糖类染色实验——糖原染色:高碘酸氧化液:高碘酸 0.5 g,蒸馏水 100 ml。此液溶解后放入冰箱中待用。Schiff 染色液:碱性复红 1 g,1mol/L 盐酸 20 ml,焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)2 g,双重蒸馏水 200 ml。先将 200 ml 双重蒸馏水煮沸,稍有火焰,加入 1 g 碱性复红,再煮沸 1 min,冷却至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 盐酸,待 35℃ 时加入 2 g 焦亚硫酸钠。室温中 2 h 之后见稍带红色,5 h 之后变为无色液体。棕色瓶内装好,放入冰箱中保存待用。1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。2. 蒸馏水洗 2 次。3. 高碘酸氧化液处理 10~20 min。4. 充分蒸馏水洗。5. Shciff 液染色,染色 10~20 min(如果室温在 15℃ 以下时,可在湿盒内加入温水而加快反应)。6. 流水冲洗 3 min(对于着色较深的切片可适当缩短时间)。7. 用 Mayer 明矾-苏木**染细胞核 3~5 min。8. 0.5% 盐酸乙醇液分化 30s,自来水浸洗 2 min。急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。安徽提供糖原染色试剂盒直销价
糖原染色服务简介:特殊染色是为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,常需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行特殊染色。里来生物提供Masson染色、番红-固绿染色等二十多种染色方法,以下*介绍几种主要的染色方法。PAS染色:主要用来检测组织中的糖类。全称为过碘酸雪夫氏染色(schiff periodic acid shiff,PAS),又称糖原染色,其原理为过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,变为红色,定位于胞浆上,在组织学上, PAS染色应用范围普遍:鉴别细胞内空泡状性质、心肌病变及其他心血管疾病的诊断、糖原累积病诊断和研究、糖尿病诊断和研究,除用于糖原的鉴定和黏液的显示外,还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。江苏哪家生产糖原染色试剂盒厂家批发价冷冻切片染色效果不佳,成熟时间2个月,染色时间一般15-20分钟。
糖原D-PAS染色液:使用方法:1、两张相同切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇入水。2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理,入水中1h作为对照。3、流水冲洗两张切片各5~10min。4、入过碘酸溶液,室温放置5~8min,一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。6、入Schiff Reagent,置于室温阴暗处浸染10~20min。7、自来水冲洗10min。8、入Mayer苏木素染色液,染细胞核1~2min。9、(可选)酸性乙醇分化液分化2~5s。10、自来水冲洗10~15min,更换蒸馏水清洗使其返蓝。11、二甲苯透明,中性树胶封固。
特殊染色化学试剂的选择:化学试剂的选择主要针对自配试剂而言,对于商品化试剂盒则在于染液质量。1、一般要求选用很好品牌的化学试剂,特别是一些染色中关键的试剂。很好的化学试剂(如Sigma、国药、阿拉丁、西陇等)是保证高质量染液的前提和关键,特别对于染液中的关键试剂尤为重要。如碱性品红在一些染色液(抗酸、无色品红、醛品红等)中均为主要试剂,其质量决定了较终的染色效果。如配制无色品红染液时,所使用的偏重亚硫酸钠试剂质量不合格,则会导致染液配制失败,无法染出合格的切片。2、纯度一般以分析纯为主。素染色液100mlHE染色属于常规切片HE染色的明矾苏木素的一种。
糖原及粘液染色法注意事项:1、 糖原的固定要及时,而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病,因无水酒精渗透较慢,而且容易产生极化,(极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果较佳,其配法如下:苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛 10ml冰醋酸 5ml3、各种试剂必须化学纯,亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏试剂,在经过活性碳吸附漂白后不显无色,首先应考虑试剂中的偏重亚硫酸钠是否失效。如果偏重亚硫酸钠气味不浓,使用时可考虑适当的增加用量。其次考虑碱性品红本身,常常虽属同一生产厂家,但不同批号,其效果就可能不同,应特别引起注意。细胞核、染色体以及基因表达的研究。湖南正规糖原染色试剂盒产品介绍
故PAS染色有助于三种急性白血病类型的鉴别。安徽提供糖原染色试剂盒直销价
糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒简介糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年*先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于过氧化,这是很关键的步骤。本糖原PAS染色试剂盒的特点: 采用Leagene特有配方技术,较大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操作简捷,*需1h左右。安徽提供糖原染色试剂盒直销价
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粘液染色法:粘液一般有以下几点特性:(1)对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。(2)对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。(3)遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。(4)溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种:1、P.A.S染色法:操作方法同前,结果;中性粘液性物质,某些酸性粘液物质呈红色,核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法:该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法:(1)切片常规脱蜡入水。(2)3%醋酸液洗2分钟,入1%阿利新兰醋酸液(PH2.5)10-20分钟。(3)蒸馏水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)苏木素淡染2-3分钟,水洗...