糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒简介糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年*先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于过氧化,这是很关键的步骤。本糖原PAS染色试剂盒的特点: 采用Leagene特有配方技术,较大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操作简捷,*需1h左右。本试剂盒常用于常规组织切片染色,对于细胞、极其薄的切片。山东糖原染色试剂盒服务电话
特殊染色方法选择应遵循:染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法;突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质,甲基紫染色法虽然流程较为简单,但结果不易保存,阳性对比度相对不突出;刚果红染色法阳性结果明显,长时间保存不褪色,流程简便,更是实用的方法。如显示弹性纤维,地衣红染色染液虽配制较方便,但结果对比度相对欠佳,与其他几个染色法相比,多不选择使用。湖南如何使用糖原染色试剂盒量大从优为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:PAS染色时需于暗处加盖反应,染色时间10~20min(染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度,SO浓度高,染色时间适当缩短;环境温度高,染色时间也应适当缩短,反之则需适当延长反应时间)。染色过程中不能接触伊红,以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时,较好作消化对照,即取两张连续切片,其中一张脱蜡至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如经消化处理的切片染色阴性,不经消化处理的切片染色阳性,即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠(钾)溶液配置后,不能保存,因此,必须现配现用,用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。
PAS染色试剂配制及染色方法:1.材料与方1.1 实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例,均来自我室实验材料。1.2 主要试剂1.2.1 AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液,其配方:无水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3 过碘酸溶液 0.5g过碘酸(HIO)溶于100mL蒸馏水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:过碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸钠0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 无色品红液(Schiff氏液) 在三角烧内加入蒸馏水500mL,煮沸后,在保持微沸的情况下,加入碱性品红2.5g,并不断摇动约5min(勿使之沸腾),使碱性品红彻底溶解(溶解液为深红色)。冷却到50℃时,过滤,加入1N盐酸50mL,再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g,塞住瓶口,摇动容器以充分混合(此时颜色明显变淡),然后避光放置或冰箱内24h。切取材料时刀要锐利,避免因挤压细胞使其受到损伤。
染色的原理和临床意义:在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理,同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间,较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞,因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒-单核细胞白血病 该染色法在急性粒-单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞,甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应,因此酯酶双染色反应在急性粒-单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。天津口碑好的糖原染色试剂盒生产厂家
应该尽可能割取生活着的组织块,并随即投入固定液。山东糖原染色试剂盒服务电话
糖原PAS染色试剂盒用途:区分黏蛋白和多糖备注:普通PAS染色法无法准确鉴别黏液物质(如黏液物质或多糖),本试剂盒在PAS染色之前有糖原消化步骤,需要做阳性对照糖原PAS染色试剂盒的相关产品:素染色液100mlHE染色属于常规切片HE染色的明矾苏木素的一种,尤其适用于教学和科研上的核染色质染色,也可用于黏蛋白染色(如软骨的黏多糖),推荐用于骨和软骨的染色。经酸处理过的切片染色以及核的染色、骨和软骨的染色中推荐采用该试剂。冷冻切片染色效果不佳,成熟时间2个月,染色时间一般15-20分钟。 素染色液500mlHE染色属于常规切片HE染色的明矾苏木素的一种,尤其适用于教学和科研上的核染色质染色,也可用于黏蛋白染色(如软骨的黏多糖),推荐用于骨和软骨的染色。经酸处理过的切片染色以及核的染色、骨和软骨的染色推荐采用该试剂。冷冻切片染色效果不佳,成熟时间2个月,染色时间一般15-20分钟。山东糖原染色试剂盒服务电话
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粘液染色法:粘液一般有以下几点特性:(1)对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。(2)对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。(3)遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。(4)溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种:1、P.A.S染色法:操作方法同前,结果;中性粘液性物质,某些酸性粘液物质呈红色,核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法:该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法:(1)切片常规脱蜡入水。(2)3%醋酸液洗2分钟,入1%阿利新兰醋酸液(PH2.5)10-20分钟。(3)蒸馏水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)苏木素淡染2-3分钟,水洗...