鼠尾胶原包被培养板:胎干细胞在体外可诱导分化为血管内皮细胞,进而形成血管,因而成为血管组织工程理想的种子细胞来源之一。目的:探讨建立定向诱导人胚胎干细胞向血管内皮细胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上培养人胚胎干细胞H1,将H1细胞团块转移到鼠尾胶原包被的培养板,贴壁24-48h后,培养基换为含不同辅助因子和内皮细胞生长添加剂的EGM-2内皮细胞培养基。结果与结论:①在EGM-2内皮细胞培养基诱导下,细胞逐步表达内皮细胞特异性标记基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化细胞表达内皮细胞特异性标记VE-cadherin、CD31。③分化细胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。说明将人胚胎干细胞接种在鼠尾胶原包被培养板上,通过EGM-2内皮培养体系诱导,可直接分化为功能性血管内皮细胞。为研究胞外基质对诱导胚胎干细胞血管内皮细胞分化的作用以及相关信号分子机制打下了基础。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。制备鼠尾胶原:摇晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期。厦门正规鼠尾胶原产品介绍
具体实施方式实施例1 止血材料的制备1、选择能与鼠尾胶原蛋白联合发挥作用的聚乙烯醇、壳聚糖作为辅料。各个材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为 0.2% 0.2%。余量为水。2、将混合材料用无菌水溶解后浇入培养小板,-40°C预冻池,再转入_80°C超低温冰箱急冻4h,再转入真空冷冻干燥机中将复合材料在-4°C下冷冻干燥10h,即可以得到复合型冻干止血材料。Co60辐射灭菌,干燥保存。冻干的材料可直接用于各种伤口的止血。实施例2 止血材料的制备1、选择能与鼠尾胶原蛋白联合发挥作用的聚乙烯醇、壳聚糖作为辅料。各个材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为5% 2% 1%,余量为水。2、将混合材料用无菌水溶解后浇入培养板,-20°C预冻,再转入_80°C超低温冰箱急冻8h,再转入真空冷冻干燥机中将复合材料在-4°C下冷冻干燥30h,即可以得到复合型冻干止血材料。Co60辐射灭菌,干燥保存。金华天津鼠尾胶原利用鼠尾胶原可以构建类似物,该模型是进行皮肤部位型培养和制作复合皮的关键与基础。
鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对角膜上皮细胞增殖的影响:目的探讨鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对体外培养角膜上皮细胞增殖的影响。方法采用鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶作为基质包被培养器皿,以普通培养器皿作对照,培养角膜上皮细胞,观察细胞形态,进行细胞计数并描绘细胞生长曲线,比较不同基质对角膜上皮细胞的增殖作用。结果使用基质包被的培养器皿培养角膜上皮细胞,细胞增殖速度较普通组快,细胞形态、活力和长势比普通组更佳,促进增殖的能力为鼠尾胶原多聚赖氨酸明胶。结论鼠尾胶原可促进角膜上皮细胞增殖,且增殖效果优于多聚赖氨酸和明胶。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。
一种基于鼠尾胶原蛋白:1.根据权利要求1所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,其特征在于冻干止血材料中,各材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为5% 2% 1%,余量的水。2.根据权利要求1或2所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,其特征在于鼠尾胶原蛋白来源于各品系SFP级大鼠鼠尾。3.根据权利要求1所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,其特征在于剂型为创可贴。4.根据权利要求1所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,其特征在于剂型为喷雾剂。胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同,每一条亚基形成一股左手旋转的螺旋。
实验应用:鼠尾胶原为底物的人鼻腔纤毛上皮细胞培养模式的建立目的建立以鼠尾胶原为贴附底物的人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式,为人鼻腔黏液纤毛运输系统的研究提供科学有效的方法.方法制备鼠尾胶原并铺片,以鼠尾胶原为贴附底物组织块培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞,培养7天时进行HE染色及扫描电镜和透射电镜观察细胞形态和结构,应用高速摄像技术测量纤毛摆动频率.结果鼠尾胶原要平坦均匀,平均厚度约为1mm;HE染色可见上皮细胞呈单层向周围爬开;扫描电镜下见纤毛上皮细胞呈不规则多角形,纤毛周围可见微绒毛;透射电镜下可见纤毛上皮细胞间为紧密连接;同一细胞任意两点纤毛摆动频率是相同的;同一来源体外培养的钩突和下鼻甲的纤毛摆动频率是相同的.结论以鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立,为今后研究鼻内用药对纤毛清理功能的影响提供了良好的方法和途径。使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液对初步处理的鼠尾腱进行酶解。珠海鼠尾胶原厂家直销
制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。厦门正规鼠尾胶原产品介绍
以鼠尾胶原为支架的类似物的建立:探寻建立类似物的培养方法。方法:原代培养人皮肤成纤维细胞,制备鼠尾胶原,将鼠尾胶原溶液、浓缩培养基、NaOH溶液和以血清重悬的成纤维细胞溶液在适当的比例下混合后形成凝胶构建类似物。结果:形成的类似物中成纤维细胞生长状态良好,并且组织块具有一定弹性和抗拉伸能力。结论:①利用鼠尾胶原可以构建类似物,该模型是进行皮肤部位型培养和制作复合皮的关键与基础;②成纤维细胞胶原凝胶复合物有着良好的生物学特性,它是研究成纤维细胞与细胞外基质之间以及细胞之间相互作用的良好模型。厦门正规鼠尾胶原产品介绍
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。B.含细胞的三维胶原的制备(以配制200ul鼠尾胶原蛋白(5mg/ml)加到(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul10PBS10培养液,混匀(混匀后pH左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放20分钟待胶凝固后,加入适...