通用细胞冻存液(无血清)的简介:随着实验室细胞培养的发展,除了原代培养之外,人工开发出来的细胞系的保存越来越重要。细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得稀释,稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释以后,该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。通用细胞冻存液(无血清)主要由培养基、DMSO 等组成,不含血清,是一种经典的无菌冻存液。用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。无血清冻存液特性:不含动物成分。武汉正规无血清细胞冻存液报价
细胞冻存的基本原理:细胞代谢过程需要各种蛋白酶的参与,而这些蛋白酶在环境温度低于-70℃时会集体不工作,低温贮藏的目的是通过较低温使细胞代谢活动近乎停止。细胞因此进入休眠状态,使细胞“不会老”,所以可以长期保存。因为冻融过程对所有细胞和组织都是有一定伤害的,因此,需要开发出有效的技术来防止细胞死亡和损伤。低温保护剂可保护细胞不受细胞内冰冻影响,目前多采用DMSO,甘油,乙二醇和丙二醇等渗透型低温保护剂。它们的作用机制包括:自由进入细胞,取代水,使冰点下降,充当盐的二次溶剂,提高细胞膜对水的通透性。珠海正规无血清细胞冻存液生产厂家将分装好的细胞冻存管,直接置于-80 度冰箱过夜保存。
无血清细胞冻存液的用途:用途:1.无血清细胞冻存液用于造血干细胞、间充质干细胞等干细胞的储存。2.无血清细胞冻存液用于T淋巴细胞、NK细胞等免疫细胞的存储。3.无血清细胞冻存液用于其他类型哺乳动物细胞的储存。无血清细胞冻存液产品性能:1.不含牛血清,无动物源组分。传统的冻存液,一般由胎牛血清、DMSO等组分组成。胎牛血清取自牛,因此,难以应用到需要避免接触动物源的应用领域。用包括人白蛋白等蛋白组分替代血清的用途,无动物源组分。2.2-8℃即可稳定保存,无需冷冻,即取即用。为了避免反复冻融,传统的细胞冻存液,需要分装成小管后置于-20℃环境下保存。无血清细胞冻存液,2-8℃保存即可,无需再进行分装。
细胞冻存是细胞培养技术中细胞进行保种并长期保存的常用方法,其中细胞冻存液,作为细胞冻存时必须使用的一种溶液,不光光是说只是用来进行细胞的保存,在细胞的购买、寄赠、交换和运送过程中也起着关键作用,因此选择一款好的细胞冻存液就尤为重要。如果不加任何条件直接冻存细胞,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、pH值改变、蛋白变性等,从而引起细胞死亡。而细胞冻存液就相当于细胞的保护剂,在冻存细胞时将细胞悬浮于冻存液中,可使冰点降低,提高细胞膜对水的通透性,在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞,可以防止或减少冷冻冰晶对细胞的损伤作用。这样就使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,在需要时直接复苏就可恢复细胞活性。含多种保护剂成分,一些保护剂,易于穿透细胞。
无血清细胞冻存液复苏细胞实验步骤:1.从冰箱里取出细胞冷冻保存管,立即放入37℃振动水浴槽中快速解冻。2.待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即加入1 ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合,再将细胞混合液从冻存管中移入含有9 ml该细胞培养基的试管中,混合均匀。3.离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min),移去上清液。4.清洗细胞,充分洗净残留冻存液。5.加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后,将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。无血清快速细胞冻存液:能够满足大部分体外培养细胞的冻存需求。太原无血清细胞冻存液价格
根据密度调整细胞冻存 液用量。武汉正规无血清细胞冻存液报价
无血清细胞冻存液的使用方法及注意事项:无血清细胞冻存液:含多种保护剂成分,一些保护剂,易于穿透细胞,避免细胞内部水分子形成冰晶损伤细胞,同时另一些保护剂不能穿透细胞,但可以在冰晶形成之前,优先结合细胞外的水分子,降低细胞外溶 液的电解质浓度,减少阳离子进入细胞的数量,我公司无血清细胞冻存 液,为多种保护剂组合,在细胞内外进行双重保护,较大提高了细胞复 苏存活率。 【产品用途】 1.用于免疫细胞及干细胞的存储。 2.细胞保藏中心,用于细胞株的长期保存。 3.科研高校,细胞株冻存。 4.医院样本库细胞样本保存。 【使用方法】 1、细胞冻存前准备 (1)要求冻存的细胞在对数生长期,且活率大于90%。 (2)计算细胞密度,一般要求密度在1-3x10 cells/mL,不同细胞系 请参照附表。 2、细胞冻存过程 (1)将要冻存的细胞悬液,进行细胞计数,计数后离心,800 3min即可。 度保存的无血清冻存液缓慢加入离心后的细胞沉淀中,根据密度调整细胞冻存 液用量。 (3)反复吹吸混匀后,分装于细胞冻存管中,每管500ul-1000ul, (建议500ul/管)。武汉正规无血清细胞冻存液报价
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无血清细胞冻存液细胞冻存步骤:1.常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。2.确认所需冻存的细胞数量。3.将所需冻存细胞收集于离心管中,1000rpm,5min离心,收集细胞沉淀,并弃掉上清液。4.加入适量的冻存液于离心管中,加入量按照细胞保存浓度为5X105至1X107/ml密度,轻柔的混匀细胞,获取细胞混合液。5.将获取的细胞混合液按照1~1.5ml/管,分装于冻存管中。6.将冻存管直接放入-80℃保存,可长期保存。无血清细胞冻存液,通用于各种动物细胞系及tumour细胞系。特别的配方能有效提高细胞存活率和复苏能力。不含血清,无病毒、霉菌和支原体等微生物污染,确保冻存细胞安全。非常...