型；het是指杂合子。图7：视网膜前体细胞特异敲除gm20541基因小鼠视网膜切片免疫组化染色结果；小鼠年龄：4个月；os：outer-segment(外节)；is：inner-segment(内节)；onl：outernuclearlayer(外核层)；inl：innernuclearlayer(内核层)；图中：a：视网膜前体细胞特异敲除gm20541基因小鼠视网膜石蜡切片的h&e染色结果，外核层及内核层均变薄；b：对不同部位的gm20541敲除鼠视网膜外核层厚度统计。图8：视网膜前体细胞特异敲除gm20541基因小鼠ihc染色结果。
本发明实施例提供了由上述的方法所得到的视网膜色素变性疾病模型在视网膜色素变性性疾病研究中的应用。进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述研究是以非疾病的为目的。通过本发明的构建方法得到的动物模型其具有典型视网膜色素变性性疾病特征，其具有非常广阔的应用前景，例如将其用于研究视网膜色素变性性疾病的发病过程、发病机制，为深入了解研究视网膜色素变性性疾病提供基础。又或者将其用于筛选用于预防或视网膜色素变性性疾病药物、用于评价药物的疗效或预后等。第三方面，本发明实施例提供了由上述的方法所得到的视网膜色素变性疾病模型在筛选用于预防或视网膜色素变性性疾病药物中的应用。在本发明方面提供了构建方法的基础上，本领域技术人员容易想到将由该方法得到的视网膜色素变性疾病模型用于筛选预防或视网膜色素变性性疾病药物或其他类似领域，这也是属于本发明的保护范围。进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述应用包括：向所述视网膜色素变性疾病模型施用候选药物，如果所述视网膜色素变性疾病模型在施用所述候选药物前后发生如下变化中的至少一种，则指示所述候选药物可以作为预防或视网膜色素变性性疾病的药物：(1)施用所述候选药物后。特发性肺纤维化（IPF）小鼠模型建立。
我们知道WB实验步骤繁琐，一次实验历时也不短，从提蛋白到显影结束可能要三天，我们就讲一下这里面的一些关键环节。一、蛋白提取及变性1、提取蛋白很多经验丰富的WB实验者都深有体会，蛋白提取是影响结果重要的环节之一。该过程重要的是防降解和保证蛋白浓度不要太低。防降解主要有两点，一是裂解前注意保持样品处于低温环境中，二是裂解时加入足够的蛋白酶抑制剂。我们习惯先用冰冷的PBS做心脏的体循环灌注，然后冰上取脑，分离各脑区(嗅球，皮层，海马，中脑，小脑，延髓，丘脑，纹状体)后置于，用液氮速冻后转移至-80度冰箱长期保存。接着是保证蛋白浓度，即要加入适量的裂解液，加太少会使蛋白提取不充分，加太多会让蛋白浓度太低，一般经验是这样的，细胞样品例如一个六孔板的细胞加60微升的裂解液，动物组织的话每毫克组织加10微升裂解液。还要加上超声破碎处理，具体方案见讨论部分。如果没有超声破碎仪，那就用1毫升注射器不断抽吸，冰上反复抽吸1分钟左右，注意不要产生过多气泡。(需要灌注取材的视频可以私聊获取，由于文件过大，又比较血腥，不宜直接放到文章里。)2、蛋白变性加入上样缓冲液后100摄氏度煮10分钟，这里的上样缓冲液有两种可选。由于卵巢早衰的病因多种多样,如自身免疫功能异常、遗传因素、代谢因素、化疗、放疗及等。C57动物模型技术
小鼠卵巢早衰POF模型。西藏乳鼠动物模型建模
实施例7在实施例6的基础上提供的一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统，所述动物行为学远程观察单元18包括coms高清图像采集系统、数字视频传输系统、频硬件解压卡、视频显示系统。本实施例的工作原理：系统内配置coms高清图像采集系统(支持icp/ip网络通讯协议)、数字视频传输系统、频硬件解压卡(usb或pci接口用户自选)、视频显示系统(用户自备)，保障了实验过程中实时监控与实验结束后操作过程的溯源。例如，在饲养仓2上方装高精密摄像头，搭载手机app，可360°监控动物的行为，并能实时录像，图像采集等，通过监控录像来实现动物学行为观察。以上所述为本实用新型的较佳实施例而已，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。西藏乳鼠动物模型建模
