目前外泌体提取的标准依然是超速离心法;方法十分复杂繁琐,耗时长,以提取尿液中的外泌体为例,每次至少需要200毫升的尿液量,并通过超速离心(120000g/分钟)20小时以上才能获得足够的外泌体量,同时对超速离心机的设备要求以及操作程序的培训较大提高了提取成本,无法实现临床的常规化应用。由于国内有关外泌体提取试剂的缺乏,我国对外泌体的研究还基本依赖于过程繁琐的超速离心和进口提取试剂盒,因此也严重阻碍了我国在外泌体的研究和临床应用上的发展。将沉淀物用PBS缓冲液进行悬浮,使外泌体悬浮于液体上层。贵阳外泌体提取试剂直销价
miRNA因在机体内起着调节作用被认为有诊断的生物标志物的潜力,外泌体miRNA富集的变化可反映生理病理的改变。一些病症特异性循环外泌体miRNA已被开发为肺病的早期诊断生物标记。据报道,miR-23b-3p,miR-10b-5p和miR-21-5p是非小细胞肺病(NSCLC)患者有希望的预后生物标志物。外泌体与疾病治病(应用潜能):外泌体由于其表面具有多种粘附蛋白已经成为基因治病的潜在载体,纳米尺寸和柔韧性使它们能够跨越主要的生物屏障,如血脑屏障(BBB)等。与脂质体制剂相反,外泌体是天然存在的分泌性膜囊泡,毒性较低,从它们在体内普遍存在可以推断出其在体内的耐受性很好。另外,外泌体固有的归巢能力暗示了它们在药物递送中的潜在效用。例如,源自黑色素瘤的外泌体优先进入前哨淋巴结,这种归巢能力可以用作药物的靶向递送。外泌体提取试剂哪家好通过过滤膜对上述体液样本进行过滤,进一步去除体液中的细胞残片及其他杂质。
外泌体的组成:外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休克蛋白(HSP70)、CD类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白,但是不同来源的外泌体的组成有差异。外泌体的提取方式:1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。2、过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂。4、免疫磁珠法:这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不普遍。
研究探讨了外泌体是否可以作为RNAi的有效载体的可能性。与脂质体和其他合成药物纳米颗粒载体不同,外泌体含有可能增强内吞作用的跨膜和膜锚定蛋白,从而促进其内容物的递送。CD47是外泌体蛋白质之一,是一个普遍表达的整合素相关跨膜蛋白,其部分功能可以保护细胞免受吞噬作用。CD47是信号调节蛋白α(SIRPα,也称为CD172a)的配体,CD47-SIRPα间的结合能够发出“不要吃我”的信号,从而压制吞噬作用。病基因RAS能够促进胰腺病细胞增殖,增强胞饮作用从而促进一些病症细胞摄取外泌体。合成纳米颗粒对细胞有一定毒性作用,但使用外泌体能够较小化对细胞的毒性。研究人员发现,CD47和病基因KRAS驱动的胞饮作用都会压制外泌体被循环系统的清理,并增强胰腺病细胞对外泌体的特异性。所以,外泌体的这种特性增强了它们通过递送RNAi来特异性靶向胰腺病中的KRAS的能力,并且使用外泌体作为单一靶向剂显着改善了所有实验PDAC小鼠模型的总生存期。聚乙二醇(PEG)可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀。
外泌体在肺病进程中的作用:在一些病症微环境中,一些病症细胞来源的外泌体能够诱导CD4+T分化为调节性T细胞,压制机体的抗一些病症免疫反应;肺病细胞分泌的外泌体含有miR-21和miR-29a,可在免疫细胞中结合并启动TLR8,使TLR介导的NF-κB信号通路活化,从而导致一些病症的生长和转移。在肺病的侵袭和转移过程中,细胞间通讯扮演着重要的角色。据有关报道称,NSCLC分泌的外泌体内TGFβ和IL10的高表达与肺病的转移密切相关。此外,启动的T细胞可以通过调控Fas信号通路增加基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达,进而促进肺病的转移。这些机制有望成为肺病治病的潜在靶点。虽然大多数外泌体都是促进一些病症的侵袭与转移,但也有报道称,外泌体miR-302b可以通过压制TGFβRⅡ来压制肺病细胞的转移与增殖。这些试剂盒不需要特殊设备,随着产品不断更新换代,提取效率和纯化效果逐渐提高。合肥正规外泌体提取试剂平均价格
同时可获得高纯度和高回收率的外泌体——如新西兰IZON开发的系列的外泌体排阻剂。贵阳外泌体提取试剂直销价
所有的细胞都能分泌外泌体,但是不同细胞分泌的外泌体不管在数量上还是在内含物中都具有很大的差异性,这也决定了每种外泌体所行使的功能不一样。外泌体普遍参与细胞间物质运输与信息传递,调控细胞生理活动。同时,外泌体具有抗原提呈、免疫逃逸、诱导正常细胞转化、促进一些病症发生和转移等作用;此外,外泌体还可以作为“天然的纳米粒子”来进行药物递送。外泌体相关数据库有哪些?lexoRBase数据库收集和描述人类血液外泌体中所有长的RNA,包括circRNA、lncRNA和mRNA。lEVpedia和Vesiclepedia数据库汇总了不同囊泡研究中发现的蛋白、mRNA、miRNA、脂类等信息。lExoCarta数据库主要收录了包括人、大鼠、小鼠、绵羊等几个物种的286个研究结果,涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂类等信息。贵阳外泌体提取试剂直销价
苏州君欣生物科技有限公司主要经营范围是精细化学品,拥有一支专业技术团队和良好的市场口碑。苏州君欣生物科技致力于为客户提供良好的原代细胞,无血清细胞冻存液,干细胞无血清培养基,动物疾病模型,一切以用户需求为中心,深受广大客户的欢迎。公司将不断增强企业重点竞争力,努力学习行业知识,遵守行业规范,植根于精细化学品行业的发展。苏州君欣生物科技秉承“客户为尊、服务为荣、创意为先、技术为实”的经营理念,全力打造公司的重点竞争力。
外泌体的提取方法学规范、统一定量及鉴定等。关于外泌体的提取有超速离心、试剂盒、超滤法、蔗糖密度梯度离心等,然而各种方法均有其利弊。超速离心法是目前外泌体相关文章中的主流方法,由于离心步骤繁琐,费事费力,而且步骤多导致实验中容易污染,且损耗量大,使得较终回收的外泌体不稳定。而且对于抽提细胞上清来说,更是极为不请便,试想用提取300ml的上清需要6个50ml离心管,无论是过滤还是后续的每一步的离心去沉淀,都具有操作极其不便的缺点,总之非常麻烦。而超滤法存在外泌体会堵塞膜孔,造成浓缩效率低,浓缩管重复利用差,甚至堵塞在膜孔的外泌体还可能会粘连成团,造成损失及较后的数据有误差,对于后续实验也有影响无法...