emlikiForestvirus相关细胞:利用基于SemlikiForestvirus的RNA和DNA向量研究非病毒细胞穿透肽递送载体PepFect6与阳离子脂质体Lipofectamine2000的转染效率,并评估它们对病毒复制的影响。结果表明,PepFect6***证明能够将大(13-19kbp)构建体转运穿过细胞膜。但使用PepFect6试剂递送的DNA分子被发现比使用Lipofectamine2000试剂递送的DNA分子晚约。***,虽然PepFect6和Lipofectamine2000试剂都可用于alphavirus研究,但PepFect6更受青睐,因为它不会引起正常细胞表型的变化,也不会影响先前转染细胞中病毒的正常复制***周期12。奶牛子宫内膜原代上皮细胞:应用带有FAM标记的miRNA-185mimics为报告基因,检测两种不同转染试剂(LipofectamineRNAiMAX与Lipofectamine2000)在细胞接种12、18、24h后的转染效率。结果显示,无论使用Lipofectamine2000还是LipofectamineRNAiMAX作为奶牛子宫内膜原代上皮细胞的转染试剂,各组间12h的转染效率均极***高于18、24h,18h的转染效率均极***高于24h;LipofectamineRNAiMAX各时间点的转染效率均极***高于Lipofectamine2000。使用LipofectamineRNAiMAX作为奶牛子宫内膜原代上皮细胞的转染试剂时,12h的荧光强度极***高于18、24h。 纳米颗粒的主要特性使它们能够用于细胞转染。难转细胞转染试剂性价比高
阳离子壳交联的类Knedel纳米粒子作为转染试剂结合机制:阳离子壳交联的类Knedel纳米颗粒(cSCKs)含有不同百分比伯胺和叔胺,通过与siRNA结合来发挥作用18。含100%伯胺的cSCK在HeLa细胞中的沉默效率比较高,能够抑制人血清中siRNA降解以及转染HeLa和小鼠巨噬细胞系。与融合的GALA肽复合可以增强iNOS在较低siRNA浓度下的siRNA沉默,这被证明可以增强摄取后的内体逃逸,进一步说明其结合机制可能涉及与siRNA的紧密结合以及促进细胞内转运。作用特点:cSCK-pa100在HeLa细胞、293T细胞和人支气管上皮(HEK)细胞中显示出比Lipofectamine2000更高的沉默效率,但在人支气管上皮(BEAS-2B)细胞和人乳腺上皮(MCF10a)细胞中可比。在小鼠巨噬细胞系中,cSCK-pa100表现出更大的iNOS沉默,并提供了更好的保护免于血清降解,证明了其作为siRNA转染剂的潜在用途。综上所述,不同类型的阳离子RNA转染试剂在结合RNA分子的机制上存在差异,主要涉及静电相互作用、纳米复合物形成以及与其他分子的协同作用等方面。这些差异导致了它们在转染效率、细胞毒性、对不同细胞类型的适用性等方面的不同特点。上海转染试剂优惠研究人员集中研究了将合成t细胞免疫原作为DNA疫苗使用的方法。
在腺相关病毒载体(AAV)生产中的应用纳米凝胶由微流体产生,作为标准转染试剂如聚乙烯亚胺-MAX(PEI-MAX)的新型替代品,用于生产具有可比产量的AAV载体。在pDNA重量比为1:1:2和1:1:3(分别为pAAV顺式质粒、pDG9衣壳反式质粒和pHGTI辅助质粒)时形成纳米凝胶,在小规模下,载体产量与PEI-MAX相比没有***差异。氮/磷酸盐比为5和10的1:1:2重量比的纳米凝胶分别产生约8.8×10⁸vg/mL和约8.1×10⁸vg/mL的产量,而PEI-MAX约为1.1×10⁹vg/mL。在大规模生产中,优化的纳米凝胶以约7.4×10¹¹vg/mL的滴度产生AAV,与PEI-MAX的约1.2×10¹²vg/mL相比没有统计学差异,表明可以用易于实施的微流体技术以相对较低的成本实现与传统试剂相当的滴度10。
在重组蛋白生产中的应用聚(β-氨基酯)(PBAEs)作为一类阳离子聚合物,与常用的线性25kDa聚乙烯亚胺(PEI)相比,在重组蛋白生产中表现出了优势。在人类胚胎肾293F(HEK)和中国仓鼠卵巢-S(CHO)细胞悬浮液中,几种PBAEs在转染效率和增强胞质报告基因的产生方面优于线性25kDaPEI1。对于分泌蛋白,一种模型PBAE在20至2000毫升的培养规模下,与线性25kDaPEI相比,增加了三种不同分泌抗体的产生。这表明PBAEs可作为有吸引力的试剂用于重组蛋白生产,因为它们提高了转染效率并增加了蛋白质产量。超声辅助转染涉及在宿主细胞膜上制造微小的孔,以促进核酸(包括DNA和RNA)的传递。
磁共振成像(MRI)技术磁共振成像技术是目前较为先进的医学影像技术之一,在动物成像中也得到了广泛应用。优化实验动物眼部磁共振成像技术:王战京、雷建锋、焦昆的研究通过改进实验动物眼部的磁共振成像技术,提高了眼科疾病研究的准确性,并促进了新治疗方法的研发1。他们选用了健康的SD大鼠,利用Bruker7.0TMRI扫描仪进行检测,通过精确的定位和细致的扫描参数调整,对比了T2WI与FLASH两种成像技术。研究结果显示,FLASH序列在眼部结构成像中展现出更高的信噪比,从而提供了更为清晰的图像和更丰富的组织细节。3T动物磁共振成像传导冷却超导磁体研究:陈顺中、王秋良、孙万硕采用传导冷却技术研制了一台3T动物磁共振成像超导磁体9。该磁体采用主动屏蔽型结构,包含同轴排列的6个主线圈和2个屏蔽线圈。研究还采用了分段和失超传播加速策略的被动失超保护方法,保护超导磁体免于意外失超造成的损害。低温系统使用双极G-M制冷机直接将超导磁体从室温冷却到工作温度,无需液氦。实验结果显示,该超导磁体在直径φ180mm的球形区域产生高均匀度磁场用于成像。基于病毒的转染,或者更具体地称为转导,涉及使用病毒载体将特定的核酸序列带入宿主细胞。难转细胞转染试剂性价比高
阳离子聚合物是一种非病毒载体。难转细胞转染试剂性价比高
核细胞、关节软骨细胞、间充质干细胞(MSCs):选择两种合成转染试剂(阳离子脂质商业试剂LipofectamineRNAiMAX和聚乙烯亚胺(PEI))以及两种天然衍生转染试剂(多糖壳聚糖(98%脱乙酰化)和透明质酸(20%酰胺化)),用于将siRNA递送到包括髓核细胞、关节软骨细胞和间充质干细胞在内的原代间充质细胞中。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(***DH)作为内源性模型基因,在转染后第3天和第6天评估由20nM或200nMsiRNA引起的沉默程度。除了沉默效率外,还评估了细胞毒性、DNA含量变化和细胞分化潜能等非特异性影响。在四种转染试剂中,基于商业脂质体的试剂在20nMsiRNA时是**有效的siRNA递送试剂,其次是壳聚糖。使用阳离子脂质体、壳聚糖和PEI转染显示出不同程度的活力和DNA含量下降,这取决于所评估的siRNA剂量和细胞类型,但与***DH敲低无关。一些对DNA含量的影响并不伴随着活力的相应变化。然而,细胞周期抑制或进展的标记基因(如p21和PCNA)的表达变化不能解释DNA含量的变化。有趣的是,发现了***DH活性的非特异性上调,这***于软骨细胞15。肝*细胞HepG2和:比较两种人类细胞模型中两种转染剂,即基于脂质体的Lipofectamine™RNAiMAX和基于聚合物的GenMute™。 难转细胞转染试剂性价比高