北京永诺数字PCR

定量PCR和数字PCR的特点：

MicroDrop-100系统产品特点：

一、适应性广，灵活性高

1、理论上可覆盖qPCR（荧光定量PCR)的所有应用

2、样本多样性，样本通量可达96个样本，支持灵活设定

3、开放式平台，支持用户自行开发试剂、产品。

二、灵敏度高，准确性高

1、***定量——无需依赖标准曲线

2、采用微滴式技术高达100,000个的微滴

3、线性范围达到6个数量级，灵敏度高达万分之一

三、可分析复杂混合物

1、准确度不完全依赖于扩增效率

2、双通道荧光检测，支持EvaGreen染料及探针法

3、支持多重数字PCR

四、操作简单，使用方便

1、全封闭防污染设计，一键式自动化操作。

2、可选全中文分析软件

要了解为什么传统 PCR 存在限制，务必要了解 PCR 反应过程中发生了什么。基本 PCR 运行可以分为三个阶段：

指数期

每个循环积聚的产物准确加倍（假定 ** 反应效率）。该反应具有高度特异性和精确度。出现指数式扩增，因为所有试剂均新鲜可用，反应的动力学推动反应有利于扩增子加倍。

线性期（高变异性）

随着反应继续，一些试剂因扩增而被消耗。反应开始减缓，并且每个循环的 PCR 产物不再加倍。

平台期（终点：使用传统方法进行凝胶检测）

反应停止，不再产生更多产物，并且如果放置时间够长，PCR 产物将开始降解。因为每个样品具有不同的反应动力学，所以每支试管或每个反应将在不同的时间点进入平台期。在平台期可以看到这些差异。在平台期内，传统 PCR 进行测量，又称为终点检测。 数字PCR技术与高通量的二代测序技术，共同组成液体活检领域的两大利器。

研究方向

低丰度及稀有序列的精确定量

目前对于低丰度目标序列的检测，定量PCR、杂交、毛细管测序及NGS等方法都因受到背景DNA的干扰，使得检测灵敏度及精确性都达不到精细定量的要求(如定量PCR检测中Ct值大于33的情况下，其重复性就不是很高)， 而微滴式数字PCR系统通过**的微滴化处理，使得稀有的核酸序列从大量的背景DNA中分离出来，从而提高了检测的灵敏度及重复性。

此外，由于样品微滴化处理的同时，也将样品中可能存在的***剂进行了分装，提高了数字PCR扩增对于***剂的耐受程度，因此可具体应用于很多临床样品(血液、尿液、粪便、痰液、脑脊液等)中对**核酸标记物的检测。一般而言，毛细管电泳和定量PCR的检测灵敏度约在10%;NGS的灵敏度可达到1%;而ddPCR的检测下限为0.001%。 CRISPR-Cas9基因编辑结果验证。北京永诺数字PCR

准确度不完全依赖于扩增效率。北京永诺数字PCR

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