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无血清快速细胞冻存液细胞冷冻保存方法：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1.按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2.按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。3.取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去离心管中的上清液。4.加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。5.将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。6.直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。7.若研究者需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-80℃冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。无血清冻存液使用方法：将加有冻存液的细胞悬液分装至冻存管中。郑州无血清细胞冻存液厂家批发价

细胞冻存：取出冻存管，注明细胞名称，代数，日期。离心后，以无菌吸管吸弃上清，不要吸到底部的细胞沉淀。将细胞沉淀与冻存液充分混匀，根据计数结果，将细胞总数调节成细胞数量为5-10*105/ml为宜。将细胞冻存悬液分装进细胞冻存管中，一般2ml的冻存管中装入1-1.5ml冻存液为宜。严密封口后，使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1℃。或者，将装有细胞的冻存管放入异丙的醇冻存盒中，然后将冻存盒置于–80℃条件下过夜。若无冻存盒及其他冻存装置，可以先将冻存管置于4℃30min，再-20℃冻存1h直至完全冷冻，再转移至-80℃冰箱过夜。第二天将已经冷冻的细胞转移到液氮容器中，置于液氮上方的气相空间中储存。昆明正规无血清细胞冻存液单价无血清细胞冻存液：降低细胞外溶液的电解质浓度，减少阳离子进入细胞的数量。

无血清细胞冻存液的使用方法及注意事项：1.将分装好的细胞冻存管，直接置于-80 度冰箱过夜保存，次日投入液氮中保存即可 备注：1、冻存过程中，第2 步在冰袋附近操作时，低温避免保护剂对细胞造成损伤。 2、细胞冻存管一定要保证完全密封，否则在复苏过程中有可能会炸 （1）提前开启水浴锅，温度调节到37（2）将冻存的细胞冷冻管从液氮中取出，迅速置于水浴锅中融化，尽量1min 融化，时间越短，对细胞影响越小。（3）将融化后的含细胞的冷冻保存液迅速析出置于新鲜培养基中充 分混匀，（如细胞冷冻保存液为500ul，则加入到5ml 新鲜培养基中， 如细胞冷冻保存液位1ml，则加入10ml 新鲜培养基中。）（4）混匀后立即离心，800 转，3min 即可离心结束后弃上清，加入预温的新鲜培养液。（5）混匀后分瓶置于二氧化碳培养箱中培养。（二氧化碳浓度根据培 养基要求决定，通常为5%【注意事项】细胞系 冻存密度 备注 正常人成纤维细胞 1～310 cells/ml杂交瘤细胞 1～310 cells/ml某些hybridoma 会因冷冻浓度 太高而在解冻24小时后死去。

无血清细胞冻存液，通用于各种动物细胞株。特别配方具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白，能减少各类细菌、霉菌和支原体等的污染，确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存，也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。高安全性，完全使用医药品等级原料进行生产，不含动物成分，细菌、霉菌和支原体等污染可能性低，各批产品之间有更高的产品质量一致性。2.细胞存活率高，无批次差异。3.完全冻存液配方，可直接使用，方便简捷，可直接存放于-80℃冰箱冻存，无需经过费时的程序降温过程（省时、省力、省钱）。无血清细胞，无血清干细胞及MSC冻存液储存于4℃以下。质量保障期从产品的生产日期起，为期3年。3个月以上没有使用冻存液计划时，尽可能冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低，推荐将100 ml产品分装小瓶后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。无血清冻存液特性：不含动物成分。

细胞冻存秘籍：1.在倒置相差显微镜上每隔几分钟检查酶处理的进展情况。一旦细胞变圆，轻轻敲击细胞瓶使其脱离塑料表面。加入5 mL含血清的生长培养基灭活胰酶。可能需要剧烈的移液操作来使培养容器底部的剩余细胞脱落，或将细胞团块分解成单细胞悬浮液。胰酶的去除或失活对于冷冻细胞至关重要。如果游离试剂不能直接灭活，可以通过下一步的离心去除。2.用15ml离心管收集细胞。取出样本进行细胞计数，剩余的细胞悬液以约100×g离心5分钟以获得细胞沉淀。离心时，用细胞计数板对细胞进行计数。使用台盼蓝染液检查细胞的活性。无血清细胞冻存液的优势：因不含血清，批次间差异小。徐州正规无血清细胞冻存液厂家现货

将要冻存的细胞悬液，进行细胞计数，计数后离心。郑州无血清细胞冻存液厂家批发价

细胞冻存，我们应该注意哪些事项：1、液氮内的细胞冻存较长时间不要超过半年，冻存在液氮中的细胞应一段时间内进行更替。一个细胞系在培养一个月后，可复苏一管新的细胞确保其质量没有发生太大变化，传代几次后，再冻存留种。2、细胞复苏时，为保证获得较高的存活率和接种率，应尽可能的快速完成复苏，以避免在升温过程中细胞内部晶体的产生。书面介绍的复苏温度是37℃-42℃，但是本人在实际操作中发现40℃环境下复苏效果较好。3.复苏时使用的培养基和冻存时使用的培养基中的血清尽量保证同一批次。郑州无血清细胞冻存液厂家批发价

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