染色的原理和临床意义:原理:粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶(peroxidase,POX)能将底物过氧化氢分解,产生新生态氧,它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化,显棕色四甲基苯醌二胺,再加入亚硝基铁**与联苯胺蓝结合,可形成稳定的蓝色颗粒,定位于细胞浆内酶所在的部位。临床意义: 临床上主要用于急性白血病类型的鉴别:急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞POX染色均呈阴性反应;急性粒细胞白血病 原粒细胞POX染色呈局灶分布的阳性反应;急性早幼粒细胞白血病 颗粒增多的早幼粒细胞POX染色呈强阳性反应;急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。推荐用于骨和软骨的染色。上海品质好的糖原染色试剂盒厂家现货
糖原染色:1、概况PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。2、原理PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。3、应用随着医学实验技术的发展,糖原染色应用的范围更加普遍,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ,糖原累积病诊断和研究 ,糖尿病的诊断和研究 ,用于某些的诊断等。天津如何使用糖原染色试剂盒厂家批发价如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病。
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:Schiff氏染液的配制是关键,尤其是偏重亚硫酸钠的质量,打开应是粉剂,且带有硫的气味,若成团或没有气味,则不能用,配制时使用的容器、药勺、称药天平与称药纸等必须洁净、无污染。新配制好的Schiff剂为无色透明液体[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用时取一份恢复到室温即可。沈洪武等通过对比染色发现,冷冻保存1年的Schiff液的染色结果与新鲜配制的染色结果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之间),环境温度以不高于20℃为宜,室温高时氧化时间适当缩短;如果染色时环境温度较高且高碘酸作用时间长,可使某些物质成分发生非特异反应,使染色结果出现假阳性。因此,室温较高时可适当缩短反应时间。
纤维染色:弹力纤维是结缔组织发生形成较晚的一种纤维,在创伤修复中一般在4—5周才有较明显的弹力纤维形成。弹力纤维艰固、较小而弹性较大,容易伸展,在结缔组织起弹性作用。弹力纤维由弹性蛋白组成,新鲜时呈黄色又称黄纤维。弹力纤维纤维分枝连成网,折光性强,含量多时在HE染片上呈折光性强的粉红色,量少的不显色。故量多时与胶原纤维不易区别,量少则不能观察。弹力纤维染色主要用于观察弹力纤维有无增生、肿胀、断裂、破碎及萎缩或缺如等病变。取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蜡切片脱蜡至水。(2) 0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液(过碘酸再结晶应重新配制使用)。(3)蒸馏水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分钟。(Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用)(5)流水冲洗10分钟。(6)苏木素浸染细胞核2-3分钟。(7)脱水、透明、封盖。结果:糖原呈红色,细胞核呈蓝色。试剂 配制:(1)0. 5%过碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏 试剂 。碱性品红 1g蒸馏 水 200ml1N盐酸(98.3ml比重1.16盐酸,加入 蒸馏 水成1000ml) 20ml偏重亚硫酸钠或钾 1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水,搅拌加热沸腾,待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处,两天后溶液变桔黄色或草黄色,然后加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色,染色效果较差。急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。上海品质好的糖原染色试剂盒厂家现货
主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。上海品质好的糖原染色试剂盒厂家现货
糖原pas染色液配制及使用方法:1、常规固定,常采用 10%的福尔马林,常规脱水包埋。 2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。 3、自来水冲洗 2~3min,再用蒸馏水浸洗 2 次。 4、入过碘酸溶液,室温放置,一般不宜超过 10min。 5、自来水冲洗 1 次,再用蒸馏水浸洗 2 次。 6、入 Schiff Reagent,置于室温阴暗处浸染。 7、自来水冲洗 10min。 8、入苏木素染色液,染细胞核。 9、酸性乙醇分化液分化。 _x000c_10、自来水冲洗 10~15min,更换蒸馏水清洗,使其返蓝。 11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。上海品质好的糖原染色试剂盒厂家现货
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粘液染色法:粘液一般有以下几点特性:(1)对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。(2)对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。(3)遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。(4)溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种:1、P.A.S染色法:操作方法同前,结果;中性粘液性物质,某些酸性粘液物质呈红色,核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法:该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法:(1)切片常规脱蜡入水。(2)3%醋酸液洗2分钟,入1%阿利新兰醋酸液(PH2.5)10-20分钟。(3)蒸馏水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)苏木素淡染2-3分钟,水洗...