染色的原理和临床意义:原理:粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶(peroxidase,POX)能将底物过氧化氢分解,产生新生态氧,它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化,显棕色四甲基苯醌二胺,再加入亚硝基铁**与联苯胺蓝结合,可形成稳定的蓝色颗粒,定位于细胞浆内酶所在的部位。临床意义: 临床上主要用于急性白血病类型的鉴别:急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞POX染色均呈阴性反应;急性粒细胞白血病 原粒细胞POX染色呈局灶分布的阳性反应;急性早幼粒细胞白血病 颗粒增多的早幼粒细胞POX染色呈强阳性反应;急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。安徽正规糖原染色试剂盒量大从优
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:Schiff氏染液的配制是关键,尤其是偏重亚硫酸钠的质量,打开应是粉剂,且带有硫的气味,若成团或没有气味,则不能用,配制时使用的容器、药勺、称药天平与称药纸等必须洁净、无污染。新配制好的Schiff剂为无色透明液体[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用时取一份恢复到室温即可。沈洪武等通过对比染色发现,冷冻保存1年的Schiff液的染色结果与新鲜配制的染色结果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之间),环境温度以不高于20℃为宜,室温高时氧化时间适当缩短;如果染色时环境温度较高且高碘酸作用时间长,可使某些物质成分发生非特异反应,使染色结果出现假阳性。因此,室温较高时可适当缩短反应时间。天津哪家生产糖原染色试剂盒厂家现货糖原在肝脏及心肌疾患及某些的病变中分布和量都有一定改变。
糖原染色试剂盒。含乙二醇基的多糖经过碘酸氧化,产生醛基,与雪夫(Schiff)试剂中无色品红结合,形成紫红色沉淀物定位于含糖原的胞浆中。该反应称为碘酸-雪夫(PAS)反应。(1)雪夫液配制:碱性品红1g溶于200ml沸水中,冷却60℃时过滤,加1mmol/L盐酸20ml,再冷却至25℃左右,加偏重亚硫酸钠(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗处24h,无色即可放冰箱中保存,呈微红色,则加活性炭1~2g,吸附过滤使成无色液体,放冰箱中保存。若溶液变红,即不能再用。(2)10g/L过碘酸水溶液:过碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸馏水至10ml。溶解后盖紧放冰箱备用,一般可用3个月,变黄则失效。
糖原染色:1、概况PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。2、原理PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。3、应用随着医学实验技术的发展,糖原染色应用的范围更加普遍,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ,糖原累积病诊断和研究 ,糖尿病的诊断和研究 ,用于某些的诊断等。帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞,腺细胞呈阳性反应。
临床意义:1.急性白血病类型的鉴别 红白血病的幼红细胞PAS染色多呈阳性反应,阳性率高,反应强;成熟红细胞有时亦可为阳性;急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细胞PAS染色多为红色颗粒或块状阳性反应;急性粒细胞白血病的原粒细胞呈阴性或胞质呈弥漫淡色阳性反应;急性早幼粒细胞白血病 异常早幼粒细胞的PAS染色为阳性反应;急性单核细胞白血病原、幼单核细胞PAS染色阳性反应呈弥漫分布的红色细颗粒,巨核细胞白血病原巨核细胞PAS染色呈阳性或强阳性反应,表现为红色颗粒或块状。2.各类贫血的鉴别 MDS、缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血(曾称地中海贫血)的幼红细胞PAS染色多为阴性反应,有时可出现阳性反应;巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。浙江糖原染色试剂盒哪里买
保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色,染色效果较差。安徽正规糖原染色试剂盒量大从优
特殊染色方法选择应遵循:染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法;突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质,甲基紫染色法虽然流程较为简单,但结果不易保存,阳性对比度相对不突出;刚果红染色法阳性结果明显,长时间保存不褪色,流程简便,更是实用的方法。如显示弹性纤维,地衣红染色染液虽配制较方便,但结果对比度相对欠佳,与其他几个染色法相比,多不选择使用。安徽正规糖原染色试剂盒量大从优
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粘液染色法:粘液一般有以下几点特性:(1)对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。(2)对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。(3)遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。(4)溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种:1、P.A.S染色法:操作方法同前,结果;中性粘液性物质,某些酸性粘液物质呈红色,核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法:该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法:(1)切片常规脱蜡入水。(2)3%醋酸液洗2分钟,入1%阿利新兰醋酸液(PH2.5)10-20分钟。(3)蒸馏水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)苏木素淡染2-3分钟,水洗...