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糖类染色实验——糖原染色：高碘酸氧化液：高碘酸 0.5 g，蒸馏水 100 ml。此液溶解后放入冰箱中待用。Schiff 染色液：碱性复红 1 g，1mol/L 盐酸 20 ml，焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）2 g，双重蒸馏水 200 ml。先将 200 ml 双重蒸馏水煮沸，稍有火焰，加入 1 g 碱性复红，再煮沸 1 min，冷却至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 盐酸，待 35℃ 时加入 2 g 焦亚硫酸钠。室温中 2 h 之后见稍带红色，5 h 之后变为无色液体。棕色瓶内装好，放入冰箱中保存待用。1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。2. 蒸馏水洗 2 次。3. 高碘酸氧化液处理 10～20 min。4. 充分蒸馏水洗。5. Shciff 液染色，染色 10～20 min（如果室温在 15℃ 以下时，可在湿盒内加入温水而加快反应）。6. 流水冲洗 3 min（对于着色较深的切片可适当缩短时间）。7. 用 Mayer 明矾-苏木**染细胞核 3～5 min。8. 0.5％ 盐酸乙醇液分化 30s，自来水浸洗 2 min。糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。湖南哪家提供糖原染色试剂盒销售厂家

注意事项：染色前：①切出的石蜡切片要好，不能有皱褶或者刀痕，切片不能太厚。②捞片时，较好一张玻片捞一个组织，组织较好位于玻片的中间，美观的同时也利于脱蜡（有时二甲苯的液面低于组织片的时候，达不到脱蜡的目的）。③石蜡切片脱蜡到水时，一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底（脱蜡时间不能太少）以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面，在染色时染色液未能充分与组织接触，较终导致染色效果不佳，甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸，以避免脱蜡时把标签纸也浸没，致使标签纸上的胶黏到玻片上，造成染色不佳。安徽正规糖原染色试剂盒单价巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。

可以通过pas染色计算糖原含量吗：PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用来显示糖元和其它多糖物质. 具体现象例举：阳性反应,胞浆呈红色,阴性反应,胞浆呈无色；在正常血片中RBC不染色； PLT染成深红色；中性粒细胞胞浆染成红色或深红色,有些细胞有阳性颗粒；单核细胞的胞浆染成淡红色,可含有细小或粗大阳性颗粒；少数淋巴细胞的胞浆内含有少许小的淡红色或红色颗粒；正常骨髓的幼稚细胞和有核RBC都不染色；巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色. 巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色. 颜色深浅与浓度相关。

糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色试剂盒不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质，使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化，这是很关键的步骤。PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解，形成水溶性的双糖-麦芽糖，在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段，但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑，不主张应用唾液。帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，腺细胞呈阳性反应。

GUS染色步骤：1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保温1小时至过夜。 2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次，至阴性对照材料呈白色。 3.肉眼或显微镜下观察，白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注：用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。过碘酸溶液和苏木素溶液浓度更低，不宜过染。天津提供糖原染色试剂盒哪家便宜

推荐用于骨和软骨的染色。湖南哪家提供糖原染色试剂盒销售厂家

粘液染色法：粘液一般有以下几点特性：（1） 对盐基性染料有亲合力，因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。（2） 对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。（3） 遇醋酸发生沉淀，胃粘蛋白则除外。（4） 溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种：1、P．A．S染色法：操作方法同前，结果；中性粘液性物质，某些酸性粘液物质呈红色，核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法：该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法：（1）切片常规脱蜡入水。（2）3%醋酸液洗2分钟，入1%阿利新兰醋酸液（PH2.5）10-20分钟。（3）蒸馏水洗。（4）按P.A.S染色程序。（5）苏木素淡染2-3分钟，水洗。（6）常规脱水、封片。湖南哪家提供糖原染色试剂盒销售厂家

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