阳离子脂质体合成中常用的分子是中性脂质二油基磷脂酰乙醇胺(DOPE)。DOPE的作用是促进膜融合，并有助于质膜或核内体的不稳定。此外，由于阳离子脂质相互排斥，因此需要DOPE等辅助脂质来稳定阳离子脂质体（CLs）悬浮液，并抵消其他载体如聚乙烯亚胺(PEI)和树状大分子中存在的阴离子糖胺聚糖的抗转染作用。没有中性脂质的脂质体具有较低的转染率，尽管情况并非总是如此。不同的转染率可能是由用于配制脂质体的阳离子:中性脂质的不同比例引起的。如上所述，CLs介导的核酸转移的成功取决于许多因素，这些因素可能解释了脂质体(脂质体介导的转染)的内在变异性，特别是在体内。是由非离子核酸与阳离子脂质体（CLs）表面结合，形成多层脂质-核酸复合物而形成的。DNA转染试剂毒性低
转染时通常推荐使用血清减少或无血清培养基，包括阳离子转染试剂，如Lipofectamine、HiperFect 和EndofectinMax。这种转染活动需要形成阳离子脂质体-DNA复合物，这需要带正电的脂质体分子和带负电的核酸之间的相互作用。因此，血清中负电荷分子的存在可能会影响这种复杂的相互作用，从而影响转染效率。然而，发现10%血清的存在导致FuGENE HD、jetPEI、Lipofectamine 2000和Arrest-In转染MCF-7、HeLa、C2C12和MC3T3的转染效率更高。研究表明，转染中少量的血清可以通过调节转染复合物的zeta电位来改善转染复合物与其宿主细胞表面之间的表面相互作用。大鼠转染试剂优惠纳米颗粒可以参与内体途径，并可以通过细胞质将DNA运输到细胞核。
转染时间：转染时间的长短也会影响转染效率。过长或过短的转染时间都可能导致转染效率降低。在阳离子脂质体Lipofectamine2000对PC12细胞的转染实验中，转染时间为6h时转染效率较高3。在优化宫颈*细胞系转染效率的实验中，Hela细胞系和Siha细胞系的比较好转染时间为24小时1。细胞接种密度：细胞接种密度也会影响转染效率。过高或过低的细胞接种密度都可能导致转染效率降低。在脂质体介导法转染肿瘤细胞效率的优化实验中，2×105接种密度时转染效率比较高9。在优化宫颈*细胞系转染效率的实验中，Hela细胞系和Siha细胞系的比较好接种密度分别为1.5×104（每孔24孔板）1。血清的有无：血清的存在可能会影响脂质体转染效率。一些实验表明，血清可能会降低转染效率，而另一些实验则表明血清对转染效率没有影响。在优化宫颈*细胞系转染效率的实验中，与含血清培养基相比，只有Siha细胞在无血清培养基中培养时在转染前获得了更高的转染效率（P＜0.01）1。在脂质体介导法转染肿瘤细胞效率的优化实验中，血清在本实验室条件下并不影响转染效率。
网格蛋白介导的内吞途径呼吸道合胞病毒（RSV）是导致婴幼儿***的主要病毒病原体。研究表明，网格蛋白介导型内吞途径是目前研究得较为透彻且经典的病毒入胞途径。其中网格蛋白在此途径中的地位很重要。通过针对网格蛋白重链的小干扰RNA（siRNA）抑制网格蛋白的表达，可以有效的抑制RSV***Hela细胞。这提示网格蛋白介导的内吞途径在病毒感染细胞过程中发挥重要作用，同时也暗示了在某些情况下，RNA转染试剂可能利用这一途径进入细胞21。二、小窝蛋白介导的内吞途径在研究非病毒载体用于小干扰RNA（siRNA）递送时发现，将用组氨酸和半胱氨酸修饰的HIV-1Tat肽（mTat）与聚乙烯亚胺（PEI）结合，并与阳离子两亲脂质基试剂INTERFERin（INT）组合成的杂合载体（mTat/PEI/INT）能高效递送siRNA。研究表明，FilipinIII和β-环糊精（小窝蛋白介导的内吞作用抑制剂）能***抑制mTat/PEI/INT/siRNA转染，而氯丙嗪（网格蛋白介导的内吞作用抑制剂）则不能抑制mTat/PEI/INT/siRNA转染。此外，mTat/PEI/INT在4°C时的转染效率明显低于37°C。这些结果表明，mTat/PEI/INT作为一种潜在的有吸引力的非病毒载体用于siRNA递送，其转染过程可能是通过小窝蛋白介导且依赖温度的内吞途径实现的。并被困在核内小体中，从这些囊泡结构中释放出来，进入核周区域，后进入细胞核。
脂质颗粒的加入导致内体DNA释放增加。Delgado等人通过在肾细胞中添加鱼精蛋白，设法提高了固体脂质纳米颗粒的转染效率，但与不添加鱼精蛋白的对照组相比，相同的多功能单元，DNA/鱼精蛋白/SLN(固体脂质纳米颗粒)，降低了HEK 293细胞系(人胚胎肾细胞)的转染效率。这给了我们希望，通过加入必要的配体的可能性，使用纳米颗粒的转染可能会调整到给定的细胞类型。Bahrami et al.经表明，不同种类的纳米颗粒以不同的方式与细胞膜结合。形成这些键的差异取决于它们的球形或非球形形状，也取决于不同纳米颗粒所表现出的各种粘附电位以及它们进入后引起的膜形状变化。Prabha等人的实验表明，纳米颗粒的大小对COS-1(非洲绿猴肾细胞)和HEK 293细胞系的转染效率有***影响:使用较小的纳米颗粒时，转染效率分别是使用较大纳米颗粒的27倍和4倍。在两种分散体中，小颗粒和大颗粒的细胞摄取、表面电荷和DNA释放是相同的，这表明使用纳米颗粒进行基因传递的效率受到许多因素的影响，它们的使用应该根据细胞类型和应用条件进行具体调整。此外，用作纳米颗粒分散剂的不同物质，如十六种不同类型纳米颗粒的猪肺表面活性剂和牛血清白蛋白，对其在溶液中的团聚有***影响。基于病毒的转染，或者更具体地称为转导，涉及使用病毒载体将特定的核酸序列带入宿主细胞。shRNA转染试剂疫苗
其结构的一个共同特征是分子中存在许多带正电的基团，这些基团被质子化成带正电的聚合物。DNA转染试剂毒性低
核酸与转染试剂的比例对转染效率也有影响。在一项涉及原代人成肌细胞的研究中，使用不同的核酸比例来比较转染效率的影响，转染试剂包括FuGENE6、Effectene和ExGen500(一种基于pei的试剂)。该研究的一个***发现是，转染效率可能不一定与所用试剂的体积直接相关。例如，2µgDNA与5µLFuGENE6试剂的比例被证明可以产生比较好的转染效率，而更低或更高的DNA与试剂的比例并不能提高效率。在另一项涉及转染人胃腺*细胞系的研究中也观察到类似的发现，即在一系列组合中使用比较高转染试剂与DNA比体积测试时，转染效率并未达到比较好。使用不成比例的高转染试剂量会导致不必要的细胞毒性，从而降低整体转染结果。因此，确定合适的核酸与试剂比例是启动新的转染研究以实现高转染效率和低细胞毒性的重要步骤。DNA转染试剂毒性低
