在体光纤成像记录在自由活动动物的深部脑区实现光信号记录和神经细胞活性调控;高质量,亚细胞分辨率的成像;多波长成像,实现较多的钙离子成像(GCaMP or RCaMP),和光遗传实验,特定目标光刺激;在体光纤成像系统是模块化设计,使用者拥有很高的灵活性,可以随时根据研究需要对系统进行调整,比如调整光源,波长,滤光片,相机等。在深部脑区选定的特定神经细胞或部分获得连续的实验数据流,然后对单细胞提取密度轨迹。钙离子成像轨迹也可以被同步,与其他行为学实验(摄像拍摄,奖励设备等)同步时间标记。在体光纤成像记录为一项新兴的分子、 基因表达的分析 检测技术。珠海钙荧光指示蛋白病毒光纤成像方案
在体光纤成像记录的应用作为一项新兴的分子、 基因表达 的分析 检测技术, 在体生物光学成像已成功应用于生命科学、 生物医学、 分子生物学和药物研发等领域, 取得了大量研究成果, 主要包括:在体监测坏掉的的生长和转移、 基因疗于中的基因表达、 机体的生理病理改变过程 以及进行药物的筛选和评价等,利用在体生物光学成像技术, 通过荧光素酶或绿色荧光蛋白标记坏掉的细胞, 可以 实时监测被标记坏掉的细胞在生物体内生长、转移、 对药物的反应等生理和 病理活动, 揭示坏掉的发生的发展的细胞和分子机制。武汉实时成像光纤在体光纤成像记录待成像物体所处环境为血管,支气管。
动物体内很多物质在受到激发光激发后,会发出荧光,产生的非特异性荧光会影响到检测灵敏度。背景荧光主要是来源于皮毛和血液的自发荧光,皮毛中的黑色素是皮毛中主要的自发荧光源,其发光光线波长峰值在 500 一 520 nm 左右,在利用绿色荧光作为成像对象时,影响较为严重,产生的非特异性荧光会影响到检测灵敏度和特异性。动物尿液或其他杂质如没有及时打扫,成像中也会出现非特异性信号。由于各厂商的图像分析软件不同,实验数据分析方法也有区别。活的物体成像系统使用时,实验者考虑到非特异性杂信号,以及成像图片美观等方面,可能会调节信号的阈值,因此在在体光纤成像记录分析信号光子数或信号面积时,应考虑阈值的改变对实验结果的影响。正确选择 ROI 区域,可提高分析实验数据的准确性。
在体光纤成像记录的目的是实时检测细胞的活性变化。基于钙离子浓度变化的荧光成像技术被较多用来记录神经元活性。在体光纤记录方法与传统的在体电生理记录方法有着不同的特点,光纤记录因其稳定、方便、易上手而应用较多。首先,将荧光蛋白表达在特定类型的神经元中,光纤记录可以实现细胞类型特异性的活性检测,而用电生理记录的方法记录特定类型的神经元的活性比较困难。其次,电生理记录容易受到环境中的电信号以及动物的行为动作影响,而光纤记录相对来说有着较强的抗干扰性能。然后,光纤记录相对稳定,可以很容易实现长时程的活性检测,例如动物的整个学习过程,而利用电生理记录实现起来则相对困难。较后,光纤记录用神经元群体的荧光强度变化来表征神经元整体的活性变化,不能反映单个神经元的活性,而电生理记录则能够检测到单个神经元的活性,具有更高的空间分辨率。在体光纤成像记录在脑功能研究中具有较多的用途。
小动物在体光纤成像记录具有灵敏度高、直观、操作简单、能同时观测多个实验标本,相比 PET、SPECT 无放射损害等优点,但也有其自身的缺陷,例如动物组织对光子吸收、空间分辨率较低等问题,因而仍需不断地完善和改进。小动物活的物体成像按成像性质属于功能成像,如何能更好地与结构成像技术相结合,使实验结果不但能够定量,而且还能精确定位,这是活的物体成像技术今后的发展方向之一。成像技术可以提供的数据有对的定量和相对定量两种。在体光纤成像记录调整光源,波长,滤光片,相机。汕头神经元光纤成像记录技术原理
在体光纤成像记录的工作原理是将光源入射的光束经由光纤送入调制器。珠海钙荧光指示蛋白病毒光纤成像方案
单光纤在体光纤成像记录与内窥镜结合,实现了超细内窥。超细内窥镜在一些特殊检测环境(如耳、鼻、心、脑等)中,可实现体内无创伤检查。人体耳蜗在人耳内部深处,由于耳道的结构复杂,很难从耳外观察内部的结构,采用超细内窥镜,可以让内窥镜通过耳道,直接进入耳朵内部,然后对内部结构进行观察。对于人体的细小腔道结构(如血管、乳管和支气管等),在体光纤成像记录以前无法从腔道内部进行检查,只能通过超声B超和医学CT等医学影像技术从体外进行成像,成像分辨率低,而且不能对腔道内部的生物状态进行实时观察。通过超细内窥镜,可以将光纤探头通过导管扩张器直接插入腔道,探头所在位置的图像直接显示到计算机或显示器屏幕上,医生可以直观地进行诊断和分析。珠海钙荧光指示蛋白病毒光纤成像方案
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在体光纤成像记录系统在成像速度和分辨率方面还存很多不足。在成像系统的传输矩阵测试阶段,必须采用SLM 实现相位调制,而SLM 器件的响应速度比较低,帧率只能达到几百赫兹,一些特殊的器件可以达到20 kHz,但对于像素为100pixel×100pixel的成像区域进行逐点成像,成像速率只能达到2 frame/s,在实际应用中有很大的局限性。SLM 器件的光效率较低,体积较大,不利于系统集成和结构微型化。单光纤成像系统需要预先测定光纤的传输特性(即光纤传输矩阵),而传输矩阵会受光纤形态(如弯曲、压力和温度)的影响。如果光纤在使用过程中受到外界的扰动,那么传输矩阵会发生变化,对成像产生较大影响。在体...