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糖类染色实验——糖原染色：高碘酸氧化液：高碘酸 0.5 g，蒸馏水 100 ml。此液溶解后放入冰箱中待用。Schiff 染色液：碱性复红 1 g，1mol/L 盐酸 20 ml，焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）2 g，双重蒸馏水 200 ml。先将 200 ml 双重蒸馏水煮沸，稍有火焰，加入 1 g 碱性复红，再煮沸 1 min，冷却至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 盐酸，待 35℃ 时加入 2 g 焦亚硫酸钠。室温中 2 h 之后见稍带红色，5 h 之后变为无色液体。棕色瓶内装好，放入冰箱中保存待用。1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。2. 蒸馏水洗 2 次。3. 高碘酸氧化液处理 10～20 min。4. 充分蒸馏水洗。5. Shciff 液染色，染色 10～20 min（如果室温在 15℃ 以下时，可在湿盒内加入温水而加快反应）。6. 流水冲洗 3 min（对于着色较深的切片可适当缩短时间）。7. 用 Mayer 明矾-苏木**染细胞核 3～5 min。8. 0.5％ 盐酸乙醇液分化 30s，自来水浸洗 2 min。操作简单方便，1h内即可完成反应。湖南品质好的糖原染色试剂盒厂家直销

可以通过pas染色计算糖原含量吗：PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用来显示糖元和其它多糖物质. 具体现象例举：阳性反应,胞浆呈红色,阴性反应,胞浆呈无色；在正常血片中RBC不染色； PLT染成深红色；中性粒细胞胞浆染成红色或深红色,有些细胞有阳性颗粒；单核细胞的胞浆染成淡红色,可含有细小或粗大阳性颗粒；少数淋巴细胞的胞浆内含有少许小的淡红色或红色颗粒；正常骨髓的幼稚细胞和有核RBC都不染色；巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色. 巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色. 颜色深浅与浓度相关。天津提供糖原染色试剂盒进货价取材必须新鲜，这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要。

染色的原理和临床意义：原理：粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶（peroxidase，POX）能将底物过氧化氢分解，产生新生态氧，它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化，显棕色四甲基苯醌二胺，再加入亚硝基铁**与联苯胺蓝结合，可形成稳定的蓝色颗粒，定位于细胞浆内酶所在的部位。临床意义： 临床上主要用于急性白血病类型的鉴别：急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞POX染色均呈阴性反应；急性粒细胞白血病　原粒细胞POX染色呈局灶分布的阳性反应；急性早幼粒细胞白血病　颗粒增多的早幼粒细胞POX染色呈强阳性反应；急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。

糖原染色（PAS）：（1）原理：过碘酸将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合，形成紫色化合物，定位于细胞质中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分钟，流水冲洗，晾干。滴加过碘酸溶液作用20分钟，流水冲洗，晾干。滴加雪夫液作用60分钟，流水冲洗，晾干。滴加甲基绿溶液复染10分钟，流水冲洗，晾干镜检。（4）临床意义：根据染色阳性程度和阳性物形态鉴别主要用于急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病鉴别，还有助于红白血病与巨幼细胞贫血和溶血性贫血的鉴别诊断。利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应。

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水，在酶的作用下很容易分解葡萄糖，更易溶于水，固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液，宜采用酒精性固定液，如Carnoy液，能较好地保存糖原，但有使糖原流动到细胞一侧的现象，多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存，是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白，亦能**白和糖原沉淀，但仍可溶于水，因此较好不单独使用乙醇固定，以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳。加入少量活性碳并震荡、过滤，此时溶液应为无色。山东咨询糖原染色试剂盒厂家供应

在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸。湖南品质好的糖原染色试剂盒厂家直销

特殊染色方法选择应遵循：染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法；突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质，甲基紫染色法虽然流程较为简单，但结果不易保存，阳性对比度相对不突出；刚果红染色法阳性结果明显，长时间保存不褪色，流程简便，更是实用的方法。如显示弹性纤维，地衣红染色染液虽配制较方便，但结果对比度相对欠佳，与其他几个染色法相比，多不选择使用。湖南品质好的糖原染色试剂盒厂家直销

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