鼠尾胶原的提取步骤:配置含4.5mmol/lNacl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-Hcl溶液(用盐酸将其PH值调至7.5) 取鼠尾,去皮,由尖部向前分段抽取肌腱,置于生理盐水中,称重,再倒掉生理盐水,酒精中浸泡20分钟 离心胶原溶液,(1200rpm10min) 取上清 每600上述粗提液加100ml0.14mol/l NaOH溶液离心,(8000rpm 5min) 其上清,留絮状沉 10.将絮状沉淀物置于三蒸水中,用0.1mol/l(1000:6) 醋酸溶解絮状沉淀物,加入消毒过的搅拌 子,冷房搅拌数天,得絮状胶原。 注意所有和胶原有关的操作都在冰上进行\ Rat tail collagen type 配置含4.5mmol/L NaCl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-HCl 溶液(用盐酸将其pH值调至7.5); 于-20冰箱中取出鼠尾,浸泡75%或70%酒精,解冻; 在一小培养皿中放置少量生理盐水,置于电子秤上,调零; 取鼠尾,去皮,由尖部向前分段抽取肌腱,置于生理盐水中。胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同。长沙鼠尾胶原单价

鼠尾胶原制备详细步骤: 1、取大鼠尾巴洗净,75%酒精浸泡 5 分钟; 2.将尾巴剪开、去掉皮毛,并剪成小段,抽出银色的尾键 3、将尾腱剪断置于平皿中,PBS 浸泡; 4、将所有的尾键放于 Tris-HCl 中,4 度过夜。 0.05mol/L Tris-bas 的 Tris-HCl 的配制方法。 称量 6gTris 置于 1L 烧杯中,加入约 800ml 去离子水,充分搅拌溶解,浓盐酸调节 PH,高压灭菌。 5、吸去 Tris-HCl,将尾腱称重(0.5-1 克); 6、将尾腱置于平皿内剪碎,转移至三角烧瓶中; 7、按每克尾腱 50ml 的比例,加入 0.1%醋酸溶液; 8、摇晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期; 9、离心,4 度 4000 转/分,30 分钟; 10、吸取上清,过 300 目滤器。 11、每 600ml 上述粗提液中加入 100ml 0.14 mol/LNaOH,8000 转 5min 离心,弃上清,留絮状沉淀。 12、将絮状沉淀物置于三蒸水中,用 0.1mol/L(1000:6)醋酸溶解沉淀物。徐州鼠尾胶原单价制备鼠尾胶原:将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡。

鼠尾胶原:含细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。加入760μL的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。
生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,采用酸法与酶法相结合的工艺,保持恒低温无菌的环境,利用同样浓度的盐溶液进行两次盐析与离心,简化了提纯步骤。所用酸为低浓度酸溶液,并采用柠檬酸替代醋酸进行提纯。从提取原料到样品生成过程中,进行多次真空冷冻干燥,并经进一步处理获得含水率在3%以下的胶原蛋白微粉;较后由灭菌、无菌包装,成品胶原蛋白粉末的纯度在98%以上。本发明获得的胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了产率和生物相容性,降低了成本,适用于生物医用材料,所得到的胶原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋结构。期间不断搅拌,防止冻结成块,得到胶原溶胀液。

一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,采用酸法与酶法相结合的工艺,保持恒低温无菌的环境,利用同样浓度的盐溶液进行两次盐析与离心,简化了提纯步骤。所用酸为低浓度酸溶液,并采用柠檬酸替代醋酸进行提纯。从提取原料到样品生成过程中,进行多次真空冷冻干燥,并经进一步处理获得含水率在3%以下的胶原蛋白微粉;较后由灭菌、无菌包装,成品胶原蛋白粉末的纯度在98%以上。本发明获得的胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了产率和生物相容性,降低了成本,适用于生物医用材料。制备鼠尾胶原:手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的,折断尾骨后拉出尾腱。正规鼠尾胶原哪家好
制备鼠尾胶原:将尾腱置于平皿内剪碎,转移至三角烧瓶中。长沙鼠尾胶原单价
鼠尾胶原实验应用:鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用。目的:建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果:自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞,细胞角蛋白18表达阳性,免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论:成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法,并且制作简便,成本低廉。长沙鼠尾胶原单价
I型鼠尾胶原是借鉴NavneetaRajan,JasonHabermehl法,经过乙酸抽提、离心、灭菌、透析等步骤制备得到的高纯度、高活性胶原蛋白,属于医药级别产品,可用于包被细胞培养器皿(单分子层包被),适合多种类型细胞的贴壁如肝脏细胞、神经节细胞、胚胎细胞、肌细胞、肺细胞、神经鞘细胞等。I型胶原蛋白包被细胞培养板,规格为6/24孔板,表面经I型胶原蛋白包被,可以很好的降低蛋白质的吸附。使用这种细胞培养板培养细胞,可以获得良好的细胞贴壁率,细胞增殖速度快,形态均一,细胞培养成功率高。成纤维细胞胶原凝胶复合物有着良好的生物学特性。杭州济南鼠尾胶原鼠尾Ⅰ型胶原:材料与方法:1.主要材料、试剂和仪...