糖原染色――检查项目的注意细节:其判断标准随细胞不同而异,一般分为5级,即0~4级。糖原染色――检查项目的一般步骤:(1)新鲜干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸馏水冲洗数次,待干。(2)浸入10g/L过碘酸水溶液中10min,蒸馏水冲洗数次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自来水冲洗约5min,再用蒸馏水冲洗,然后用20g/L甲基绿复染20min,水洗,晾干。糖原染色――检查项目结果解读:(1)新鲜干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸馏水冲洗数次,待干。(2)浸入10g/L过碘酸水溶液中10min,蒸馏水冲洗数次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自来水冲洗约5min,再用蒸馏水冲洗,然后用20g/L甲基绿复染20min,水洗,晾干。可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。上海口碑好的糖原染色试剂盒平均价格
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:PAS染色时需于暗处加盖反应,染色时间10~20min(染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度,SO浓度高,染色时间适当缩短;环境温度高,染色时间也应适当缩短,反之则需适当延长反应时间)。染色过程中不能接触伊红,以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时,较好作消化对照,即取两张连续切片,其中一张脱蜡至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如经消化处理的切片染色阴性,不经消化处理的切片染色阳性,即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠(钾)溶液配置后,不能保存,因此,必须现配现用,用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。浙江品质好的糖原染色试剂盒量大从优拥有千锤百炼的专业人才队伍,保证实验快速、有效的完成。
特殊染色方法选择应遵循:染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法;突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质,甲基紫染色法虽然流程较为简单,但结果不易保存,阳性对比度相对不突出;刚果红染色法阳性结果明显,长时间保存不褪色,流程简便,更是实用的方法。如显示弹性纤维,地衣红染色染液虽配制较方便,但结果对比度相对欠佳,与其他几个染色法相比,多不选择使用。
糖原染色试剂:本试剂盒适用于骨髓细胞涂片,血液细胞涂片,以及组织石蜡切片的染色检测。操作简单方便,1h内即可完成反应。PAS染色,全称过碘酸雪夫染色(Periodic Acid-Schiff Stain),主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。另外,此染色方法还可以显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、色素、淀粉样物质、基底膜、霉菌等。PAS法的检测原理在于:过碘酸(也成为高碘酸)是一种强氧化剂,能够氧化组织或者细胞中的糖原及有关物质中的1,2-乙二醇基,使其转变为二醛基。醛再与雪夫液中的无色品红结合产生一种紫红色的化合物,定位于胞浆上。如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病。
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能较好地保存糖原,但有使糖原流动到细胞一侧的现象,多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存,是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此较好不单独使用乙醇固定,以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳。冷冻切片染色效果不佳,成熟时间2个月,染色时间一般15-20分钟。上海口碑好的糖原染色试剂盒销售厂家
可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。上海口碑好的糖原染色试剂盒平均价格
糖类染色:糖类从组织化学技术角度来分,可分为多糖、中性粘液物质、酸性粘液物质、粘蛋白及粘脂质。多糖主要指糖原,它是一种胶样液态存在于肝细胞、骨骼肌、心肌等处。因糖原在肝脏及心肌疾患及某些的病变中分布和量都有一定改变,故糖原的染色在临床病理诊断上具有重要意义。(1)肝及心肌糖原沉着症的诊断:糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。(2)糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。(3)高雪氏病与尼曼——匹克氏病的鉴别:前者为阳性、后者为阴性,做此染色较易鉴别。(4)骨内骨外尤文氏肉瘤的诊断:此瘤 80%细胞内有较多糖原,糖原染色为阳性,所以糖原染色为阳性(大多数细胞)可以协助诊断。(5)腺泡状软组织肉瘤与化感瘤:前者棒状小体糖原染色为阳性。上海口碑好的糖原染色试剂盒平均价格
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粘液染色法:粘液一般有以下几点特性:(1)对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。(2)对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。(3)遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。(4)溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种:1、P.A.S染色法:操作方法同前,结果;中性粘液性物质,某些酸性粘液物质呈红色,核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法:该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法:(1)切片常规脱蜡入水。(2)3%醋酸液洗2分钟,入1%阿利新兰醋酸液(PH2.5)10-20分钟。(3)蒸馏水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)苏木素淡染2-3分钟,水洗...