鸡胚成纤维（CEF）细胞、293细胞、PK细胞和MDCK细胞：在RNA干涉中，转染试剂的用量与siRNAs的量成正相关关系，但转染试剂对细胞有一定毒性作用。相同用量的RNAiFectTM和SuperFect两种转染试剂对293细胞、PK细胞和MDCK细胞的生长影响远远小于对CEF细胞的影响。两种转染试剂用于外源小分子转染时，建议在293细胞、PK细胞和MDCK细胞上的用量不超过3ul。两种转染试剂对CEF细胞的毒性较大，不适合用于转染111316。MEF细胞、3T3细胞、Hela细胞及MCF-7细胞：分别用RNAiMax及MessageMax将modGFP转染入MEF细胞，流式分析发现MessageMax的转染效率略高于RNAiMax，但两者没有统计学差异。但是流式分析和荧光显微镜观察均表明MessageMax转染后1周内的蛋白翻译表达效率更高，是更高效的modRNA转染试剂。MessageMax能将modGFP高效转染入3T3细胞、Hela细胞及MCF-7细胞中，并实现modGFP和modmCherry在MEF细胞中的共转及核内因子nGFP和mTBX5在MEF细胞核中的定位。影响物理转染或机械转染效率的因素在很大程度上取决于这些方法的基本原理。中国台湾深圳转染试剂
纳米颗粒的主要特性使它们能够用于细胞转染，但似乎找到一种既能改善基因表达又不影响细胞、不对细胞造成损害的比较好技术也至关重要。纳米颗粒参与内皮运输的能力使其能够精心设计**精确的方法，将基因结构靶向到特定的作用位置。来自不同化合物和元素的纳米颗粒的作用方式与转染的非病毒载体相同，这使它们能够通过内吞作用将DNA运输过细胞膜。DNA被包裹起来，很容易从核内体中释放出来，也被核酸酶保护着不被消化。由于有许多不同种类的纳米颗粒，找到**适合转染哺乳动物细胞的纳米颗粒是至关重要的。将纳米颗粒与其他化合物连接成多功能、复杂的运输单元，可以提高穿越细胞膜和细胞内运输的效率。将蛋白质或多肽结合到纳米颗粒上，根据细胞类型的不同，转染效率提高了5到10倍。武汉转染试剂好用选择适合的 RNA 转染试剂是一个复杂的过程，需要综合考虑多个因素。
RNA电穿孔高效转染原代淋巴细胞：使用体外转录的mRNA通过电穿孔可以实现高基因转染效率和低转染相关毒性。例如，在用GFP或mCD62L转染的受激原代人和鼠T淋巴细胞中观察到90％以上的转基因表达和80％以上的活细胞。GFPRNA对未刺激的人PBMC或鼠脾细胞进行电穿孔，分别产生95％和56％的GFP⁺细胞。此外，基因表达迅速且持久，对经过RNA电穿孔的T淋巴细胞未观察到不良影响7。五、优化共转染方法整合共转染和平行共转染：研究不同的共转染和连续转染方法，特别是体外转录信使RNA（IVTmRNA）。对于在纳米载体形成之前预混合的IVTmRNAs（整合共转染）和同时用单独形成的纳米载体转染细胞（平行共转染），分析决定共转染效率的定量参数。同时递送siRNA和mRNA也表明整合方法的比较高共转染效率，但由于两个**运营实体的峰值输出在动力学上不同，连续交付的效率比较高。
联合使用其他技术优化DNA和RNA转移的转染试剂在肌肉细胞中的应用：在C2C12细胞中，比较了五种商业转染试剂（Lipofectamine®3000、Viafect™、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）的转染效率7。通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度，所有试剂都达到了超过60%的转染效率，且对细胞生长和活力的影响有限。然而，在C2C12细胞中优化的用于DNA转移的条件下，这些试剂对siRNA的转移效率较低，并且对原代肌肉细胞的毒性较高。这提示在使用转染试剂时，可以通过联合使用其他技术或优化转染条件，以提高转染效率并降低细胞死亡。例如，可以进一步研究不同试剂之间的联合使用，或者优化转染后的培养条件，以降低细胞毒性。综上所述，在不同细胞模型中提高RNA转染试剂的转染效率同时降低细胞死亡，可以通过选择合适的转染试剂、优化转染条件以及联合使用其他技术等方法来实现。未来的研究可以进一步深入探讨不同细胞模型中比较好的转染策略，以满足不同研究领域的需求。纳米颗粒，由于其在DNA转运到细胞中的保护能力，在不久的将来可以用作转基因的非病毒载体。
考虑细胞毒性低细胞毒性的转染试剂对于保持细胞的活性和正常生理功能至关重要。评估细胞活力：可以通过检测细胞的存活率、增殖能力等指标来评估转染试剂的细胞毒性。在研究不同转染试剂对C2C12细胞的转染效率时，通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度，使所有试剂在达到较高转染效率的同时，对细胞生长和活力的影响有限6。在比较不同转染试剂递送siRNA的摄取、敲低效率和毒性情况的研究中，新开发的CALNPRNAi转染试剂转染效率***高于传统转染试剂，同时毒性比较低7。选择温和的试剂：一些转染试剂可能对细胞的毒性较小，例如基于脂质的转染试剂通常比基于病毒的转染试剂更温和。在颅内递送合成mRNA的研究中，使用常用的转染试剂将合成mRNA递送至小鼠大脑，结果表明该模型中合成mRNA可以成功递送至大脑，且没有可测量的毒性8。研究人员集中研究了将合成t细胞免疫原作为DNA疫苗使用的方法。吉林北京转染试剂
小RNA和质粒DNA的共转染可用于评估转染效率。中国台湾深圳转染试剂
对基因表达的影响：在微小RNA-1180转染对肾*细胞生长的影响的研究中，肾*细胞分为两组：dsControl组和miR-1180组。实时定量（qRT）-PCR检测p21mRNA的表达变化，结果显示转染miR-1180后，786-O和ACHN细胞中p21mRNA水平分别上调（P〈）和（P〈），p21蛋白表达趋势与qRT-PCR结果相符，CDK4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达明显下调。同时，流式细胞术（FCM）检测细胞周期变化显示细胞周期被阻滞在G0/G1期，MTS结果显示细胞活力明显降低，集落形成实验显示细胞增殖能力降低。结论是miR-1180能******肾*细胞中p21蛋白的表达，并抑制肾*细胞786-O和ACHN的生长1。在微小RNA-330-5p过表达对宫颈*细胞C33A中肿瘤坏死因子受体相关因子4（TRAF4）基因表达的抑制作用和对C33A细胞增殖的影响的实验中，通过Lipofectamine2000转染试剂分别向宫颈*细胞系C33A瞬时转染miR-330-5p模拟物（设为实验组）或者转染miR-NC（设为对照组），结果显示与对照组相比，实验组C33A细胞中TRAF4mRNA下降（p＜），TRAF4蛋白下降（p＜）。集落形成实验显示，实验组C33A细胞的增殖能力明显下降（p＜）。结论是miR-330-5p可通过降低宫颈*细胞C33A中TRAF4的表达抑制宫颈*细胞C33A的增殖。 中国台湾深圳转染试剂
