珠海正规外泌体提取试剂生产厂家

外泌体(Exosome)是从体液(尿液、血液、唾液、腹水、胸腹水等)和细胞液中快速提取的，其是活细胞分泌到胞外的囊泡样小体，含有多种蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA)，在体内细胞间物质和信号转导中起到重要作用。由于这些核酸被囊膜包裹而被保护，稳定性高，不易降解，是一种用于一些病症诊断和预后监测的非常理想的新型生物标记物一些疾病的早期诊断、用药监控、预后判断。近年来，随着人们对外泌体的研究和认识加深，外泌体检测作为一种新型的液体活检热点技术已被许多临床科研机构普遍地应用于一些病症和疾病的无创诊断、治病和监测；如何高效地提取外泌体是实现这项新兴液体活检技术临床常规化应用的关键。活细胞分泌到胞外的囊泡样小体，含有多种蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA)。珠海正规外泌体提取试剂生产厂家

外泌体（Exosomes）是细胞分泌到胞外的一种囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小为30-150nm，具有双层膜结构和茶托状形态，含有丰富的内含物（包括核酸、蛋白和脂质等），参与细胞间的分子传递。外泌体普遍存在于细胞培养上清以及各种体液中，包括血液、唾液、尿液、**、乳汁等，同时也存在于组织样本中，如脑组织、肌肉组织、脂肪组织等。脑组织分离方法简述：将脑组织剪成薄片，放入离心管中加上消化液进行消化，经水浴、反复轻轻上下颠倒，再用移液间断缓慢吹吸至消化结束。随后加入培养基于消化液中，混匀，置于冰上。再进行一系列的差速超速离心过程，包括除杂、滤膜过滤、超离等。较后用PBS重悬外泌体，用重悬后的外泌体进行下面的透射电镜（TEM）、纳米粒径追踪分子（NTA）和markerWB鉴定。正规外泌体提取试剂静置10～15分钟，留取沉淀物备用。

研究中研究人员发现，胃病细胞周围富含TAM。TAM以M2极化表型为特征，并促进胃病细胞在体外和体内的迁移。此外，研究人员发现M2衍生的外泌体决定了TAMs介导的迁移活动。通过使用质谱方法，研究人员确定载脂蛋白E（ApoE）是M2巨噬细胞衍生的外泌体中高度特异性和有效的蛋白质。ApoE是一种M2特异性且高度丰富的来源于M2外泌体的蛋白质，是决定胃病细胞迁移潜力的主要驱动因素。然而，来自ApoE-/-的小鼠M2巨噬细胞的外泌体在体外和体内对胃病细胞的迁移没有显着影响。在机制上，M2巨噬细胞衍生的外泌体介导ApoE启动的PI3K-Akt信号通路，并在TAM和受体胃病细胞之间进行细胞间转移，促进细胞骨架的迁移。总的来说，该研究发现外泌体介导的功能性ApoE蛋白从TAM转移到一些病症细胞，促进了胃病细胞的迁移。

外泌体是细胞间进行物质运输和信息交流的重要工具，可以通过调节免疫功能促进一些病症的增殖，血管新生和一些病症转移。与细菌传染，帮助细菌逃避免疫关系很大，并与心血管疾病，老年痴呆等疾病具有密切关系。外泌体可通过流式、WB（检测指标有CD9,CD63,CD81）、电镜观察、NTA粒径追踪等手段检测，普遍应用于药物载体、疾病诊断marker、精细医疗、一些病症治病等方面研究。由于外泌体直径小，样本含量低，提取十分困难。已有的外泌体分离方式有密度梯度离心、超滤离心法、免疫磁珠抗体捕获、商用试剂盒等。但到目前为止，仍没有一种提取方法能同时保证外泌体的含量、纯度以及生物活性。聚乙二醇（PEG）可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀。

人尿液来源细胞的外泌体的获取方法，是首先分离培养人尿液来源细胞并收集培养基，将人尿液来源细胞的培养基通过0.22微米滤膜过滤，以去除大的细胞残片以及其它杂质；然后离心除去细胞器，留取上清；再使用可截留100KD分子量的膜，通过离心截留上清中的外泌体，截留完成后，使用PBS对膜进行洗脱即得到外泌体浓缩液；专利申请利用分离培养人尿液来源细胞并收集培养基来进行体外培养，直接把外泌体从尿液中沉降下来，无须分离培养人尿液来源细胞并收集培养基。获得的外泌体纯度较高，但步骤繁琐，耗时。深圳外泌体提取试剂推荐厂家

所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。珠海正规外泌体提取试剂生产厂家

外泌体来源及内含物。几乎所有类型的细胞都可以分泌外泌体，同时外泌体也普遍存在于体液中，包括血液、眼泪、尿液、唾液、乳汁、腹水等。目前研究发现外泌体中富含核酸（microRNA、lncRNA、circRNA、mRNA、tRNA等）、蛋白、胆固醇等。外泌体的表面marker主要有CD63、CD81、CD9、TSG101、HSP27等。外泌体鉴定。目前对于外泌体的鉴定主要有四种方法：透射电子显微镜（TEM）、Nanosight、WesternBlot、流式细胞术。近年来，随着外泌体研究的不断深入，它的应用已经涉及一些病症治病领域、医学基础和免疫领域、寄生虫领域；临床研究上已涉及心血管系统、内分泌代谢系统等。珠海正规外泌体提取试剂生产厂家

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