鼠尾胶原:1实验制备:实验设备及材料:大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。 实验内容:1、制备鼠尾胶原(两个同学一组操作)。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。实验步骤:制备鼠尾胶原:1、取大鼠尾巴洗净,75%酒精浸泡5分钟;2、手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的较高,折断尾骨后拉出尾腱;3、将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡;4、重复步骤2、3,直至尾腱量够用;5、吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克)。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。郑州正规鼠尾胶原厂家批发价
服用胶原蛋白的注意事项:1、大分子胶原蛋白进入人体后需要降解为小分子肽、氨基酸才能被人体吸收,真正有效吸收的成分并不多。2、这些食物多半脂肪含量较高,不适合经常食用。高热量、高脂肪,尤其是油炸食物都容易产生自由基,加速老化。如果能少吃这一类食物,就等于减少了身体被自由基伤害的机会及皮肤出现黑斑、皱纹等的风险。3、孕妇是不能服用胶原蛋白产品,因胶原蛋白是19种氨基酸组成的,其中有几种是不能被胎儿吸收的,容易引起第二特征过早的发育和成熟,不利于出生后的婴儿成长和发育。昆明正规鼠尾胶原平均价格制备鼠尾胶原:吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克)。
鼠尾胶原实验应用:鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用。目的:建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果:自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞,细胞角蛋白18表达阳性,免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论:成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法,并且制作简便,成本低廉。
鼠尾Ⅰ型胶原:组装液的配置:1.50 mmol/L甘氨酸+200 mmol/L氯化钾 100 mL,用1 mol/L 氢氧化钠调节酸碱度至9.2。2.胶原纤维的重构吸取胶原10μL至小培养皿中,倒入0.5 mL自组装液,室温放置20 min。予自组装液自组装24 h。吸取0.05%戊二醛2 mL至小培养皿中,将自组装24 h的胶原浸泡在戊二醛中。然后将胶原经去离子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后进行TEM观察。3.生物矿化形成仿生骨材料静滴配置钙磷矿化液将25mL钙液(10 mmol/L 二水氯化钙+150 mmol/L氯化钠+50 mmol/L三羟甲基氨基甲烷+0.02%三氮化钠)倒入烧杯中,滴入聚丙烯(PAA)至浓度350 μg/mL;滴加1 mol/L的氯化氢,调节酸碱度至7.4,然后缓慢滴入25 mL磷液(6 mmol/L磷酸氢二钠),约16滴/min。鼠尾胶原醋酸溶解:在无菌条件下转移上层的胶原溶液。
鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对角膜上皮细胞增殖的影响:目的探讨鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对体外培养角膜上皮细胞增殖的影响。方法采用鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶作为基质包被培养器皿,以普通培养器皿作对照,培养角膜上皮细胞,观察细胞形态,进行细胞计数并描绘细胞生长曲线,比较不同基质对角膜上皮细胞的增殖作用。结果使用基质包被的培养器皿培养角膜上皮细胞,细胞增殖速度较普通组快,细胞形态、活力和长势比普通组更佳,促进增殖的能力为鼠尾胶原多聚赖氨酸明胶。结论鼠尾胶原可促进角膜上皮细胞增殖,且增殖效果优于多聚赖氨酸和明胶。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验长时程的记录。金华正规鼠尾胶原平均价格
整个操作请于冰上进行,因室温下鼠尾胶原I可迅速成胶。郑州正规鼠尾胶原厂家批发价
具体实施方式实施例1 止血材料的制备1、选择能与鼠尾胶原蛋白联合发挥作用的聚乙烯醇、壳聚糖作为辅料。各个材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为 0.2% 0.2%。余量为水。2、将混合材料用无菌水溶解后浇入培养小板,-40°C预冻池,再转入_80°C超低温冰箱急冻4h,再转入真空冷冻干燥机中将复合材料在-4°C下冷冻干燥10h,即可以得到复合型冻干止血材料。Co60辐射灭菌,干燥保存。冻干的材料可直接用于各种伤口的止血。实施例2 止血材料的制备1、选择能与鼠尾胶原蛋白联合发挥作用的聚乙烯醇、壳聚糖作为辅料。各个材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为5% 2% 1%,余量为水。2、将混合材料用无菌水溶解后浇入培养板,-20°C预冻,再转入_80°C超低温冰箱急冻8h,再转入真空冷冻干燥机中将复合材料在-4°C下冷冻干燥30h,即可以得到复合型冻干止血材料。Co60辐射灭菌,干燥保存。郑州正规鼠尾胶原厂家批发价
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鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。B.含细胞的三维胶原的制备(以配制200ul鼠尾胶原蛋白(5mg/ml)加到(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul10PBS10培养液,混匀(混匀后pH左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放20分钟待胶凝固后,加入适...