考虑多因子转染能力如果实验需要同时转染多个RNA分子或进行共转染实验，那么选择具有多因子转染能力的试剂是重要的。共转染效果：一些转染试剂可以有效地实现多个RNA分子的共转染，而另一些试剂可能在共转染方面效果不佳。在脂质体方法用于modRNA转染各种类型细胞的初步研究中，MessageMax能将modGFP高效转染入多种细胞中，并实现modGFP和modmCherry在MEF细胞中的共转及核内因子nGFP和mTBX5在MEF细胞核中的定位5。选择适合多因子转染的试剂：根据实验需求，选择能够满足多因子转染要求的转染试剂。例如，如果实验需要同时转染多个基因或进行基因编辑实验，那么选择具有多因子转染能力的转染试剂可以提高实验效率。化学转染的效率可能取决于几个因素，如使用的试剂类型、靶细胞的来源和性质，以及选择的DNA与试剂比例。shRNA转染试剂指导
脂质体组成：脂质体的组成对转染效率有重要影响。不同的脂质体可能具有不同的电荷性质、大小和稳定性，这些因素都会影响脂质体与细胞的相互作用。阳离子脂质体通常具有较高的转染效率，因为它们可以与带负电荷的DNA结合，并通过静电作用与细胞表面结合。例如，Lipofectamine2000和Lipofectamine3000都是常用的阳离子脂质体，它们在不同类型的细胞中都表现出较高的转染效率11316。脂质体的组成还可能影响其在细胞内的释放和稳定性。一些脂质体可能更容易被细胞内的酶降解，从而降低转染效率。上海干细胞转染试剂deae-葡聚糖是一种化学修饰的葡聚糖类似物。
阳离子树状大分子和阳离子脂质作为转染试剂结合机制：阳离子树状大分子如第五代聚酰胺酰胺树状大分子（PAMAMG5）和阳离子脂质如N-[1-(2,3-二醇油酰氧基)]-N,N,N-三甲基丙烷丙烷磺酸甲酯（DOTAP）作为转染试剂时，通过与小干扰RNA（siRNA）结合形成纳米复合物来实现转染1216。其结合过程涉及多种理化特性的相互作用，如原子力显微镜、凝胶电泳、siRNA结合和释放测定以及大小和ζ电势测量等方法可用于表征试剂-siRNA纳米复合物的理化特性。高摩尔比的DOTAP和低摩尔比的PAMAM可以比商业试剂相对更好地敲除OCT4转录，说明它们在结合RNA分子方面具有特定的优势。这种结合机制可能与它们的阳离子性质有关，能够与带负电的RNA分子通过静电相互作用结合。作用特点：在小鼠胚胎干细胞中进行评估发现，这些转染试剂对短核酸转染具有适当效率，从临床角度来看，有助于将短核酸分配到干细胞疗法中。
在腺相关病毒载体（AAV）生产中的应用纳米凝胶由微流体产生，作为标准转染试剂如聚乙烯亚胺-MAX（PEI-MAX）的新型替代品，用于生产具有可比产量的AAV载体。在pDNA重量比为1:1:2和1:1:3（分别为pAAV顺式质粒、pDG9衣壳反式质粒和pHGTI辅助质粒）时形成纳米凝胶，在小规模下，载体产量与PEI-MAX相比没有***差异。氮/磷酸盐比为5和10的1:1:2重量比的纳米凝胶分别产生约8.8×10⁸vg/mL和约8.1×10⁸vg/mL的产量，而PEI-MAX约为1.1×10⁹vg/mL。在大规模生产中，优化的纳米凝胶以约7.4×10¹¹vg/mL的滴度产生AAV，与PEI-MAX的约1.2×10¹²vg/mL相比没有统计学差异，表明可以用易于实施的微流体技术以相对较低的成本实现与传统试剂相当的滴度10。肌内注射脂质体不能引起强烈的毒性反应，这与肺内或静脉注射途径的情况不同。
联合使用其他技术优化DNA和RNA转移的转染试剂在肌肉细胞中的应用：在C2C12细胞中，比较了五种商业转染试剂（Lipofectamine®3000、Viafect™、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）的转染效率7。通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度，所有试剂都达到了超过60%的转染效率，且对细胞生长和活力的影响有限。然而，在C2C12细胞中优化的用于DNA转移的条件下，这些试剂对siRNA的转移效率较低，并且对原代肌肉细胞的毒性较高。这提示在使用转染试剂时，可以通过联合使用其他技术或优化转染条件，以提高转染效率并降低细胞死亡。例如，可以进一步研究不同试剂之间的联合使用，或者优化转染后的培养条件，以降低细胞毒性。综上所述，在不同细胞模型中提高RNA转染试剂的转染效率同时降低细胞死亡，可以通过选择合适的转染试剂、优化转染条件以及联合使用其他技术等方法来实现。未来的研究可以进一步深入探讨不同细胞模型中比较好的转染策略，以满足不同研究领域的需求。脂质复合物(CLNACs)通过网格蛋白参与的内吞作用进入细胞。shRNA转染试剂现货
为了在体外和体内可重复地传递基因和siRNA，含有核酸的脂质体、脂丛和多丛的配方需要精确组成转染试剂。shRNA转染试剂指导
在人类多能干细胞衍生的心肌细胞（HPSC-CMs）中的应用低转染效率是实现HPSC-CMs在疾病建模和心脏修复研究中广泛应用的障碍。通过优化四个基本参数，即血清补充剂、复制和转染之间的时间、试剂与DNA比以及细胞密度，使用Promega的Viafect™转染试剂能够将HPSC-CMs转染至约95%的效率28。尽管活力有所降低，但转染后的HPSC-CMs仍保持了高纯度和结构完整性，确保了至少14天的转染基因持续表达，为心脏相关疾病的研究开辟了新机遇。在C2C12细胞中的应用C2C12细胞在肌肉领域***使用，但它们和原代成肌细胞一样难以转染，影响了下游实验。虽然自2015年以来超过95%的使用C2C12细胞的报告使用了一种金标准转染剂（如Lipofectamine®），但有研究表明其效率低于30%。通过比较五种商业试剂（Lipofectamine®3000、Viafect™、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）在C2C12细胞中的转染效率，发现通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度，所有试剂都能达到超过60%的转染效率，且对细胞生长和活力影响有限。这些试剂还能在C2C12细胞中转染后高效生成GFP阳性的肌管，但在转染siRNA和对原代肌肉细胞的转染中表现出较低效率和较高毒性3。shRNA转染试剂指导
