需要定期检测支原体污染的客户主要包括以下几类: 1. 生物医药企业:生产涉及细胞培养的生物制品的公司,包括疫苗、生物药物、基因产品等。 2. 细胞公司:进行细胞产品的研发和生产的企业,需要确保所用细胞的安全性和有效性。 3. 科研机构:从事细胞生物学、分子生物学、遗传学等研究的学术机构,需要保证实验结果的准确性...
查看详细 >>支原体去除的实验步骤通常包括以下几个阶段: 1. 支原体检测:在进行去除之前,首先要确认细胞培养物是否受到支原体污染。这可以通过多种方法实现,如PCR法、LAMP法或支原体培养法。 2. 选择合适的去除试剂:一旦确认存在支原体污染,需要选择一种有效的去除试剂。 3. 去除试剂的添加:根据去除试剂的说...
查看详细 >>免疫沉淀技术(Immunoprecipitation, IP)是一种利用抗体与特定蛋白质结合的特性,从复杂样本中分离和纯化目标蛋白质的实验方法。这项技术在生物医学研究中有着广泛的应用场景,以下是一些主要的应用领域: 1. 蛋白质相互作用分析:通过免疫沉淀技术,研究人员可以研究蛋白质之间的相互作用,揭示蛋白质复合物的组成以及它们在...
查看详细 >>例如,可以用于研究蛋白质的相互作用,如蛋白质与DNA、RNA或其他蛋白质的结合;可以用于研究蛋白质的定位,如蛋白质在细胞中的定位或亚细胞定位;还可以用于研究蛋白质的功能,如酶活性、信号转导等。总之,蛋白免疫沉淀是一种重要的实验技术,可用于研究蛋白质的相互作用、定位和功能。通过选择合适的抗体、细胞或组织的裂解、免疫沉淀、洗涤和蛋白质的分离和...
查看详细 >>细胞培养中支原体难以彻底消灭的原因主要包括以下几点: 1. 无细胞壁结构:支原体是没有细胞壁的微生物,这使得许多作用于细胞壁的抗*素对支原体无效。 2. 微小体积:支原体体积小,能够穿过常规的除菌滤膜,例如0.20微米甚至0.10微米的滤膜。 3. 隐匿性:支原体污染初期很难被察觉,它们在普通光学显微镜下几乎不...
查看详细 >>在科研中,支原体检测是确保细胞培养纯净性的重要环节。以下是一些在科研中常见的支原体检测方法: 1. 支原体培养法:这是一种传统的检测方法,通过将细胞培养物接种到特定的培养基中,观察是否有支原体生长。这是直接的检测方法,但耗时较长,通常需要数周时间。 2. DNA染色法:使用荧光染料(如Hoechst或DAPI)染色细胞核...
查看详细 >>免疫沉淀技术是洞察基因表达调控机制的重要途径,为我们揭示了基因转录和翻译过程中的精细调控网络。在基因转录调控的研究中,免疫沉淀技术可以用于捕获与特定基因启动子区域结合的转录因子复合物。通过分析这些复合物的成分,能够确定哪些转录因子参与了基因的或抑制,进而揭示基因表达的调控机制。对于RNA结合蛋白与mRNA的相互作用研究,免疫沉淀技术同样具...
查看详细 >>ChIP(染色质免疫沉淀)实验是一种用于研究蛋白质与DNA相互作用的技术。以下是ChIP实验的实验设计概述: 1. 目标蛋白的选择:确定您想要研究的目标蛋白,例如特定的转录因子或组蛋白修饰。 2. 样本的准备:根据研究的需要选择合适的细胞或组织样本。 3. 抗体的选择:选择具有高特异性和亲和力的抗体,这对于实验的成功...
查看详细 >>免疫共沉淀分析(Co-IP)实验原理与IP十分类似,基本的技术都是采用目标抗原特异性的固相化抗体;但IP的目标是纯化单一抗原,而Co-IP旨在分离抗原及与抗原结合的蛋白质或配体。 在Co-IP实验中,已知抗原称为诱饵蛋白,与之结合的蛋白则称为靶蛋白。靶蛋白可能是一些复杂的伴侣蛋白、信号分子、结构蛋白、辅助因子等,蛋白间相互作用强度范围...
查看详细 >>支原体是一类细菌,由于缺乏细胞壁,具有灵活的膜结构。这使得支原体的形态多变,很难在高倍显微镜下识别。并且能够抵抗压力、温度、渗透压和脱水,对许多针对细胞壁合成的常见抗*素具有抗性。它们的体积非常小,直径通常在0.15~0.3μm,因此能够轻易地穿过过滤系统。支原体能在哺乳动物细胞培养中可以高浓度生长,而不引起明显的混浊或其他可见的污染...
查看详细 >>qPCR法,即定量聚合酶链式反应(QuantitativePolymeraseChainReaction)法,在支原体检测中的应用主要体现在以下几个方面: 1. 快速定性检测:qPCR法可以快速检测生产原料、细胞库、病毒种子、病毒或细胞收获液、治*用细胞中潜在的支原体污染。 2. 临床样本检测:qPCR法可用于检测实验室样本...
查看详细 >>细胞培养中建议使用支原体检测的原因主要有以下几点: 1. 支原体污染率高:常规细胞培养中支原体污染率保守估计在15-35%之间。 2. 影响实验结果:支原体污染会严重干扰实验结果的可信度,影响培养细胞的形态和生理特征。 3. 难以用光学显微镜检测:支原体是极小的细菌,其细胞膜周围没有细胞壁,无法用光学显微镜检测到。 ...
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