HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是基于其两性离子特性和稳定的缓冲能力。以下是具体解释：稳定的缓冲能力***的pH缓冲范围：HEPES的有效缓冲范围在pH6.88.2之间，覆盖了大多数细胞生长所需的pH环境（pH7.27.4）。这使得HEPES能够在细胞培养过程中提供稳定的pH环境，有利于细胞的生长和繁殖。CO2无关性：与许多其他缓冲液不同，HEPES的缓冲能力不受CO2浓度的影响。这意味着在开放式培养或细胞观察时，即使培养基脱离了5%CO2的环境，HEPES也能维持pH的稳定，防止pH迅速升高。国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A集中采购；四川备案登记号HEPES市场价格
与其他的缓冲体系相比，HEPES突出的优势有以下几点：
1. pKa 和 buffer 比较稳定，随温度的变化很小。
2. HEPES 的缓冲能力不会与受其他离子的影响，同时HEPES本身也不会对其他离子的功能造成影，HEPES拥有性质稳定性。
3. 细胞培养基中pH的稳定性主要依靠培养基中的碳酸氢盐和5%的CO2共同维持。当细胞处于开放环境时，二氧化碳的弥散会导致pH上升脱离生理pH范围。可是添加HEPES缓冲对的培养基则不存在这方面问题。
4. HEPES不干扰细胞内的生化反应因为它不易穿过生物膜，因此它更适用于伊立替康脂质体。 河南羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES批量国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A购买。
HEPES是一种两性离子缓冲剂，化学式为C8H18N2O4S，分子量238.3g/mol。其pKa值为7.5（25℃），在pH6.8-8.2范围内具有优异的缓冲能力。作为Good's缓冲液家族成员，HEPES对细胞无毒性，且不与金属离子螯合，适合含金属离子的实验体系。其水溶性（>1M）和低渗透压特性使其成为细胞培养的理想选择。HEPES在细胞培养中的应用HEPES***用于哺乳动物细胞培养，尤其在CO2培养箱外操作时（如显微镜观察），可替代碳酸氢盐缓冲系统。推荐浓度为10-25 mM，过高浓度可能抑制细胞生长。需注意HEPES对光敏感，需避光保存。
药用辅料HEPES，全称为4-羟乙基哌嗪乙磺酸，是一种重要的两性离子缓冲剂。以下是对药用辅料HEPES的详细介绍：一、基本性质分子式：C8H18N2O4S分子量：238.3CAS号：7365-45-9外观：白色结晶粉末溶解性：具有良好的水溶性二、药用功能与应用缓冲作用：HEPES在pH值为6.8~8.2的范围内具有良好的缓冲能力，能够维持溶液pH的稳定。在药用辅料中，HEPES常用于制备各种注射剂、口服液等制剂，以确保药物在储存和使用过程中pH值的稳定。细胞保护作用：HEPES对细胞无毒性作用，且能够降低某些化学物质的细胞毒性。在细胞培养中，HEPES能够维持细胞的正常形态和功能，提高细胞的生存率。促进药物吸收：作为促透剂，HEPES能够促进药物分子通过皮肤或黏膜的吸收，提高药物的生物利用度。其他应用：HEPES还用于制备各种生化试剂盒、诊断试剂等，为医药产品的质量和安全性提供保障。在某些特定的药物制剂中，HEPES还起到稳定剂、增溶剂等作用。注射用HEPESCDE已登记登记状态为A。
在流式细胞术中的优化HEPES（10 mM）可维持细胞悬液pH稳定，减少荧光染料淬灭。但需与FBS或BSA联用以防止非特异性结合。HEPES缓冲液能减少细胞聚集，提高流式分析的准确性。在长时间流式实验中，HEPES可替代碳酸氢盐缓冲液，避免因CO2逸出导致的pH漂移。HEPES的低离子强度特性减少了对细胞膜的损伤。HEPES缓冲能力在4-37℃范围内变化<10%，优于Tris缓冲液。但高温（>50℃）会导致降解，需避免高压灭菌。HEPES在低温下仍保持良好缓冲能力，适合冷库或冰上操作。在热稳定性实验中，HEPES缓冲液能有效维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES在高温下的降解产物可能干扰实验结果。艾伟拓稳定供货HEPES！广西HEPES药用采购
注射用HEPES CDE已登记登记状态为A；四川备案登记号HEPES市场价格
光敏感性与储存条件HEPES溶液在光照下会生成过氧化物，需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22μm滤膜除菌，并检测过氧化物含量（如硫代硫酸钠滴定法）。过氧化物会氧化敏感的生物分子，如硫醇基团和某些荧光染料。长期储存的HEPES溶液应分装并避免反复冻融。商业化的HEPES粉末也应避光保存，因其在光照下会逐渐降解。HEPES溶液的pH会随时间缓慢变化，建议使用前重新校准。蛋白质纯化中的缓冲选择HEPES缓冲液（pH 7.5）适用于离子交换层析，因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用，以防金属离子沉淀。HEPES在蛋白质结晶中也常用作缓冲液，其低离子强度减少了对晶体生长的干扰。在蛋白质稳定性研究中，HEPES缓冲液能有效维持蛋白质的天然构象。HEPES还可用于蛋白质的等电点测定，因其缓冲范围覆盖了多数蛋白质的等电点区域。四川备案登记号HEPES市场价格
